Liposome formulations can be broadly divided into cationic, anionic and neutral subtypes. Charged liposomes are used in many different types of studies such as, blood complement studies, gene transfer studies and other biomedical applications to name a few. Cellsome® liposomes made from anionic PEGylated lipids provide certain benefits.
Anionic liposomes offer a number of attributes, relative to the challenges associated with cationic formulations such as, the administration of cationic liposomes results in higher cytotoxicity levels, both in vitro (Zhong et al., 2009) and in vivo (Balazs and Godbey, 2010). Anionic liposomes demonstrate greater stability in solution (Zhigaltsev et al., 2002, Phillips and Heydari, 1996), lead to lower aggregation when compared with neutrally charged liposomes, and have increased endocytosis when compared with cationic (Bajoria et al., 1997) and neutral liposomes.
To improve liposome stability and enhance their circulation times in the blood, a sterically-stabilized, hydrophilic polymer, polyethylene glycol (PEG), has been shown to be the optimal choice for obtaining sterically-stabilized liposomes. Using an Anionic Liposome with PEG will protect the liposomes from circulating proteins, improving their plasma clearance and enhancing their therapeutic effects.
The four products provided that are made from Anionic PEGylated Lipids provided here consist of either DSPC:Chol:DSPG:DSPE-PEG(2000) (60:30:5:5 molar ratio), DOPC:Chol:DOPG:DOPE-PEG(2000) (60:30:5:5 molar ratio), DSPC:Chol:DSPS:DSPE-PEG(2000) (60:30:5:5 molar ratio), or DOPC:Chol:DOPS:DOPE-PEG(2000) (60:30:5:5 molar ratio).
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（2）另一方面，使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。
（3）其实，我更赞同后一种说法，因为我尝试把肝脏或睾丸片子从4度过夜拿出后，直接用PBS洗没发生过脱片现象。事实胜于雄辩！
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜的现像和放大作用，在细胞，亚细胞水平检测各种抗原物质，并可在原位显示相应的基因和基因表达产物。免疫组织化学技术现已有：免疫荧光组织（细胞）化学技术、免疫酶组织（细胞）化学技术、亲和组织化学技术、免疫金银及铁标记免疫组织化学技术等。免疫荧光组织（细胞）化学技术是采用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，检测待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），形成的抗原抗体复合物上带有荧光素，在荧光显微镜下，由于受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出明亮的荧光，这样就可以分辨出抗原（或抗体）的所在位置及其性质，并可利用荧光定量技术计算抗原的含量。以达到对抗原物质定位、定性、定量测定的目的。
1）做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色，因为那样会掩盖阳性着色的结果；而且用苏木素复染细胞核也是淡染，若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变，除非有非常典型的表现，一般是有很大的难度的。
2）你是培养的细胞做免疫组化吗？如果是的话，那就每个样本只有一张片子吧？唯一的办法是进行免疫双染，同时做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3）用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化，也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是：早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片，重要的是看其组织学结构，对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞，还是培养的细胞，染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4）如果是切片，也就是说每个样本可以有多张切片，那可以在连续切片上分别染CD34和AFP，拍照时选择相同视野，也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5）用双染最大的问题在于：这两者都表达在胞浆中，染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下，可不可以用免疫荧光双染？这样也很有说服力的
