
The antibody is provided as 100 uL of affinity purified serum in PBS (0.02 M sodium phosphate with 0.15 M sodium chloride, pH 7.5) with 1% BSA (bovine serum albumin), and 0.02% sodium azide. Reacts with mouse, rat, and rabbit species.The images above labeled "ImmunoStar Rabbit 5-HT 2A receptor antibody" are the results of staining of the mouse 5-HT 2A receptor in the brain, courtesy of Dr. Magdalena Zaniewska, Max-Delbruck-Centrum fur Molekulare Medizin Berlin, Germany. The ImmunoStar 5HT 2A receptor antibody was quality control tested using standard immunohistochemical methods. The antiserum demonstrates strongly positive labeling of rat cortex, amygdala and hippocampus using indirect immunofluorescent and biotin/avidin-HRP techniques. Recommended primary dilutions are 1/300 - 1/500 in PBS/0.3% Triton X-100 - Bn/Av-HRP Technique . The addition of intensifying reagents such as nickel ammonium sulfate to the chromogen solution will approximately double the dilution factor as recommended.Immunolabeling is completely abolished by preadsorption with synthetic rat 5HT2A receptor (22-41). Immunolabeling of Western blot revealed a single band of approximately 53kD.
Photo Description: Low magnification IHC image of neurons staining for the 5-HT2A receptor in the rat cortex (top of page) and image of neuronal expression of the receptor in the amygdala (below). The bottom right photo is of the cortex. The tissue was fixed with 4% formaldehyde in 0.1 M phosphate buffer, before being removed and prepared for vibratome sectioning. Floating sections were incubated at RT in 10% goat serum in PBS, before standard IHC procedure. Primary antibody was incubated at 1:500 for 48 hours, goat anti-rabbit secondary was subsequently added for 1 hour after washing with PBS. Light microscopy staining was achieved with standard biotin-streptavidin/HRP procedure and DAB chromogen.
Host: Rabbit
Quantity / Volume: 100 uL
State: Liquid
Reacts With: Human, Marine, Mouse, Rabbit, Rat
Alternate Names: 5-hydroxytryptamine receptor 2A; 5Ht-2; 5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 2A, G protein-coupled, anti-5-HT 2A
Gene Symbol Htr2aDatabase Links: Entrez Gene: 3356 Human Entrez Gene: 15558 Mouse Entrez Gene: 100009461 Rabbit Entrez Gene: 29595 RatRRID: AB_572211
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与同种型相对应的是同种异型和独特型。
【T。SDM】
洛斯阿拉莫斯国家实验室(Los Alamos National Laboratory)研究员Andrew Bradbury说:“我们提出,就像基因一样,抗体也应由它们的序列来定义,并且它们应该是在细胞系中重组生成。”
根据编码各种亚基的序列来参考每次检测所用的抗体,它们的浓度和标准化实验缓冲液,可以让全世界的研究人员能够在相同条件下使用具有相同亲和力的抗体。
一种抗体或结合试剂的序列,是该试剂的最终“条形码”,其确保了每个人都能够使用相同的试剂来检测同一目标。导出这一条形码涉及到从体外文库中挑选出一些抗体,或是克隆及测序来自杂交瘤的抗体基因等工作。这将要求对抗体供应的模式作出重大的改变。
抗体是可以帮助机体识别与中和细菌、以及对免疫系统发起的其他攻击的一类特殊蛋白质,科学家们一直利用它们来作为特异的结合试剂。抗体质量控制和精确识别是那些有着序列测定和重组表达需求的研究者们一直努力寻求解决的问题。Bradbury指出,不同于基因、寡核苷酸、质粒、重组蛋白等,抗体是生物学研究中唯一没有在序列水平上进行定义的广泛应用试剂。
研究人员注意到,所有抗体的质量因制造商不同而存在巨大的差异,大多数抗体很少进行验证,批次间差异极为常见。
并且,批量产品附带的证明文件质量同样差异巨大;甚至提供的证明文件往往并不对应提供的批次。
“为了杜绝由于缺乏验证和鉴定所造成的对材料、研究人员时间以及金钱的巨大浪费,必须要根据它们的序列来定义抗体,并且要在标准条件下进行重新生产,”作者们指出。这里的“重新”生产是指采用一些不涉及动物免疫的方法来从头生成抗体或其他结合试剂,而非基于免疫接种生成的克隆抗体。
例如,多克隆抗体的生产是通过将一种蛋白质注射到动物体内,然后提取出响应这一免疫蛋白动物血液中生成并携带着的抗体。各种各样的抗体并非高精度,只有0.5-5%的产物是想得到的抗体,可对初始目标产生反应。其余的都是原本存在于动物血流中的抗体,表明了动物以往的免疫应激。漫无目的地收获如此多错误的抗体,使得生成了一些特异性较差的抗体,由此造成了研究领域的浪费。
“我们建议,借助一种体外方法来生成抗体,这样根本不需要使用动物,重要的是还将直接生成具有已知序列的分子,”Bradbury说。
免疫荧光(IF)
IHC-P=Immunohistochemistry (Paraffin)
IHC-F=Immunohistochemistry (Frozen)
p代表石蜡切片
f代表冰冻切片
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应
①调理作用
IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。
②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用向左转|向右转
比如该厂家的WB抗体,如果是1mg/ml的抗体,一般做WB的时候要求抗体工作液的浓度是1ug/ml,也就是说1mg/ml的抗体是可以按照1:1000的比例进行稀释。当然,根据抗体亲和力不同,这个浓度也是可以变化的。所以abcam的WB抗体稀释浓度一般是1ug/ml
二是使病菌产生抗药性:当不该使用抗生素的时候使用抗生素,可以使一些病菌逐渐产生对抗生素的抵抗力,即抗药性,一旦确定必须使用抗生素时,就不得不加大剂量才能有效,甚至加大剂量也无效。
三是毒性反应:如链霉菌对前庭与耳蜗神经的损害,可出现眩晕、平衡失调、耳鸣、听力减退、耳聋等;氯霉菌对骨髓的毒性,抑制骨髓造血机能,可致白细胞及血小板减少,严重可引起再生障碍性贫血;四环素、红霉素酯化剂、二性梅素B、灰黄酶素等都能损害肝脏,造成肝功能不全或原有肝损加重;庆大酶素、卡那酶素、新酶素、巴龙酶素、先锋酶素等对肾脏可有较大损害。
四是过敏反应:如常用的青酶素其发生率约为百分之一到百分之八,轻者有关节痛、淋巴结肿大、发热等,较重者发生血管神经性水肿、脑水肿或喉头水肿,最严重的为过敏性休克,如不及时抢救将会死亡。
抗生素的上述危害,除过敏反应外,其余均具有渐进性、累积性,病人自己很难察觉,因此易发生危险。因此,患者应在医生指导下使用抗生素,以免受到更大的伤害。

