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ProImmune/ProM1™ MHC Class I Monomers, biotin labeled/4058
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ProImmune
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转膜:小分子量的蛋白半干转效果比较好,大分子量(100KD)以上建议湿转。具体转膜条件需要多摸一下。30-80KD半干转恒流1mA/cm2,1-1.5h 都可以,大分子湿转100V,2.5h以上应该可以,转完膜丽春 查看更多>
2021-09-14
CO-IMMUNOPRECIPITATION ANALYSIS OF PROTEIN-PROTEIN INTERACTIONSThis protocol uses total cell extracts to analyze putative protein-protein interactions in eukar 查看更多>
一、标本制作  可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。  二、荧光抗体染色方法 查看更多>
我就跑胶和转膜谈一点儿自己的体会1、跑胶 电泳Buffer重复利用的时候要注意,不能混浊,有时候能用个3-4次,有时候第二次都不行了,事先前预电泳一下,看看气泡的均匀度;Buffer一定要淹 查看更多>
一、设备和试剂1.设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PROTEAN 3 El 查看更多>
确定肿瘤的类型时,检测肿瘤细胞的增殖活性时,在某些肿瘤的组织病理诊断中,借助于检测肿瘤细胞表面或细胞内的一些特定的分子,称为肿瘤免疫组织化学标记物。确定肿瘤的类型,除了依靠其临床表现、影像学和形态学特点,还借助于检测肿瘤细胞表面或细胞内的一些特定的分子,例如通过免疫... 查看更多>
Recipies for Cell FusionPhosphate-buffered saline (PBS) (0.01 M Na2HPO4 , 0.15 M NaCl, pH 7.4) sodium phosphate dibasic (Na2HPO4)0.87 g sodium phosphate monoba 查看更多>
Preparation of Nuclear Extracts for Gel Shifts and Westerns BlotsThe following protocol is optimized for about 107 cells (near confluent 10 cm plate). NOTE: AL 查看更多>
Antigen Design & Sera Purification Tech Sheet Antibodies to small peptides have become an essential tool in life science research, with applications includ 查看更多>
6. 染色的选择OO. Western Blot哪种染色好?解答:(1)阴离子染料是最常用的,特别是氨基黑,脱色快,背景低检测极限可达到1.5μg,考马虽然与氨基黑有相同的灵敏度,但脱色慢,背景高。丽 查看更多>
1、染色过强 原因 解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度(一般指浓缩性抗体)抗体 孵育时间:室温1小时或4℃过夜 孵育温度过高,孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB 查看更多>
Studying Protein Interactions by Far-Western BlottingFar-Western blotting was originally developed to screen protein expression libraries with 32P-labeled glut 查看更多>
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免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化,在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果,又能看到细胞的形态,CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒,效果很好。
1)做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色,因为那样会掩盖阳性着色的结果;而且用苏木素复染细胞核也是淡染,若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变,除非有非常典型的表现,一般是有很大的难度的。
2)你是培养的细胞做免疫组化吗?如果是的话,那就每个样本只有一张片子吧?唯一的办法是进行免疫双染,同时做CD34和AFP(甲胎蛋白)。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3)用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化,也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是:早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片,重要的是看其组织学结构,对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞,还是培养的细胞,染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4)如果是切片,也就是说每个样本可以有多张切片,那可以在连续切片上分别染CD34和AFP,拍照时选择相同视野,也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5)用双染最大的问题在于:这两者都表达在胞浆中,染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下,可不可以用免疫荧光双染?这样也很有说服力的
我打算从中山公司定SANTACRUZ公司的mmp-9抗体,但是听师姐说这个公司
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教
一·第二代聚合酶两步法( PV,En Vision) PV-9000是2001年投入美国市场的,它是将二抗抗体分子的单价Fab段与酶聚合在一起,与一抗结合后,直接用底物进行显色的方法。此方法由于简单、快速、敏感性强且避免了内源性生物素所造成的背景染色,以有逐渐取代其他免疫酶组织化学检测方法的趋势。 PV法操作流程 1石蜡切片脱蜡至PBS。 2 0.3%H2O2甲醇液或3%H2O2室温孵育20min。 3 抗原修复。 4滴加适当稀释的一抗370C 60min或40C过夜。 5 PBS洗涤。 6 酶标记二抗370C 30min或室温60min。 7 DAB(0.04%)显色(镜检控制),水洗、复染、封片二·sp法是一抗+生物素化二抗+HRP标记的链霉卵白素(HRP标记的亲和素) 一般的sp法步骤啊,具体如下: 1.烤片,68℃,20分钟, 2. 常规二甲苯脱蜡,梯度酒精脱水;二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min 3.阻断 灭活内源性过氧化物酶:3%H2O2 37℃孵育10min,PBS冲洗3X5min; 4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液(PH 6.0)中用煮沸(95℃,15-20min),自然冷却20min 以上,再用冷水冲洗缸子,加快冷却至室温,PBS冲洗3X5min。 5. 正常羊血清工作液封闭,37℃10 min,倾去勿洗. 6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育过夜,PBS冲洗3X5min(用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照); 滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液,37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 8. DAB/ H2O2反应染色,自来水充分冲洗后, 苏木素复染,常规脱水,透明,干燥,封片。三·检测试剂盒 灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键,根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配,否则检不出目的物。如一抗是鼠单或多抗的,二抗就应该是羊或兔抗鼠的。四·建议选SP,亦可根据实验室习惯及在组织中的表达情况来定
免疫组化超详细步骤 123
能忍自安2017-10-02
我要做泛素在昆虫体内在病毒感染前后表达的区别,准备使用免疫组化的方法,可是我是个新手,查资料来说也是比较乱,说的很多方法,有没有人推荐一个简单实用的方法!说的具体一点,通俗一点!谢谢!

本人对软骨石蜡切片做了MMP-13的免疫组化染色,首次做,无法判断染色部位,请各位帮忙看一下


我是第一次做免疫组化,之前从未接触过,求各位老师推荐一下能用于小鼠的nestin抗体和β-tubli...
免疫组化的意思是什么?
ALP试剂盒和ALP染色试剂盒是一样的吗?ALP染色和茜素红染色用什么拍照?
HER2阴性这是一个啊免疫指标,这种指标如果强阳性的话可以应用一种靶向药物。可以提高化疗的有效率,对肿瘤治疗效果比较好,现在如果乳腺癌免疫组化三个加号。都是推荐应用该要的。也阴性的患者,不见因为。因为收益率非常低
有条件就分开没条件不分开关系也不大吧

我是做肝细胞肝癌和胆管细胞癌的免疫组化

这是之前的抗体做出来的效果,EDTA修复,1:400的浓度(抗体100微升,0.1mg/ml,价格3000多),效果很好。




后来过期了,就又买了一支(抗体100微升,0.2mg/ml,价格7000多,贵很多),过程一样,EDTA、高压、酶修复,浓度1:200300350400500都试过,4度过夜、封闭等,都试过,就是做不粗来。

现在就是淋巴细胞强阳,肿瘤不阳,谁能帮我看看什么原因。我已经找不到什么理由了




那要看你检测什么了,通常检测GAG用阿新蓝染色或甲苯胺蓝,检测胶原当然是免疫组化染色最好,如果没条件就用MASSON三色吧!