![Reaction Biology/MPP8-[CHR] (His) {M-phase phosphoprotein 8-[CHR] (His)}/RD-11-462](images/no_picture.gif)
DESCRIPTION:
Human recombinant MPP8-[CHR]expressed as an N-Terminal His-tag fusion protein in E. coli.
ACCESSION #: NM_017520.3
INCLUDES AMINO ACIDS: 55-116
TAG(S): N-Terminal His-tag fusion
MW:9.9kDa
EXPRESSION SYSTEM: E. coli
SUPPLIED AS: Solution of purified recombinant protein in 50 mM Tris HCl,pH 7.5, 500 mM NaCl, 1 mM TCEP, 10% glycerol
STORAGE: -70°C. Thaw quickly and store on ice before use. Theremaining, unused, undiluted protein should be snap frozen, for example in adry/ice ethanol bath or liquid nitrogen. Minimize freeze/thaws if possible, butvery low volume aliquots (<5 µl) or storage of diluted protein is notrecommended.
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ReactionBiology详细产品列表：货号产品价格（美元）HMT-11-376ASH1L(His)Methyltransferase325DMT-21-124DNMT1450DMT-21-125DNMT3aMethyltransferase450DMT-21-126 DNMT3b450HMT-11-101DOT1LMethyltransferase395HMT-25-115 EZH1Complex450HMT-25-114EZH2Complex799HMT-25-173EZH2-Y641FComplex799HMT-11-102G9aMethyltransferase(GST)(aa786-1210)299HMT-11-245G9aMethyltransferase(His)(aa913-1193)299HMT-12-104G9a/GLPComplexMethyltransferase325HMT-11-103GLPMethyltransferaseProtein299HMT-15-105MLL1Complex499HMT-15-106 MLL2Complex499HMT-15-107MLL3Complex499HMT-15-108 MLL4Complex499MT-11-359NNMT(GST)(NicotinamideN-Methyltransferase)299MT-11-358NNMT(His)(NicotinamideN-Methyltransferase)299HMT-11-319NRMT1(GST)325HMT-21-139NSD1Methyltransferase450HMT-21-1380NSD2(His)Methyltransferase450HMT-21-122 NSD2Methyltransferase550HMT-11-377NSD2SET(His)325HMT-21-159NSD2-E1099KMethyltransferase599HMT-11-378NSD2-E1099K-SET(His)325HMT-21-181NSD2-T1150AMethyltransferase450HMT-11-379NSD2-T1150A-SET(His)325HMT-11-132 NSD3Methyltransferase325HMT-21-348PRDM2Methyltransferase325HMT-21-152PRDM9Methyltransferase450HMT-11-119PRMT1Methyltransferase325HMT-11-113PRMT3Methyltransferase325HMT-11-120PRMT4Methyltransferase399HMT-21-172PRMT5Methyltransferase450HMT-22-434PRMT5(C449S)/MEP50799HMT-22-148PRMT5/MEP50Complex799HMT-11-121PRMT6Methyltransferase(GST)325HMT-21-380PRMT6Methyltransferase(His)325HMT-21-382PRMT7(His)450HMT-11-135PRMT8Methyltransferase325MT-11-356s-COMT(His)(SolubleCatechol-O-Methyltransferase)299MT-11-357s-COMT(V108M)(His)(SolubleCatechol-O-Methyltransferase）299HMT-15-116 SET1AComplex(5-subunits)499HMT-15-117SET1BComplex(5-subunits)499HMT-11-133SET7/9Methyltransferase299HMT-11-476SET8(GST)299HMT-11-118 SET8Methyltransferase299HMT-11-128 SETD2(GST)Methyltransferase299HMT-11-129SETD2(His)Methyltransferase299HMT-11-110SMYD2Methyltransferase325HMT-11-111SUV39H1Methyltransferase299HMT-11-418SUV39H2(GST)Methyltransferase299HMT-11-112SUV39H2(His)Methyltransferase299HMT-21-149SUV420H1-tv1Methyltransferase450HMT-21-150SUV420H1-tv2Methyltransferase450HMT-21-349SUV420H2Methyltransferase325HMT-14-109WRAD2375HMT-14-438(H3.3-H4)2Tetramer325HMT-35-435CoreHistones(Chicken)250HMT-11-184Fibrillarin(GST)325HMT-11-183Fibrillarin(His)325HMT-11-137GST-GAR299HMT-12-316H2A/H2Bdimers325HMT-11-180HistoneH1.050HMT-11-146HistoneH2A50HMT-11-147HistoneH2B50HMT-11-134 HistoneH3.350HMT-35-179Nucleosomes(ChickenMono/Di)280HMT-35-182Nucleosomes(ChickenOligo/PolyH5Enriched)280
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①在用超滤除白蛋白，IgG中硫酸铵盐时，膜包该如何选择？选择几个？
②如用凝胶过滤来分级纯化血清中65%硫酸铵盐析出的白蛋白和纯化33%硫酸铵盐析出的IgG，其填充介质应选择什么？其洗脱缓冲液应用什么好？
下面有些关于这方面的数据，供参考：
①牛血清白蛋白：分子量：66210；分子形状：椭圆形；分子大小：
40Å*140Å；等电点：4.7；血浆中的含量：52.0g/L。
②IgG:分子量：15300；分子形状：球状；等电点：5.8—7.3;血浆中含量：2.0g/L。
③另外，我从书上看到说：凝胶过滤在分级方法中分辨率为中等，但对脱盐效果优良；流速较低，对分级每周期约≥8小时，对脱盐仅30分钟；适用于大规模纯化的最后步骤，在纯化过程的任何阶段均可进行脱盐处理，尤其适用于两种缓冲液交替时。
期待您的帮助，谢谢您。
盐析 ——用于各种蛋白质酶离纯化；
蛋白质溶液加入量性盐破坏蛋白质胶体稳定性使其析种称盐析用性盐硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等各种蛋白质盐析所需盐浓度及pH同故用于混蛋白质组离例用半饱硫酸铵沉淀血清球蛋白饱硫酸铵使血清白蛋白、球蛋白都沉淀盐析沉淀蛋白质经透析除盐仍保证蛋白质性调节蛋白质溶液pH至等电点再用盐析则蛋白质沉淀效更盐析两类第类叫Ks段盐析定PH温度通改变离强度实现用于早期粗提液；第二种叫b段盐析定离强度通改变PH温度实现用于期进步离纯化结晶影响盐析素包括：蛋白质浓度、离强度类型、PH值、温度等针温度条需要强调：低离强度或纯水蛋白质溶解度定范围内随温度增加增加高浓度蛋白质、酶肽类物质溶解度随温度升降般情况蛋白质盐析温度特殊要求室温进行某些温度比较敏酶要求0-4℃进行
使用硫酸铵沉淀蛋白需要注意：硫酸铵含少量重金属离蛋白质巯基敏作用使用前必须用H2S处理：硫酸铵配浓溶液通入H2S饱放置夜用滤纸除重金属离浓缩结晶100℃烘干使用另外高浓度硫酸铵溶液般呈酸性（PH=5.0左右）使用前需要用氨水或硫酸调节至所需PH
机溶剂沉淀 ——用于物、糖及核酸产品离纯化；
机溶剂沉淀机理降低水介电数导致具表面水层物脱水相互聚集析该优点于：1）辨能力比盐析高即蛋白质或其溶剂比较窄机溶剂浓度沉淀；2）沉淀用脱盐滤较容易；3）化制备应用比盐析广泛温机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性例酒精消毒灭菌操作要求低温进行机溶剂选择首先能水混溶使用较机溶剂乙醇、甲醇、丙酮二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈2-甲基-2,4戊二醇等
等电点沉淀 ——单独应用较少与其结合使用；
两性电解质净电荷零溶解度低同两性电解质具同等电点基础进行离工业产胰岛素粗提液先调PH8.0除碱性蛋白质再调PH3.0除酸性蛋白质利用等电点除杂蛋白必须解制备物酸碱稳定性盲目使用十危险少蛋白质与金属离结合等电点发偏移故溶液含金属离必须注意调整PH值等电点与盐析、机溶剂沉淀或其沉淀联合使用提高其沉淀能力
重金属盐沉淀 ——用于抢救误服重金属盐毒病；
许机物质包括蛋白内碱性溶液带负电荷能与金属离形沉淀根据机物与间作用机制羧酸、胺及杂环等含氮化合物类铜锌镉；亲羧酸疏含氮化合物类钙镁铅；亲硫氢基化合物类汞银铅蛋白质-金属离复合物重要性质溶解度溶液介电数非敏调整水溶液介电数（加入机溶剂）即沉淀种蛋白沉淀条件pH稍于等电点宜重金属沉淀蛋白质变性若低温条件并控制重金属离浓度用于离制备变性蛋白质临床利用蛋白质能与重金属盐结合种性质抢救误服重金属盐毒病给病口服量蛋白质用催吐剂结合重金属盐呕吐解毒
谢谢各位
1. 血细胞与血清分离：
取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).
2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心
梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用.
3. 血清蛋白分离：除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质.
1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。
2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后，溶液中基本只保留了抗体的成分，其他蛋白都去掉了，抗体纯度可以比较高。相对来说，这种方法是大规模抗体制备中，用得最多的纯化方法，很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。
3.特异型纯化：但是有些抗体，需要纯度特别高，特异性特别好，就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱，再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了，特异性最好。当然，由于牵涉到抗原固定等操作，成本相应是最高的。
（一）高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）
【参考值】
0.94～2.0mmol/L
【临床意义】
降低具有临床意义。HDL-C与TG呈负相关系，见于冠心病、动脉粥样硬化、糖尿病、肝脏损害、肾病综合征。
（二）低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）
【参考值】
沉淀法:2.07～3.12mmol/L，3.15～3.61mmol/L为边缘升高，≥3.64mmol/L为升高。
【临床意义】
升高具有临床意义。LDL-C升高与冠心病发病呈正相关系。
（三）脂蛋白（a），LP（a）
【参考值】 <300mg/L
【临床意义】
脂蛋白（a）升高已作为冠心病及脑血管疾病发病的独立危险因素。
