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目前最常用的方法就是使用微球阵的multiplex。早以商品化了。以BD出品的为例,你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球,每一种都是两种不同荧光强度组合,所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后,再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体(同样颜色)。这样,只要微球上结合有细胞因子,这个微球就会有三种荧光了。前两种荧光来判断是哪种微球(哪种细胞因子),第三种荧光是识别抗体上的,来定量。试剂盒还会提供标准品,用来做标准曲线。
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