Antigen Information
- P03372
- 2099
- ESR
- ESR1
- NR3A1
- Human
Assay Format
- Human
- Cell Lysates
- Nuclear Extracts
- Sandwich-based
- Semi-Quantitative
Product Specifications
Introduction
Product Features
- Specific transcription factor-DNA binding assay
- Perfect alternative to EMSA
- Easy to perform in an ELISA format
- Non-radioactive assay
- High throughput (96-well plate format)
- Assay can be completed within 5 hours
Application Notes
- 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
- DNA Binding Buffer
- Positive Control Sample
- Specific Competitor DNA probe
- Non-specific Competitor DNA probe
- Assay Reagent
- DTT
- Wash Buffer
- Primary Antibody
- HRP-conjugated Secondary Antibody
- Antibody Diluent Buffer
- TMB One-Step Substrate Reagent
- Stop Solution
- Distilled or deionized water
- 100 ml and 1 liter graduated cylinders
- Tubes to prepare sample dilutions
- Absorbent paper
- Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
- Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation < li="">
- Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
- Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
- Add 100 µl of sample or positive control to each well.
- Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
- Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
- Incubate 30 min at RT.
- Add 50 µl of Stop Solution to each well.
- Read at 450 nm immediately.
Typical Data
Figure 1Transcription factor assay of ER-alpha from nuclear extracts of MCF-7 cells or MCF-7 cells treated with H2O2 (200uM) for 3 hr with RayBio Activity Assay Kit.

Figure 2Transcription factor assay of ER-alpha from nuclear extracts of MCF-7 cells or MCF-7 cells treated with H2O2 (200uM) for 3 hr with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of ER-alpha to the conserved binding site detected by using RayBio ER-alpha TF Activity Assay Kit.

Storage/Stability
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抗体是属于у-球蛋白,或是淋巴细胞,都是对某种抗原反应而形成的;它附着在抗原上,起着抑制抗原的作用。如果抗体完全抑制了抗原,即使我们感染了病毒或细菌,也会在不知不觉中战胜疾病。相反,当抗原势力超过抗体时,疾病则会恶化。
一旦体内产生抗体时,当下次相同的病原体侵入时,会比前次更快发动免疫机构,将疾病防患于未然。许多病毒性疾病患者,经过一次治疗后便不再发病,是因为身体内已有了免疫的机构。
抗原与其所诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合的能力。抗原性的强弱与抗原分子的大小、化学成分、抗原决定簇的结构、抗原与被免疫动物亲缘关系的远近等有密切关系。通常认为抗原的分子量愈大、化学组成愈复杂、立体结构愈完整以及与被免疫动物的亲缘关系愈远,则抗原性愈强。抗原的物理状态也对抗原性发生影响,例如蛋白质,聚合状态的比单体的抗原性强,一般球形分子的比纤维形分子的抗原性强。抗原加入佐剂改变物理状态后,抗原性也得到增强。例如,分子量高达10万的明胶由于缺乏苯环氨基酸,稳定性较差,在进入机体后容易被酶降解成低分子物质,如果加入少量酪氨酸(苯环氨基酸),就能增强其抗原性。
中文名:抗原性
外文名:antigenicity
别称:免疫反应性
抗原性介绍:流感病毒按抗原性
1.抗原性是指抗原与其所诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合的能力。抗原性的强弱与抗原分子的大小、化学成分、抗原决定簇的结构、抗原与被免疫动物亲缘关系的远近等有密切关系。通常认为抗原的分子量愈大、化学组成愈复杂、立体结构愈完整以及与被免疫动物的亲缘关系愈远,则抗原性愈强。
2.免疫原性是指能够刺激机体形成特异抗体或致敏淋巴细胞的能力。即指抗原能刺激特定的免疫细胞,使免疫细胞活化、增殖、分化,最终产生免疫效应物质抗体和致敏淋巴细胞的特性。也指抗原刺激机体后,机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。
B细胞的抗原受体就是镶嵌在脂质双层中的膜结构蛋白,叫做膜表面免疫球蛋白(SmIg)。每个淋巴细胞克隆,只具有识别某一抗原决定簇的受体,每个淋巴细胞也只能产生某一种特异性抗体,这也是单克隆抗体只针对某一种抗原决定簇反应的基础。体内有千万种淋巴细胞克隆,所以机体能对各种不同的抗原性异物进行识别,从而发生免疫应答。
T细胞的抗原受体(T cell receptor, TCR)与CD3呈复合物形式存在于抗原特异性T细胞表面。在识别靶细胞过程中还有赖于非特异性的其他表面分子辅助,这些分子主要包括CD4、CD8、MHCI、MHCII类分子、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1,即CD54)、LFA-2(CD2)和 LFA-3(CD58)。TCR的多肽链是异质的,根据抗原结构和编码基因不同,已发现有a, b, g和d四种多肽链,据其组成不同,可分为两种类型,即abTCR和gdTCR。大多数TCR是abTCR,其中CD4+abTCR T细胞可识别非己MHCII类抗原(同种异体抗原)或自身MHCII类抗原与外来抗原复合物。abTCR识别外来抗原必须经过抗原提呈细胞(antigen presenting cell, APC)的加工处理,在外来抗原与APC表面MHC抗原结合成复合物才能被Th细胞识别。少数TCR由gd链组成,对gdTCR在体内的生理功能尚未完全清楚。
,表示体内感染了HBV,因而是一种特异性标志。HBsAg阳性见于:①急性乙型肝炎的潜伏期或急性期(大多短期阳性);②HBV致的慢性肝病、迁延性和慢性活动性肝炎、肝炎后肝硬化或原发性肝癌等。③无症状携带者。
(2)抗HBs:表示曾感染过HBV,均已得到恢复,并且对HBV有一定的免疫力。
(3)HBcAg与抗HBc:由于
HBcAg主要存在于肝细胞核内,并仅存在于Dane颗粒中。因此,对病人血清不能检测HBcAg,而测抗HBc。血清内抗HBc阳性反映:①新近有过HBV感染;②体内有HBV增殖;③有助于诊断乙型肝炎。
(2)HBcAg和抗HBe:HBcAg的存在常表示病人血液有感染性。
HBcAg阳性揭示病人肝脏可能有慢性 损害,对预后判断有一定帮助。抗HBe阳性对病人可能有一定的保护力。
检测乙肝抗原与抗体的实际用途:
(1)筛选供血员。
(2)可作为乙肝病人或携带者的特异性诊断。
(3)对乙肝病人预后和转归提供参考。
(4)研究乙肝的流行病学,了解各地人群对乙肝的感染情况。
(5)判断人群对乙肝的免疫水平。



