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Addgene/pAAV-hSyn-DIO-HA-hM3D(Gq)-IRES-mCitrine/1unit/50454-AAV8
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Addgene
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50454-AAV8
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ItemCatalog #DescriptionQuantityPrice (USD)
Plasmid50454Standard format: Plasmid sent in bacteria as agar stab1$75
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AAV850454-AAV8Virus (100 µL at titer ≥ 1×10¹³ vg/mL)and Plasmid.More Information
$380
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Backbone

  • Vector backbone
    pAAV
    (Search Vector Database)
  • Backbone sizew/o insert(bp)4818
  • Total vector size (bp)7937
  • Vector type
    AAV

Growth in Bacteria

  • Bacterial Resistance(s)
    Ampicillin
  • Growth Temperature
    37°C
  • Growth Strain(s)
    Stbl3
  • Copy number
    Low Copy

Gene/Insert

  • Gene/Insert name
    hM3D(Gq)-IRES-mCitrine
  • Species
    H. sapiens (human)
  • Insert Size (bp)
    3119
  • Mutation
    See supplemental documents for DREADD mutations
  • Entrez Gene
    CHRM3(a.k.a. EGBRS, HM3, PBS)
  • Promoterhuman Synapsin 1
  • Tag/ Fusion Protein
    • HA (N terminal on insert)

Cloning Information

  • Cloning methodRestriction Enzyme
  • 5′ cloning siteAsc I(not destroyed)
  • 3′ cloning siteNhe I(not destroyed)
  • 5′ sequencing primerTCGTGTCGTGCCTGAGAGCG
  • 3′ sequencing primerGCATTAAAGCAGCGTATCCACATAGC
  • (Common Sequencing Primers)

Resource Information

  • Supplemental Documents
    • DREADD information
  • Terms and Licenses
    • UBMTA
    • Ancillary Agreement for Plasmids Containing FP Materials
    • genOway Notice of RIghts
  • Industry Terms
    • Not Available to Industry
  • Article Citing this Plasmid
    • 1 Reference

Depositor Comments

Please see http://pdspit3.mml.unc.edu/projects/dreadd/wiki/WikiStart for more information.

Information for AAV8 (Catalog # 50454-AAV8)(Back to top)

Purpose

Ready-to-use AAV8 particles produced from pAAV-hSyn-DIO-HA-hM3D(Gq)-IRES-mCitrine (#50454). In addition to the viral particles, you will also receive purified pAAV-hSyn-DIO-HA-hM3D(Gq)-IRES-mCitrine plasmid DNA.

Synapsin-driven, Cre-dependent, excitatory hM3D DREADD expression, with physically separate mCitrine expression for cell body labeling. These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.

Delivery

  • Volume100 µL
  • Titer≥ 1×10¹³ vg/mL
  • Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
  • StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
  • ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.

Viral Production & Use

  • Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV8 cap gene
  • BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68
  • SerotypeAAV8
  • PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
  • Reporter GenemCitrine (Cre-dependent)

Biosafety

Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide

Resource Information

  • Terms and Licenses
    • Ancillary Agreement for Penn Vectors
    • Terms of Use for Viral Vectors
  • Industry Terms
    • Not Available to Industry

Viral Quality Control

Quality Control:
  • Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
  • Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.

Visit our viral production page for moreinformation.

Addgene Comments

Using FLEX vectors in vivo: LoxP sites in FLEX plasmids are known to recombine during DNA amplification and viral vector production, which may result in a minority of Cre-activated (i.e., "flipped") viral vectors. Addgene has measured this occurs in 0.01-0.03% of viral vectors in our typical production protocol. This can lead to a small number of cells exhibiting Cre-independent transgene expression in vivo. To address this, we recommend titrating to find the optimal AAV dosage required for Cre-dependent transgene expression and function in vivo. This may include reducing the viral vector dosage in order to reduce the likelihood of Cre-independent expression.

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1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。2.引物长度一般在15~30碱基之间。3.引物GC含量在40%~60%之间,Tm值最好接近72℃。4.引物3′端要避开密码子的第3位。5.引物3′端不能选择A,最好选择T。6. 碱基要随机分布。7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高,而3′ 端△G值较低。9. 引物的5′端可以修饰,而3&p... 查看更多>
2021-09-14
引物设计是一小段单链DNA或RNA,在核酸合成反应时,作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。... 查看更多>
自2015年10月8日起,我公司原来在上海进行的引物(包括通用引物和特殊引物)合成将迁至苏州工厂进行生产。本次搬迁仅包括原来在上海立菲生物技术有限公司内上海工厂生产... 查看更多>
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临床生物化学是在人体正常的生物化学代谢基础上,研究疾病状态下,生物化学病理性变化的基础理论和相关代谢物的质与量的改变,从而为疾病的临床实验诊断、治疗监测、药物疗效和预后判断、疾病预防等方面提供信息和决策依据的一门学科。它是一门发展迅速的独立学科。其主要任务是利用物理... 查看更多>
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引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。引物可分为通用引物、随机引物、重复寡核苷酸引物,通用引物大多用于载体中目的基因的检测和内参基因的扩增,随机引物应用于未知基因序列的扩增,重复寡核苷酸引物用于逆转录,一般为T的重复,多重复6次、9次、10次。在PCR反应中... 查看更多>
2018-02-14
出品公司: Invitrogen 载体名称: pPIC3.5K, pPIC 3.5K 质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体 表达水平: 高拷贝 启动子: AOX1 克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶 载体大小: 9004... 查看更多>
Real-time PCR现已成为一种成熟的mRNA定量手段,Taqman探针和Sybr-Green法是常用的两种方法。其中,Sybr-Green法因为使用方便、价格相对低廉而被广泛使用,但是这种方法对引物的要求更高,因此,引物的设计是成功进行Sybr-Green法Real-time PCR检测的关键。 杏园生物在Real-time PCR引物设计及检测上积累了丰富的经验,并自主开发了引物设计软件,提供给您经过实验验证的引物产品,能... 查看更多>
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SSLP 是含有短的简单序列重复的 DNS 片段,如 (CA),这些重复分散存在于真核基因组 DNA 中。由于这些 SSLP 在长度上的多态,即等位基因间重复次数的多态,SSLP 是非常有用的遗传学标志。用这些方法达到自动化分型每个标志的关键步骤是选择合适的重复单元侧翼序列的 PCR 引物。 查看更多>
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小鼠,基因gab2grb2sykpkcpi3kakt的引物序列号?感激不尽!!!
常见的通用引物序列 123
dxy_9wb2txg22017-08-21
从文献中查到已知A蛋白的多种序列,通过引物特异性软件检验发现各个文献中的的引物扩增出的基因名称都不一样,都和A蛋白不一样,不过有些是特异性的,请问这种情况下,A蛋白序列扩增出不和A同名的基因名称可以用吗?谢谢
关于PCR引物的疑问 经验共享 123
理性男人Bink2017-10-01
假设你要扩增某个基因,但是这个基因中在你设计引物的地方处基因不保守也就是说发生了突变,比如说有四个碱基发生了突变(如A突变成C),但是你又想设计的引物能把突变的基因也扩增出来,所以你的引物在突变点应该是既可以结合A也可以结合C,所以那个突变点的引物则要合成兼并引物。
老贺说不要。刘不言说要。这就尴尬了。
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最近小儿心肌酶异常的很多,好多都是一倍增加,翻阅资料都是说2倍以上才有临床意义,可说本上却没有这个标准。大家讨论一下,共同学习。治疗我们主张果糖。维生素C,肌苷针,辅酶Q10。
其实我有点抠字眼了。
看有关产前诊断的一个资料,提到:“凡是酶活性能在成纤维细胞中表达均可用绒毛或羊水细胞的酶活性测定进行产前诊断,如溶酶体贮积症。”
不太理解,为什么成纤维细胞中表达的酶就能在绒毛或羊水细胞中测出来呢?绒毛的细胞跟成纤维细胞没什么直接关系吧?或者是因为成纤维细胞脱落到羊水中,破裂,然后就可以检测了?
求各位解答,谢谢。
质粒测序引物123
boysgame2017-10-01
如题
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大家好,最近准备做基因敲除的实验,在引物设计的起步上就走不动了,基因上下游同源臂引物是怎么设计的,谢谢大家,现在实验进行不了了,请大家能告知,万分感谢!!!
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