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RayBiotech/Human fosB Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-FOSB-1
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RayBiotech/Human fosB Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-FOSB-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
TFEH-FOSB-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • P53539
Gene ID:
  • 2354
Gene Symbols:
  • FOSB
  • G0S3
Protein Name & Synonyms:
Protein fosB, G0/G1 switch regulatory protein 3
Target Species:
  • Human

Assay Format

Pathway:
  • IGF Signaling
  • JAK/STAT Signaling
  • MAPK Signaling
  • PI3K-AKT Signaling
  • PKC Signaling
  • TGF-beta Signaling
Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human fosB in whole lysates and nuclear extracts.
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Lysates
  • Nuclear Extracts
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Semi-Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit

Introduction

Activator protein-1 (AP-1) is a sequence-specific transcriptional activator composed of members of the Jun (c-Jun, JunB, and JunD) and Fos (c-Fos, fosB, Fra1, and Fra2) families in formats of homo- and heterodimers. These proteins belong to the bZIP group of DNA binding proteins with the ability to a common consensus sequence-defined AP-1-binding site. Jun and Fos proteins can also dimerize other basic leucine zipper proteins such as ATF, CCAAT enhancer-binding protein, Maf, and NF-E2. Jun-Jun and Jun-Fos dimers bind preferentially to the TPA responsive element (TRE), whose consensus is TGAGTCA, whereas Jun-ATF dimers prefer to bind to the c-AMP-responsive element (CRE), whose consensus is TGAGCTCA. Inside cells, AP-1 activity is induced by an incredible diversity of signals, including growth factors, cellular stress, ionizing and ultraviolet irradiation, DNA damage, oxidative stress, neuronal depolarization antigen binding by T or B lymphocytes, and cytokines. The mechanisms involved in the induction of AP-1 activity are either through changing the expression of AP-1 components or post-translation modification or both to regulate their trans-activity positively or negatively. For example, stimulation by growth factors or by activating mutations in cytoplasmic effectors such as ras and raf, results in AP-1 activation by triggering the ERK signaling pathway. On the other hand, AP-1 responses to proinflammatory cytokines and UV radiation are mostly dependent on two other MAPK cascades, JNK and p38 of MAP kinases. As a result, the AP-1 regulates different target genes executing different biological functions such as cell proliferation, differentiation, apoptosis, or cell death.

Product Features

  • Specific transcription factor-DNA binding assay
  • Perfect alternative to EMSA
  • Easy to perform in an ELISA format
  • Non-radioactive assay
  • High throughput (96-well plate format)
  • Assay can be completed within 5 hours

Application Notes

Kit Components
  • 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
  • DNA Binding Buffer
  • Positive Control Sample
  • Specific Competitor DNA probe
  • Non-specific Competitor DNA probe
  • Assay Reagent
  • DTT
  • Wash Buffer
  • Primary Antibody
  • HRP-conjugated Secondary Antibody
  • Antibody Diluent Buffer
  • TMB One-Step Substrate Reagent
  • Stop Solution
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare sample dilutions
  • Absorbent paper
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • < li="">
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of sample or positive control to each well.
  3. Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
  4. Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
  7. Incubate 1 h at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Typical Data

Figure 1Transcription factor assay of fosB from nuclear extracts of K562 cells or K562 cells treated with PMA (50 ng/ml) for 3 hr. A. Western-blot result of fosB from cytoplasmic and nuclear fractions. B. Transcription factor assay of fosB from nuclear fractions with the RayBio® Activity Assay Kit.

Figure 2Transcription factor assay of fosB from nuclear extracts of K562 cells or K562 cells treated with PMA (50 ng/ml) for 3 hr with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of fosB to the conserved binding site detected by using the RayBio® fosB TF Activity Assay Kit.

Storage/Stability

Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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单一抗甲状腺过氧化物酶抗体升高是不能判断,需要进一步检查抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺微粒体抗体(TMAb)、TRAB、甲状腺彩超、甲状腺功能等。
1.若都为正常,那么并未有太大问题,只要定期复查就可以了。
2.如果TGAb、TMAb、甲状腺功能均高,那么就是桥本氏甲状腺炎并甲亢,需要抗甲亢治疗。
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4.如果TGAb、TMAb高,甲状腺功能正常,那么就是桥本氏甲状腺炎,无需特殊治疗,只要定期复查甲状腺功能就可能以了,不过这种情况有可能以后演变成甲减或者甲亢。
患者信息:女25岁重庆万州区病情描述(发病时间、主要症状等):脖子粗。查血化验结果”抗甲状腺过氧化物酶抗体〉600,甲状腺球蛋白抗体1282,促甲状腺素39.26,总三碘甲状腺氨酸1.42,总甲状腺素54.24,游离三碘甲状腺氨酸3.88,游离甲状腺...
甲状腺结合球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体高多倍,是桥本病,慢性淋巴细胞性甲状腺炎的病程分为1)短暂的甲亢期:治疗可以用抗甲状腺药物治疗,如果有明显的心率增快可以用β受体阻断药对症治疗,结合中药提高免疫力降低抗体,要预防甲减的发生.2)甲状腺功能正常期:主要是用中药改善免疫力降低抗体,减缓疾病的发展,使其不进入甲减期或晚进入甲减期,争取治愈.3)甲减期:适当补充甲状腺素,稳定甲状腺功能,结合中医中药调整阴阳平衡,恢复免疫功能降低抗体,积极治疗争取减少西药的替代量,达到部分停药或长期缓解的目的.
患者信息:男38岁广东广州病情描述(发病时间、主要症状等):抗甲状腺过氧化物酶抗体398正常值0--34偏高抗甲状腺球蛋白抗体54.7正常值0--30偏高总T4正常总T32.93正常值1.34--2.73偏高游离T3游离T4正常...
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抗甲状腺过氧化物酶抗体是什么物质,又有什么临床意义呢?相信很多患者对这项检查并不陌生,当这项结果偏高时医生就会提醒你有患自身免疫性甲状腺疾病(AITD,如甲亢、桥本病)这一问题作出解答。本文涉及很多的专业术语,如果不明白请咨询我们的专家。 抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)是甲状腺自身抗体的一种。临床还常用的甲状腺自身抗体有甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和TSH受体抗体(TRAb)。甲状腺过氧化物酶(TPO)是催化甲状腺激素合成的关键酶,它参与了TG(甲状腺球蛋白)酪氨酸残基的碘化和碘化酪氨酸的偶联作用,与自身免疫性甲状腺疾病的发生、发展密切相关。TPOAb作为AITD的主要自身抗体可引起甲状腺滤泡损伤,导致甲状腺功能减退。 甲亢是一种常见的自身免疫性疾病>咛迦缦拢貉?逯蠺POAb含量阳性说明甲亢患者有针对甲状腺组织的自身免疫反应,但不能反映甲状腺的功能状态,也不是甲亢的诊断依据,而只能用来反映甲亢缓解的程度;甲亢治疗结束时如果TPOAb仍阳性,表示停药后仍有可能复发;同时若存在高滴度TPOAb的甲亢患者不宜行I131或手术治疗,因其治疗后发生永久性甲减的可能性大。
单一康甲状腺过氧化物酶抗体升高是不能判断什么甲状腺相关疾病,而需要进一步检查抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺微粒体抗体(TMAb)、TRAB、甲状腺彩超、甲状腺功能等。
1.若都为正常,那么并未有太大问题,只要定期复查就可以了。
2.如果TGAb、TMAb、甲状腺功能均高,那么就是桥本氏甲状腺炎并甲亢,需要抗甲亢治疗,那么,要注意戒碘饮食,避免吃一些含碘丰富的食物,如海产品等。
3.如果TGAb、TMAb高,甲状腺功能下降,那么就是桥本氏甲状腺炎并甲减,需要进行甲减治疗,饮食方面可以增加含碘丰富的食物摄入。
4.如果TGAb、TMAb高,甲状腺功能正常,那么就是桥本氏甲状腺炎,无需特殊治疗,只要定期复查甲状腺功能就可能以了,不过这种情况有可能以后演变成甲减或者甲亢。
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抗甲状腺过氧化物酶抗体是诊断甲状腺自身免疫性疾病的首选指标,单一抗甲状腺过氧化物酶抗体升高是不能判断,需要进一步检查抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺微粒体抗体(TMAb)、TRAB、甲状腺彩超、甲状腺功能等。
1.若都为正常,那么并未有太大问题,只要定期复查就可以了。
2.如果TGAb、TMAb、甲状腺功能均高,那么就是桥本氏甲状腺炎并甲亢,需要抗甲亢治疗。
3.如果TGAb、TMAb高,甲状腺功能下降,那么就是桥本氏甲状腺炎并甲减,需要进行甲减治疗。
4.如果TGAb、TMAb高,甲状腺功能正常,那么就是桥本氏甲状腺炎,无需特殊治疗,只要定期复查甲状腺功能就可能以了,不过这种情况有可能以后演变成甲减或者甲亢。
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