| Product Name | Endothelin 1, human, porcineCSCSSLMDKECVYFCHLDIIW (Disulfide bridge: 1 - 15 and 3 - 11) |
| Size | 0.25 mg |
| Catalog # | AS-22859 |
| US$ | $186 |
| Purity | % Peak Area By HPLC ≥ 95% |
ET-1 is a potent vasoconstrictor peptide derived from endothelial cells. It plays a role in regulation of cardiovascular functions. The binding of ET-1 to G-protein coupled receptor triggers a signal transduction cascade leading to activation of the protein kinase C (PKC). PKC inhibitor potentially reverses the up regulation of ET-1. The enhanced ET-1 expression associated with the activation of PKC occurs in early diabetes. | |
| Detailed Information | |
| Storage | -20°C |
| References | Ref: Yanagisawa, M. et al. Nature. 332, 411 (1988). |
| Molecular Weight | 2492 |
| CSCSSLMDKECVYFCHLDIIW (Disulfide bridge: 1-15 and 3-11) | |
| Sequence(Three-Letter Code) | H - Cys - Ser - Cys - Ser - Ser - Leu - Met - Asp - Lys - Glu - Cys - Val - Tyr - Phe - Cys - His - Leu - Asp - Ile - Ile - Trp - OH (Disulfide bridge: 1 - 15 and 3 - 11) |
| Product Citations | Ansar, S. et al. (2009). Equal contribution of increased intracranial pressure and subarachnoid blood to cerebral blood flow reduction and receptor upregulation after subarachnoid hemorrhage. J Neurosurg 111, 5.Wang, Y. et al. Brain Res. 1167, 118 (2007).Cervar-Zivkovic, M. et al. Reprod. Sci. 14, 430 (2007).Beg, SAS. et al. J. Cer. Blood Flow Metab. 26, 846 (2006).Ansar, S. et al. J. Neurosurgery 106, DOI: 10.3171/jns.2007.106.5.881 (2006). |
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1. 血细胞与血清分离:
取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).
2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心
梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用.
3. 血清蛋白分离:除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质.
①在用超滤除白蛋白,IgG中硫酸铵盐时,膜包该如何选择?选择几个?
②如用凝胶过滤来分级纯化血清中65%硫酸铵盐析出的白蛋白和纯化33%硫酸铵盐析出的IgG,其填充介质应选择什么?其洗脱缓冲液应用什么好?
下面有些关于这方面的数据,供参考:
①牛血清白蛋白:分子量:66210;分子形状:椭圆形;分子大小:
40Å*140Å;等电点:4.7;血浆中的含量:52.0g/L。
②IgG:分子量:15300;分子形状:球状;等电点:5.8—7.3;血浆中含量:2.0g/L。
③另外,我从书上看到说:凝胶过滤在分级方法中分辨率为中等,但对脱盐效果优良;流速较低,对分级每周期约≥8小时,对脱盐仅30分钟;适用于大规模纯化的最后步骤,在纯化过程的任何阶段均可进行脱盐处理,尤其适用于两种缓冲液交替时。
期待您的帮助,谢谢您。
1.以沉淀形式保存在高浓度的硫酸铵中。
2.添加50%甘油冷冻,尤其适用于酶类。
3.如果样品要用于生物学检测,避免使用防腐剂。在体内实验中不能添加防腐剂,而应当将样品分装成小份冷冻。
4.可使用无菌滤器以延长保存时间。
5.添加稳定剂,如甘油(5-20%)、血清白蛋白(10mg/ml)、配基(浓度取决于活性蛋白的浓度)以帮助维持生物活性。
6.避免反复冻融或冻干重溶解过程,这样很可能会降低生物活性。
7.一些冷沉淀蛋白会在4度沉淀出来,包括一些小鼠IgG3亚族的抗体,不能保存在4度冰箱中,可添加防腐剂保存在室温中。

