
R1: Detection Reagent 1 | R2: Detection Reagent 2 |
Glycine Buffer → 6g/L | 5′-hypoxanthine nucleotide → 3.482g /L |
Purine nucleoside phosphorylase → > 0.5KU/L | 4-Aminoantipyrene → 0.406g /L |
Xanthine oxidase → >0.8KU/LL | |
Peroxidase → >0.6KU/L | |
TOPS → 0.5g/L |
Abbexa是一家致力于为生命科学研究、药物研发及生物技术公司提供优质抗体、蛋白及检测试剂盒等产品的高科技生物技术公司。基于剑桥大学研发技术优势,Abbexa提供包括一抗、二抗、纯化蛋白、ELISA试剂盒、各种酶类及其它多种试剂与研究工具的大量生命科学研究产品。
目前Abbexa的产品涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂,此外,为满足研发人员特殊的实验需要,Abbexa还提供抗体/多肽定制服务。严格的质控标准保证了Abbex产品的高性能,如您对产品不满意,Abbexa将直接提供退/换货服务
CLIAKits 化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA) RNAInterferenceProducts RNA干扰试剂 RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。 由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。 1. RNAi抑制转座子活性 两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关 ①发现蠕虫mut-7基因参与RNAi并且与转座子的转座抑制有关; ②在果蝇中,参与RNAi的RNA解螺旋酶Spindle-E的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。 2. RNAi抵御病毒感染 在拟南芥中研究转基因引起基因沉默时发现,sgs2/sde1基因突变的拟南芥对病毒的侵染表现出高度的敏感性。 3. RNAi参与异染色质的形成和维持 Hall等研究表明,着丝粒同源重复序列和RNAi组分一起正负调节着异染色质的形成并共同促使异染色质组装成核;Vople等在敲除裂殖酵母(S.pombe)的RNAi途径基因(如Argonaute、Dicer、RDRP)时发现异染色质转录得到的dsRNA可以在RNAi途径的参与下,加工成siRNA,siRNA募集异染色质蛋白1(HP1),然后靶向性引起相应异染色质区域的转基因沉默。 4. RNAi参与机体的发育调控及生理代谢 RNAi只抑制转录后的基因,所以RNAi在生物体发育学研究中具有优势。Chuang等用RNAi技术进一步证实了AG、CLV3、AP1、PAN等已知功能基因在拟南芥花发育过程中的功能。在RNAi过程中形成的RISC复合物可根据不同情况分别利用siRNA或stRNA行使不同的功能,但最终均导致特定基因沉默。 IsotypeControl 同型对照 同型对照(IsotypeControl),使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。 同型对照 同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体,与功能阻断抗体发挥同样的功能。 同型对照要与一抗的来源,Ig分型和标记完全一致。 如果一抗是多抗,可以用annormalserum(与一抗相同的正常血清)(mustbethesamespeciesasprimaryantibody)。Thiscontroliseasytoachieveandcanbeusedroutinelyinimmunohistochemicalstaining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同,应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子:比如检测一抗为单抗的mouseantiratCD11b,cloneOX-42purifiedIgG,那么它的isotype是mouseIgG2a,所以可以用purified(纯化的)mouseIgG2a来做OX-42的同型对照(IsotypeControl)。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。 同型对照:是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类,若使用直接免疫荧光染色法,同型对照也应标记荧光色素,如IgG1FITC、IgG2a、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外,同型对照与MoAb所标记的荧光色素、浓度、F:P比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值)应该相同为最佳,这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义,切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照,最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备(如同一品牌)的产品。
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免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜的现像和放大作用,在细胞,亚细胞水平检测各种抗原物质,并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有:免疫荧光组织(细胞)化学技术、免疫酶组织(细胞)化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织(细胞)化学技术是采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,由于受高压汞灯光源的紫外光照射,荧光素发出明亮的荧光,这样就可以分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。
石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
石蜡切片组织茜素红(ALIZARINREDS)钙染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析存档中的石蜡包埋的组织切片中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
茜素红(ALIZARINREDS)是一种蒽醌(anthraquinone)衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐(9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonicacidsodiumsalt),又称媒介红3(MordantRed3)或茜素磺酸钠(Sodiumalizarinesulfonate)。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜素红染色,产生桔红色沉积,但会受到其它金属元素的干扰。
产品内容
脱蜡液(ReagentA)自备
补水液A(ReagentB)100毫升
补水液B(ReagentC)100毫升
补水液C(ReagentD)100毫升
补水液D(ReagentE)100毫升
清理液(ReagentF)30毫升
染色液(ReagentG)10毫升
产品说明书1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;染色液(ReagentG),避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全。有效保证3月
用户自备
小型染色缸:用于石蜡切片的脱蜡操作
光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析
实验步骤
一、脱蜡处理
1.取出10片待测的石蜡包埋的组织切片(注意:石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,此步很重要)
2.(选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3.(选择步骤)室温下静置15分钟
4.按下表依次放进小染色缸里孵育
染色缸
孵育时间
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升补水液A(ReagentB)
3分钟
50毫升补水液B(ReagentC)
3分钟
50毫升补水液C(ReagentD)
3分钟
50毫升补水液D(ReagentE)
3分钟
5.小心移去切片上的补水液D(ReagentE)
6.小心加上200微升清理液(ReagentF)在切片上,铺满整个切片样品表面
7.室温下孵育5分钟
8.小心移去切片上的清理液(ReagentF)
二、样本染色处理
1.小心加上200微升染色液(ReagentG),铺满整个切片样品表面
2.室温下孵育2分钟(注意:可以延长至20分钟);或直至可见桔红色
3.小心移去切片上的染色液(ReagentG)
4.空气中晾干
三、样本澄清处理
1.小心加上200微升补水液B(ReagentC)在切片上,铺满整个切片样品表面
2.小心移去切片上的补水液B(ReagentC)
3.重复实验步骤1和2二次
4.小心加上200微升补水液A(ReagentB)在切片上,铺满整个切片样品表面
5.小心移去切片上的补水液A(ReagentB)
6.重复实验步骤4和5二次
7.小心加上200微升脱蜡液(ReagentA)在切片上,铺满整个切片样品表面
8.小心移去切片上的脱蜡液(ReagentA)
9.重复实验步骤7和8一次
10.放上盖玻片或封片
11.即刻在一般光学显微镜下观察:钙沉积阳性细胞呈现桔红色
注意事项
1.本产品为50次操作
2.操作时,须带手套
3.试剂具有腐蚀性,注意操作安全
4.石蜡包埋前,组织样品须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,否则造成样品支离破碎
5.所有操作在室温下进行
6.试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
7.样品染色避免过度,肉眼可见桔红色即可终止染色
8.组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
9.本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品
质量标准
1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定显色清晰
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教
有没有朋友使用碧云天的细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒做过细胞衰老,本人小白,求相关细胞处理的过程及数据分析方法。贴壁细胞六孔板需要接种多少,染色后怎样计数进行数据处理。谢谢啦!
最近开始做TUNEL染色,第一次按罗氏protocol做的,阴性对照是没有显色的。没做阳性对照。第二次、第三次做出来背景都很深,肾小管每个细胞核上都染上了棕黄色,DAB染色很快,几秒就变一片黄。具体步骤是:1烤片脱蜡至水2.蛋白酶K20ug/ML37℃10分钟3.tunel液冰上配置后加组织上,37度1h。4.pod液37℃30min5.DAB显色。在蚂蚁淘中检索后,优化了实验条件,在蛋白酶K前加了3%H2O2封闭10min,缩短了tunel液至40min。这是第三次的结果大家帮我看看
这是对照组
这是模型组

