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Boston Biochem/Recombinant Human Ubiquitin Mutant with K63 only Protein, CF/UM-K630-01M
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SummaryProduct DatasheetsCarrier FreeReconstitution CalculatorBackgroundRelated Research Areas
Recombinant Human Ubiquitin Mutant with K63 only Protein, CF Summary
Purity
>95%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by Colloidal Coomassie® Blue stain.
Activity
The lysine residue utilized for Ubiquitin chain formation is functionally important. Single lysine Ubiquitin mutants are ideal for investigating biological processes involving specific Ubiquitin chain linkage. Recombinant Human Ubiquitin K63-only allows for the formation of only K63-linked Ubiquitin chains. Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. We recommend an initial Recombinant Human Ubiquitin K63-only concentration of 0.2-1 mM.
Source
E. coli-derived human Ubiquitin protein
Accession #
P0CG47
Predicted Molecular Mass
8.7 kDa
Product Datasheets
Product Datasheet
COA
SDS
Carrier Free
What does CF mean?
CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.
What formulation is right for me?
In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.
UM-K630
| Formulation | Lyophilized from a solution in deionized water. |
| Reconstitution | Reconstitute at2 mg/mL in an aqueous solution. |
| Shipping | The product is shipped at ambient temperature. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below. |
| Stability & Storage: | Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
|
Reconstitution Calculator
Reconstitution Calculator
Background: Ubiquitin
Ubiquitin is a 76 amino acid (aa) protein that is ubiquitously expressed in all eukaryotic organisms. Ubiquitin is highly conserved with 96% aa sequence identity shared between human and yeast Ubiquitin, and 100% aa sequence identity shared between human and mouse Ubiquitin (1). In mammals, four Ubiquitin genes encode for two Ubiquitin-ribosomal fusion proteins and two poly-Ubiquitin proteins. Cleavage of the Ubiquitin precursors by deubiquitinating enzymes gives rise to identical Ubiquitin monomers each with a predicted molecular weight of 8.6 kDa. Conjugation of Ubiquitin to target proteins involves the formation of an isopeptide bond between the C-terminal glycine residue of Ubiquitin and a lysine residue in the target protein. This process of conjugation, referred to as ubiquitination or ubiquitylation, is a multi-step process that requires three enzymes: a Ubiquitin-activating (E1) enzyme, a Ubiquitin-conjugating (E2) enzyme, and a Ubiquitin ligase (E3). Ubiquitination is classically recognized as a mechanism to target proteins for degradation and as a result, Ubiquitin was originally named ATP-dependent Proteolysis Factor 1 (APF-1) (2,3). In addition to protein degradation, ubiquitination has been shown to mediate a variety of biological processes such as signal transduction, endocytosis, and post-endocytic sorting (4-7).
This Ubiquitin mutant contains only a single lysine, K63, with all other lysines mutated to arginine. This mutation renders Ubiquitin able to form poly-Ubiquitin chains with other Ubiquitin molecules only via the K63 lysine.
References
- Sharp, P.M. & W.-H. Li. (1987) Trends Ecol. Evol. 2:328.
- Ciechanover, A. et al. (1980 ) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:1365.
- Hershko, A. et al. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:1783.
- Greene, W. et al. (2012) PLoS Pathog. 8:e1002703.
- Tong, X. et al. (2012) J. Biol. Chem. 287:25280.
- Wei, W. et al. (2004) Nature 428:194.
- Wertz, I.E. et al. (2004) Nature 430:694.
- Arnason T., et al. (1994) Mol. Cell. Biol. 14:7876-7883.
- Spence J., et al. (1995) Mol. Cell. Biol. 15:1265-1273.
Entrez Gene IDs
7314 (Human); 298693 (Rat)
Alternate Names
RPS27A; UBA52; UBB ubiquitin B; UBB; UBC; Ubiquitin
Citations for Recombinant Human Ubiquitin Mutant with K63 only Protein, CF
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- Novel polyubiquitin imaging system, PolyUb-FC, reveals that K33-linked polyubiquitin is recruited by SQSTM1/p62Authors: Y Nibe, S Oshima, M Kobayashi, C Maeyashiki, Y Matsuzawa, K Otsubo, H Matsuda, E Aonuma, Y Nemoto, T Nagaishi, R Okamoto, K Tsuchiya, T Nakamura, S Nakada, M WatanabeAutophagy, 2017;0(0):1-43.Species: HumanSample Types: Recombinant ProteinApplications: Bioassay
- p47 negatively regulates IKK activation by inducing the lysosomal degradation of polyubiquitinated NEMO.Authors: Shibata Y, Oyama M, Kozuka-Hata H, Han X, Tanaka Y, Gohda J, Inoue JNat Commun, 2012;3(0):1061.Species: N/ASample Types: Recombinant ProteinApplications: Binding Assay
FAQs
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Reconstitution Buffer 1 (PBS)
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Recombinant Human Ubiquitin Mutant with K63 only Protein, CF
By Anonymouson 10/26/2017
Application: Enzymatic activity in vitro
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2018-02-12
Viskase透析袋;Sigma-Aldrich试剂;AccuStandard 标准品;Millipore抗体;Glen Research 核酸合成试剂;Bio-Rad电泳仪及PCR仪;Nanocs的PEG聚合物; Chromotek羊驼抗体; Poly... 查看更多
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2018-11-14
上海宾智生物科技有限公司在发布的Countess II FL自动化细胞计数仪 货号AMQAF1000 明场＋双通道可选荧光计数 ,耗材可重复使用供应信息，浏览与Countess II FL自动化细胞计数仪 货号AMQAF1000 明场＋双通道可选荧光计数 ,耗材可重复使用相关的产品或在搜索更多与Countess II FL自动化细胞计数仪 货号AMQAF1000 明场＋双通道可选荧光计数 ,耗材可重复使用相关的内容。 查看更多
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2021-07-30
原子荧光光谱法是通过测量待测元素的原子蒸气在辐射能激发下产生的荧光发射强度，来确定待测元素含量的方法。原子荧光分为共振荧光、直跃荧光、阶跃荧光等。原子荧光光谱分析法具有很高的灵敏度，校正曲线的线性范围宽，能进行多元素同时测定。 查看更多
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2021-08-10
使用牛津仪器X-MET8000手持式X射线荧光光谱仪可以对金属材料的牌号、化学成份以及 查看更多
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2018-09-17
2018年9月10-11日，天美(中国)科学仪器有限公司在桂林以及南宁连续举办了两场爱丁堡稳态/瞬态荧光光谱仪应用技术研讨会。来自广西各大高校及科研单位的用户80余人参与本次研讨会。桂林站南宁站天美（中国）驻广西经理陈建湘先生主持本次研讨会，并对天美公司和爱丁堡公司的发展历程、产品线和售后服务体系等方面做了详尽的介绍。爱丁堡公司工程师MariaTesa女士和天美应用工程师张轩先生，主要针对爱丁堡稳态/瞬态荧光光谱仪FLS1000最新技术应用及其相关测试技巧、激光闪光光解光谱仪LP980最新技术应用等方向作 查看更多
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2019-11-14
北京京科瑞达科技有限公司在发布的 二手岛津EDX-700HS荧光光谱仪，二手X射线荧光光谱仪供应信息，浏览与 二手岛津EDX-700HS荧光光谱仪，二手X射线荧光光谱仪相关的产品或在搜索更多与 二手岛津EDX-700HS荧光光谱仪，二手X射线荧光光谱仪相关的内容。 查看更多
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原子荧光光谱仪是由香港路易企业有限公司上海办事处代理或销售的品牌的仪器，产品来源于加拿大Aurora。香港路易企业有限公司上海办事处是中国最权威的原子荧光光谱仪销售服务商之一，在上海等地方销售原子荧光光谱仪已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业原子荧光光谱仪仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的原子荧光光谱仪产品 查看更多
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2021-07-22
测量元素范围：从钠（Na）到铀（U）
元素含量分析范围：1ppm—99.99%
多次测量重复性误差小于0.1%
长期工作稳定性误差小于0.1%
检测时间：100-120秒
工作环境温度：15-30℃
工作环境湿度：≤65%
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2021-07-25
◇ 用于氢化物发生法的间歇泵进样装置
◇ 去除水蒸气装置
◇ 化学气相发生气液分离装置
◇ 氢化物发生原子荧光测量尾气中有害元素的捕集阱装置
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2021-08-02
X荧光光谱仪在铜材行业应用首先让我们了解一下我国铜及铜合金分类一般习惯按色泽分为 查看更多
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2021-09-22
原子荧光光谱仪常见问题及解决方法 一污染 问题 1.原子荧光光谱仪试剂污 查看更多
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2021-07-31
前不久, 北京市科委组织专家对瑞利公司承担的“便携式原子荧光光谱仪研制“课题进行了验收。专家认真听取了课题承担单位的工作报告、技术报告，审阅了测试报告、用户报告及财务审计报告，并进行了现场考察。 在实施过程中，课题组践行了“爱国、创新、包容、厚德”的北京精神和北控集团提出的“创新驱动，高端发展”的战略思想，始终以技术创新为己任，通过技术创新提高企业竞争力，占领技术制高点，引领行业的发展。 课题实现了高度集成低功耗进样系统、微型低... 查看更多
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Qubit荧光计配套检测试剂盒如何挑选?123
蒣℡2018-02-01
实时荧光定量PCR不是用来测浓度的，可以用来做基因的拷贝数。但是如果你的产物单一，有相应的标准品，也是可以测浓度的，浓度的准确性和你的标准曲线相关。
塑料注塑添加荧光增白剂,没想到白度提升这么多 123
2018-01-30
注塑产品含有荧光剂因素
荧光原位杂交和原位杂交联合免疫荧光检测EBER的可行性比较《...123
rongl2021-07-27
对雄性动物的Y染色体进行FISH标记是公认的明确的标记方法，但是为什么采用的好像不如GFP标记广泛呢？
紫外可见分光光度法与分子荧光光度法的比较123
2018-01-11
紫外-可见分光光度法 紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。这个定律表示：当一束具有I0强度的单色辐射照射到吸收层厚度为b，浓度为c的吸光物质时，辐射能的吸收依赖于该物质的浓度与吸收层的厚度。其数学表达式为： 式中的A叫做吸光度；I0为入射辐射强度；I为透过吸收层的辐射强度；（I／I0）称紫藤为透射率T；ε是一个常数，叫做摩尔吸光系数，ε值愈大，分光光度法测定的灵敏度愈高。
紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。②单色器[1]。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
仪器类型则有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。
应用范围包括：①定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。②定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。③反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。④研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。
荧光分析法 利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光，
可以进行定性或定量分析的方法。
特点：灵敏度更高 10-10-10-12g/ml，应用不如UV广泛。
应用：①直接荧光光度法
②作为HPLC的检测器（用的多）展开
描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。这个定律表示：当一束具有I0强度的单色辐射照射到吸收层厚度为b，浓度为c的吸光物质时，辐射能的吸收依赖于该物质的浓度与吸收层的厚度。其数学表达式为： 式中的A叫做吸光度；I0为入射辐射强度；I为透过吸收层的辐射强度；（I／I0）称紫藤为透射率T；ε是一个常数，叫做摩尔吸光系数，ε值愈大，分光光度法测定的灵敏度愈高。
紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。②单色器[1]。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
仪器类型则有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。
应用范围包括：①定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。②定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。③反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。④研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。
荧光分析法 利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光，
可以进行定性或定量分析的方法。
特点：灵敏度更高 10-10-10-12g/ml，应用不如UV广泛。
应用：①直接荧光光度法
②作为HPLC的检测器（用的多）展开
现代荧光免疫分析技术应用及其新发展 123
icecreamholly2021-07-25
荧光分析及其应用和发展
荧光是在某些物质受到光照射时，除吸收某种波长的光之外还会发射出的一种比原来吸收波长更长的光，当激发光停止照射后，它也会随之消失。由于物质分子结构不同，所吸收光的波长和发射的荧光波长也有所不同。利用这个特性可以定性鉴别物质。同一种分子结构的物质，用同一波长的激发光照射，可发射相同波长的荧光。若该物质的浓度不同，则浓度大时所发射的荧光强度亦强，利用这个性质可以进行定量测定。这个方法即为荧光分析法。
根据玻尔兹曼分布，分子在室温时基本上处于电子跃迁的基态。吸收了可见－紫外光后，基态分子只能跃迁到激发单线态的的各个不同振动－转动能阶，而不能直接跃迁到激发三线态的各个振－转能阶。激发态分子在很短的时间里，由于分子间的碰撞或者分子与晶格间的相互作用，以热的形态损失掉部分能量，从振动能级的较高能级向下降，这一过程即为振动弛豫。振动弛豫只能在同一电子能阶内进行。分子经过振动弛豫掉到第一电子激发态的最低振动能阶，发射光量子，分子跃迁到基态的各个不同振动能级。这里分子发射的光即为荧光。由于振动弛豫损失了部分能量，荧光的能量小于原来吸收的紫外光的能量，所以发射荧光的波长总比原来照射的紫外光波长更长。而有些物质的激发分子通过振动弛豫下降到第一电子激发态的最低振动能阶后，有可能经过另一个无辐射跃迁转移至激发三线态的高振动能阶上，即体系间跨越。对于大多数物质，激发单线态与三线态的跨越是禁阻的，通常只有极少数分子能到达三线态。但如果分子中有重原子存在，由于自旋－轨道的强偶合作用，电子自旋可以逆转方向，体系间跨越就变得容易了。经过体系间跨越的分子再通过振动弛豫降至三线态的振动基态，分子在三线态的振动基态可以存活一段时间（故磷光要延迟相当时间才发生），然后发出光辐射跃迁至基态的各个振动能阶，这种光辐射即为磷光。由于激发三线态的最低振动能阶比激发单线态的最低振动能阶能量低，故磷光辐射的能量比荧光更小，亦即磷光的波长比荧光更长。物质分子从激发单线态向三线态跨越的几率较小，而且处于激发三线态的某些分子还可以通过又一次体系间跨越回到激发单线态，再通过发射荧光回到基态。这个过程需要时间较长，故这种荧光也叫迟滞荧光。在这种情况下不发射磷光。再加上分子间相互碰撞、与溶剂间相互作用、各种猝灭效应等因素，在室温下溶液很少呈现磷光。必须采用液氦在冷冻条件下激发才能测到磷光，使磷光法应用不如荧光法普及。
荧光和磷光都具有两个特征光谱，即激发光谱与发射光谱。它们都可通过实验测得。以荧光物质测定为例，由淘汰发出的可见－紫外光通过单色光器Ⅰ和狭缝分光后照射到样品溶液，在某一波长的紫外光激发下，样品发出荧光。为了防止发射光的干扰，在与发射光垂直的位置上将样品发出的荧光通过单色光器Ⅱ和狭缝，检测器测得相应于各种荧光波长时的荧光强度F。如果固定荧光波长不变，仅改变单色光器Ⅰ，测定各种波长的激发光所得到的荧光。然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，就得到荧光物质的激发光谱图。如固定激发光波长，改变单色光器Ⅱ，测定不同荧光波长时的荧光强度。以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，得到荧光发射光谱，即荧光光谱。
能够发射荧光的物质都应同时具备两个条件，即必须有强紫外吸收和高的荧光效率。物质的长共轭结构可增大荧光强度，刚体平面结构分子具有较高的荧光效率。在共轭体系上的取代基对荧光光谱和荧光强度也有很大影响。而且分子所处的外界环境，如温度、溶剂、pH、荧光熄灭剂等都会影响荧光效率，甚至影响分子结构及立体构象，从而影响荧光光谱和荧光强度。
测定荧光的仪器有荧光计和荧光分光光度计。它们的部件不外包括下列四个基本部分：激发光源，样品池，检测器，滤光片和单色器。测量荧光强度所用的激发光源一般要比测量吸收芳中所用的光源强度强，通常用汞灯、氢灯、氙灯及卤钨灯。汞灯所发射的光谱线是不连续的，大都作为滤光片荧光光度计的光源。而荧光分光光度计都用氙灯作光源。测定荧光用样品池须用低荧光的玻璃或石英材料制成。样品池的形状以散射光较少的方形为宜。测低温荧光或磷光时，在石英样品池之外套上一个装盛液氮的透明石英真空瓶，以便降低温度。用可见紫外光作激发光源时，产生的荧光多数属可见光，一般都可用肉眼观察。荧光强度较低，在滤光片荧光光度计及荧光分光光度计中则用光电倍增管检测，其输出可用高灵敏度的微电计测定，或再经放大后输入记录器中，自动描绘光谱图。滤光片荧光光度计通常采用两个滤光片。放在光源和样品池之间的滤光片为激发滤光片或第一滤光片，它可以把不需要的光线滤去，让所选择的激发光透过而照射在测定物质上。在样品池和检测器之间的滤光片为荧光滤光片或第二滤光片，它可以把由激发光所发生的反射光、溶剂的散射光心脏溶液中杂质所发生的荧光滤去，只让样品溶液所发生的荧光通过而照射于检测器上。而在荧光分光光度计中，都用光栅作单色器因为光栅的色散是由紫外线到红外线间不随波长而有疏密变化，也就是谱线的波长读数是线性的，而且从光栅色散后得到的谱线的强度比石英棱镜得到的要强，测定灵敏度比较高。色散后的光线有数级，可用前置滤光片加以消除。
荧光分析以其选择性好，灵敏度高的优点已被广泛应用于各种元素分析。铜作为动物体内许多酶的组成成分之一，是一种非常重要的微量元素。近年来，对铜定量检测已有不少文章发表，最近报道测定铜(Ⅱ)的水杨醛苯腙荧光法，检出限为1.2×10-8 g/mL〔10〕；吖啶黄催化荧光光度法，检出限为5.0×10-10g/mL〔11〕。而茚三酮和过氧化氢反应能产生微弱的荧光，微量铜(Ⅱ)的存在能大大增敏其荧光强度。苏美红等基于此现象，建立了测定痕量铜(Ⅱ)的催化动力学新方法。该方法具有极高的灵敏度，检出限达7.4×10-12 g/mL,线性范围为10-11～10-6 g/mL，且选择性好，已成功地应用于人发和中药中痕量铜(Ⅱ)的测定。将同步荧光分析法用于中草药中痕量锗的测定极为灵敏方便。凌晓等首次利用三维荧光分析法与PARAFAC算法相结合，在激发波长为220～300nm（2nm为间隔），发射波长为325～600nm（5nm为间隔）对萘、1－萘酚和2－萘酚体系进行了分辨研究，分辨结果与真实结果一致。该方法分辨速度快，易于编程实现，且分辨效率高，解决了三者同时分辨难的问题，充分地说明了化学计量学在环境化学中具有广阔的应用前景。有人采用CNBr活化的琼脂糖凝胶小珠作为固相载体，应用藻胆蛋白荧光标记物对血清可溶性抗原检测作了初步的探索。结果表明,藻胆蛋白免疫荧光法用于可溶性抗原检测不但可行，而且具有荧光强度高、可长期保存且无明显衰减等特点。近年来，一些重要的有机染料探针在生物大分子光度分析、荧光分析和共振光散射分析方面得到了日益广泛地应用，深入研究这些有机染料的结构和光谱特性，探讨这些有机染料与生物大分子之间的作用，对于筛选性能优良的分子光谱探针，设计更加灵敏简便的分子光谱检测器件，是现代分析化学十分重要的课题。测定偶氮胂Ⅱ(Arsenazo)、铬黑T(EriochromeblackT)、铬蓝黑(EriochromeblueblackR)等3种化合物的荧光光谱，并用量子化学半经验方法AM1和PM3对3种化合物分子进行包括构型优化、振动分析和荧光激发光谱的理论计算，计算结果与实验值基本符合，为3种化合物在蛋白质荧光光散射分析中的应用提供了有意义的结果。对叶酸的光化学行为进行研究后表明光化学荧光分析方法适用于片剂中叶酸的测定。
由此可见，荧光分析法的灵敏度高，取样少，方法快速，已成为医药学、生物学、农业科学和工业三废等科研工作的重要手段之一。
参考文献
１．苏美红，封满良，章竹君．一种测定痕量铜(Ⅱ)的荧光新体系．分析化学，2000，28（4）：446-448
２．赵慧春，张田蕾，张铁莉．叶酸的光化学行为及其应用．药学学报，1999，34（2）：226
３．凌晓，曹玉珍，莫翠云．应用平行因子分析和三维荧光分析法分辨萘、1-萘酚和2-萘酚．分析化学，2001，29（12）：1412-1415
４．蒋淑艳，张伟玲．几种中草药中痕量锗的同步荧光法测定．药物分析杂志，1999，2（2）：
５．吴萍，顾铭，戚艺华．藻胆蛋白免疫荧光法的初步探索．化工冶金，2000，21（4）：372-378
６．苏宇，廖显威，李树伟．三种偶氮化合物的荧光光谱研究．化学研究与应用，2002，14（1）：69-70
７．孙毓庆．分析化学（第三版），58-77
荧光是在某些物质受到光照射时，除吸收某种波长的光之外还会发射出的一种比原来吸收波长更长的光，当激发光停止照射后，它也会随之消失。由于物质分子结构不同，所吸收光的波长和发射的荧光波长也有所不同。利用这个特性可以定性鉴别物质。同一种分子结构的物质，用同一波长的激发光照射，可发射相同波长的荧光。若该物质的浓度不同，则浓度大时所发射的荧光强度亦强，利用这个性质可以进行定量测定。这个方法即为荧光分析法。
根据玻尔兹曼分布，分子在室温时基本上处于电子跃迁的基态。吸收了可见－紫外光后，基态分子只能跃迁到激发单线态的的各个不同振动－转动能阶，而不能直接跃迁到激发三线态的各个振－转能阶。激发态分子在很短的时间里，由于分子间的碰撞或者分子与晶格间的相互作用，以热的形态损失掉部分能量，从振动能级的较高能级向下降，这一过程即为振动弛豫。振动弛豫只能在同一电子能阶内进行。分子经过振动弛豫掉到第一电子激发态的最低振动能阶，发射光量子，分子跃迁到基态的各个不同振动能级。这里分子发射的光即为荧光。由于振动弛豫损失了部分能量，荧光的能量小于原来吸收的紫外光的能量，所以发射荧光的波长总比原来照射的紫外光波长更长。而有些物质的激发分子通过振动弛豫下降到第一电子激发态的最低振动能阶后，有可能经过另一个无辐射跃迁转移至激发三线态的高振动能阶上，即体系间跨越。对于大多数物质，激发单线态与三线态的跨越是禁阻的，通常只有极少数分子能到达三线态。但如果分子中有重原子存在，由于自旋－轨道的强偶合作用，电子自旋可以逆转方向，体系间跨越就变得容易了。经过体系间跨越的分子再通过振动弛豫降至三线态的振动基态，分子在三线态的振动基态可以存活一段时间（故磷光要延迟相当时间才发生），然后发出光辐射跃迁至基态的各个振动能阶，这种光辐射即为磷光。由于激发三线态的最低振动能阶比激发单线态的最低振动能阶能量低，故磷光辐射的能量比荧光更小，亦即磷光的波长比荧光更长。物质分子从激发单线态向三线态跨越的几率较小，而且处于激发三线态的某些分子还可以通过又一次体系间跨越回到激发单线态，再通过发射荧光回到基态。这个过程需要时间较长，故这种荧光也叫迟滞荧光。在这种情况下不发射磷光。再加上分子间相互碰撞、与溶剂间相互作用、各种猝灭效应等因素，在室温下溶液很少呈现磷光。必须采用液氦在冷冻条件下激发才能测到磷光，使磷光法应用不如荧光法普及。
荧光和磷光都具有两个特征光谱，即激发光谱与发射光谱。它们都可通过实验测得。以荧光物质测定为例，由淘汰发出的可见－紫外光通过单色光器Ⅰ和狭缝分光后照射到样品溶液，在某一波长的紫外光激发下，样品发出荧光。为了防止发射光的干扰，在与发射光垂直的位置上将样品发出的荧光通过单色光器Ⅱ和狭缝，检测器测得相应于各种荧光波长时的荧光强度F。如果固定荧光波长不变，仅改变单色光器Ⅰ，测定各种波长的激发光所得到的荧光。然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，就得到荧光物质的激发光谱图。如固定激发光波长，改变单色光器Ⅱ，测定不同荧光波长时的荧光强度。以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，得到荧光发射光谱，即荧光光谱。
能够发射荧光的物质都应同时具备两个条件，即必须有强紫外吸收和高的荧光效率。物质的长共轭结构可增大荧光强度，刚体平面结构分子具有较高的荧光效率。在共轭体系上的取代基对荧光光谱和荧光强度也有很大影响。而且分子所处的外界环境，如温度、溶剂、pH、荧光熄灭剂等都会影响荧光效率，甚至影响分子结构及立体构象，从而影响荧光光谱和荧光强度。
测定荧光的仪器有荧光计和荧光分光光度计。它们的部件不外包括下列四个基本部分：激发光源，样品池，检测器，滤光片和单色器。测量荧光强度所用的激发光源一般要比测量吸收芳中所用的光源强度强，通常用汞灯、氢灯、氙灯及卤钨灯。汞灯所发射的光谱线是不连续的，大都作为滤光片荧光光度计的光源。而荧光分光光度计都用氙灯作光源。测定荧光用样品池须用低荧光的玻璃或石英材料制成。样品池的形状以散射光较少的方形为宜。测低温荧光或磷光时，在石英样品池之外套上一个装盛液氮的透明石英真空瓶，以便降低温度。用可见紫外光作激发光源时，产生的荧光多数属可见光，一般都可用肉眼观察。荧光强度较低，在滤光片荧光光度计及荧光分光光度计中则用光电倍增管检测，其输出可用高灵敏度的微电计测定，或再经放大后输入记录器中，自动描绘光谱图。滤光片荧光光度计通常采用两个滤光片。放在光源和样品池之间的滤光片为激发滤光片或第一滤光片，它可以把不需要的光线滤去，让所选择的激发光透过而照射在测定物质上。在样品池和检测器之间的滤光片为荧光滤光片或第二滤光片，它可以把由激发光所发生的反射光、溶剂的散射光心脏溶液中杂质所发生的荧光滤去，只让样品溶液所发生的荧光通过而照射于检测器上。而在荧光分光光度计中，都用光栅作单色器因为光栅的色散是由紫外线到红外线间不随波长而有疏密变化，也就是谱线的波长读数是线性的，而且从光栅色散后得到的谱线的强度比石英棱镜得到的要强，测定灵敏度比较高。色散后的光线有数级，可用前置滤光片加以消除。
荧光分析以其选择性好，灵敏度高的优点已被广泛应用于各种元素分析。铜作为动物体内许多酶的组成成分之一，是一种非常重要的微量元素。近年来，对铜定量检测已有不少文章发表，最近报道测定铜(Ⅱ)的水杨醛苯腙荧光法，检出限为1.2×10-8 g/mL〔10〕；吖啶黄催化荧光光度法，检出限为5.0×10-10g/mL〔11〕。而茚三酮和过氧化氢反应能产生微弱的荧光，微量铜(Ⅱ)的存在能大大增敏其荧光强度。苏美红等基于此现象，建立了测定痕量铜(Ⅱ)的催化动力学新方法。该方法具有极高的灵敏度，检出限达7.4×10-12 g/mL,线性范围为10-11～10-6 g/mL，且选择性好，已成功地应用于人发和中药中痕量铜(Ⅱ)的测定。将同步荧光分析法用于中草药中痕量锗的测定极为灵敏方便。凌晓等首次利用三维荧光分析法与PARAFAC算法相结合，在激发波长为220～300nm（2nm为间隔），发射波长为325～600nm（5nm为间隔）对萘、1－萘酚和2－萘酚体系进行了分辨研究，分辨结果与真实结果一致。该方法分辨速度快，易于编程实现，且分辨效率高，解决了三者同时分辨难的问题，充分地说明了化学计量学在环境化学中具有广阔的应用前景。有人采用CNBr活化的琼脂糖凝胶小珠作为固相载体，应用藻胆蛋白荧光标记物对血清可溶性抗原检测作了初步的探索。结果表明,藻胆蛋白免疫荧光法用于可溶性抗原检测不但可行，而且具有荧光强度高、可长期保存且无明显衰减等特点。近年来，一些重要的有机染料探针在生物大分子光度分析、荧光分析和共振光散射分析方面得到了日益广泛地应用，深入研究这些有机染料的结构和光谱特性，探讨这些有机染料与生物大分子之间的作用，对于筛选性能优良的分子光谱探针，设计更加灵敏简便的分子光谱检测器件，是现代分析化学十分重要的课题。测定偶氮胂Ⅱ(Arsenazo)、铬黑T(EriochromeblackT)、铬蓝黑(EriochromeblueblackR)等3种化合物的荧光光谱，并用量子化学半经验方法AM1和PM3对3种化合物分子进行包括构型优化、振动分析和荧光激发光谱的理论计算，计算结果与实验值基本符合，为3种化合物在蛋白质荧光光散射分析中的应用提供了有意义的结果。对叶酸的光化学行为进行研究后表明光化学荧光分析方法适用于片剂中叶酸的测定。
由此可见，荧光分析法的灵敏度高，取样少，方法快速，已成为医药学、生物学、农业科学和工业三废等科研工作的重要手段之一。
参考文献
１．苏美红，封满良，章竹君．一种测定痕量铜(Ⅱ)的荧光新体系．分析化学，2000，28（4）：446-448
２．赵慧春，张田蕾，张铁莉．叶酸的光化学行为及其应用．药学学报，1999，34（2）：226
３．凌晓，曹玉珍，莫翠云．应用平行因子分析和三维荧光分析法分辨萘、1-萘酚和2-萘酚．分析化学，2001，29（12）：1412-1415
４．蒋淑艳，张伟玲．几种中草药中痕量锗的同步荧光法测定．药物分析杂志，1999，2（2）：
５．吴萍，顾铭，戚艺华．藻胆蛋白免疫荧光法的初步探索．化工冶金，2000，21（4）：372-378
６．苏宇，廖显威，李树伟．三种偶氮化合物的荧光光谱研究．化学研究与应用，2002，14（1）：69-70
７．孙毓庆．分析化学（第三版），58-77
揭秘让人重拾年轻的抗衰黑科技：TRU NIAGEN胶囊_湖南 ...123
anwyuans032021-07-23
使衣服更加的亮白，更加鲜艳，
但是因为荧光剂是一种会溶于液体并随之迁移又很难去除的化学物质，所以一旦洗衣液中的荧光剂附着在衣物上，用洗衣机大力清洗，也不用担心被洗掉，对人的皮肤和身体都有害，所以选择不含荧光剂的衣衣不舍洗衣宝是必要的。
但是因为荧光剂是一种会溶于液体并随之迁移又很难去除的化学物质，所以一旦洗衣液中的荧光剂附着在衣物上，用洗衣机大力清洗，也不用担心被洗掉，对人的皮肤和身体都有害，所以选择不含荧光剂的衣衣不舍洗衣宝是必要的。
内毒素实验凝胶法详解.ppt123
L篇章I续记T2018-01-11
荧光剂对人体的危害：
荧光剂不像一般化学成分那样容易被分解，而是在人体内蓄积，产生许多有害的作用，大大削减人体免疫力；荧光剂与伤口外的蛋白质结合，还会阻碍伤口的愈合；荧光剂能使人体细胞出现变异性倾向，其毒性累积在肝脏或其他重要器官，会成为潜在的致癌因素。造成血液系统受损：
化学物质容易污染人体血液，虽然血液具有一定的自净能力，微量的有害物质进入其中，会被稀释、分解、吸附和排出，但长期、大量的有毒物质倾注而入，必致其发生质的变化；进入血液循环，会破坏红细胞的细胞膜，引起溶血现象。
荧光剂不像一般化学成分那样容易被分解，而是在人体内蓄积，产生许多有害的作用，大大削减人体免疫力；荧光剂与伤口外的蛋白质结合，还会阻碍伤口的愈合；荧光剂能使人体细胞出现变异性倾向，其毒性累积在肝脏或其他重要器官，会成为潜在的致癌因素。造成血液系统受损：
化学物质容易污染人体血液，虽然血液具有一定的自净能力，微量的有害物质进入其中，会被稀释、分解、吸附和排出，但长期、大量的有毒物质倾注而入，必致其发生质的变化；进入血液循环，会破坏红细胞的细胞膜，引起溶血现象。
IPP 分析免疫组化图片123
edward_xxf2011-09-28
各位大虾，小弟想分析免疫组化照片，是绿色的FITC荧光，主要是想对图中的白点（目标蛋白）计数，如果实在计不了数，求一个分布面积也可以，求各位高手指点，不甚感激，最好能留个联系方式
荧光剂的洗衣液对人体到底有没有害?123
星魂BS39LE662018-01-31
洗衣液中的荧光剂主要是为了还原衣服的颜色，让衣服不那么快变旧...虽说荧光剂对人体有致癌的可能性，但是也不能断定洗衣液中的荧光剂含量是否达到了致癌的分量。它也有可能是安全的。
荧光增白剂其实是一种荧光染料，或者说是种白色染料，它的特性是能激发入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应，使肉眼看到的物质很白，达到增白的效果。
从国家质监局网站了解到，纺织、造纸、洗涤剂等产品中，国家是允许使用荧光增白剂，但荧光剂的使用并非没有禁忌，我国食品卫生法第六条明确规定，食品、食品包装、餐巾纸禁止使用荧光增白剂。
荧光剂对人体的危害目前国内还没有定论，也没有具体证据证明荧光剂吸收多少才会对人体造成伤害，但是在国外，荧光增白剂确实被列为潜在致癌物质之一。
荧光增白剂其实是一种荧光染料，或者说是种白色染料，它的特性是能激发入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应，使肉眼看到的物质很白，达到增白的效果。
从国家质监局网站了解到，纺织、造纸、洗涤剂等产品中，国家是允许使用荧光增白剂，但荧光剂的使用并非没有禁忌，我国食品卫生法第六条明确规定，食品、食品包装、餐巾纸禁止使用荧光增白剂。
荧光剂对人体的危害目前国内还没有定论，也没有具体证据证明荧光剂吸收多少才会对人体造成伤害，但是在国外，荧光增白剂确实被列为潜在致癌物质之一。
间接免疫荧光法实验操作常见问题 123
126helen2021-07-20
最近想选用一篇文献的方法，采用间接免疫荧光法测一种转录因子，荧光显微镜下观察照相，并计数核移位数率，但不知道该如何计这个率，谢谢能给与指导
多西他赛脂质体制备工艺研究_123
化宽松2018-02-04
RF100便携式荧光计。可以存放在抽屉里或架子上。使用简单：不需要专业的培训，只需要注意你的数据，而不是注意软件的应用。数据：可以通过U盘将数据输出到 Microsoft Text 中。仪器有大于 1,000个数据记录点。
荧光素酶检测方法 细胞技术讨论版123
snowmed2021-07-21
根据Manual可以用荧光发光计和液闪检测计检测，
1.两种方法哪一种更加准确？
2.那一种方法更方便？
3.需要的仪器上海哪家单位有？
1.两种方法哪一种更加准确？
2.那一种方法更方便？
3.需要的仪器上海哪家单位有？
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