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Braintree/Lab Standard Gas Anesthesia Mask/for Mice (51500 series units only)/GM516 09
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4000-520-616
The Gas Anesthesia mask is installed over the incisor bar, with the cone opening toward the open U. The animal (rat or mouse) is installed by placing its teeth over the incisor bar, and sliding the adaptor forward until the cone is snug about the animals nose, thereby substituting for the nose clamp. The teeth and the cone provide a snug, stable hold. Anesthesia Masks enable gas anesthesia of rats or mice in a Lab Standard or other stereotaxic instruments, with minimal researcher exposure to anesthetic gases. Anesthetic gas flows in the tubing connector, past the animals nose, and out the other side. Spent gas may be routed to recycling, exhaust or gas analysis instruments. The Rat Gas Anesthesia Mask (51610) fits easily onto the 51621 Rat Adaptor (sold separately)
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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2021-09-11
Pribolab公司根据官方分析化学家学会(AOAC)的法定方法， 利用先进的生产技术和设备制备霉菌毒素标准品，并对所有产品用光谱法、TLC/ HPLC测试，对比已知标准品和前批产品，从而确保了产品的精确性和一致性，确保您购买的标准品的品质和纯度(每批次均附有产品COA证书)。不仅提供固体标准品也提供各类毒素液体标准品和液体混合标准品。 查看更多
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2021-08-11
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的异橙皮苷 USP标准品供应信息，浏览与异橙皮苷 USP标准品相关的产品或在搜索更多与异橙皮苷 USP标准品相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
芜湖甙尔塔医药科技有限公司在发布的提供天然来源的化学样品标准品和对照品1500种供应信息，浏览与提供天然来源的化学样品标准品和对照品1500种相关的产品或在搜索更多与提供天然来源的化学样品标准品和对照品1500种相关的内容。 查看更多
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2021-06-03
甄准微球标准品和纳米球标准品，甄准微球标准品和纳米球标准品 查看更多
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2019-03-20
上海柯维化学技术有限公司在发布的氢氯噻嗪 EP标准品 58-93-5供应信息，浏览与氢氯噻嗪 EP标准品 58-93-5相关的产品或在搜索更多与氢氯噻嗪 EP标准品 58-93-5相关的内容。 查看更多
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2019-03-28
北京绿百草科技发展有限公司在发布的绿百草科技专业提供冈田软海绵酸标准品CAS号：78111-17-8供应信息，浏览与绿百草科技专业提供冈田软海绵酸标准品CAS号：78111-17-8相关的产品或在搜索更多与绿百草科技专业提供冈田软海绵酸标准品CAS号：78111-17-8相关的内容。 查看更多
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2019-03-28
兰州市食品药品检验所色谱柱标准品试剂等试验耗材项目公开招标公告兰州市公共资源交易中心受兰州市食品药品检验所的委托，现对色谱柱标准品试剂等试验耗材项目以公开招标方式进行采购，欢迎符合资格条件的供应商前来参加。一、招标文件编号：GK2019-025二、招标项目主要内容:第一包：前处理等试验耗材（一批）；第二包：试剂玻璃仪器等试验耗材（一批）；第三包：对照品等试验耗材（一批）；第四包：色谱及微生物等试验 查看更多
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2021-07-19
青岛博智汇力生物科技有限公司在发布的褐藻寡糖标准品供应信息，浏览与褐藻寡糖标准品相关的产品或在搜索更多与褐藻寡糖标准品相关的内容。 查看更多
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2021-09-12
Pribolab公司根据官方分析化学家学会(AOAC)的法定方法， 利用先进的生产技术和设备制备霉菌毒素标准品，并对所有产品用光谱法、TLC/ HPLC测试，对比已知标准品和前批产品，从而确保了产品的精确性和一致性，确保您购买的标准品的品质和纯度(每批次均附有产品COA证书)。不仅提供固体标准品也提供各类毒素液体标准品和液体混合标准品. 查看更多
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2021-08-24
Discoverx中国代理 询价 Ciprofibrate ￥100 Pierce中国代理 询价 Baccatin III ￥100 AccuCount Fluorescent Particles, Nile Red, 20um (+/-2um), 5x10... 查看更多
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2019-03-20
上海甄准生物科技有限公司在发布的双硫仑标准品供应信息，浏览与双硫仑标准品相关的产品或在搜索更多与双硫仑标准品相关的内容。 查看更多
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2019-03-28
上海甄准生物科技有限公司在发布的美国药典USP硫酸软骨素标准品供应信息，浏览与美国药典USP硫酸软骨素标准品相关的产品或在搜索更多与美国药典USP硫酸软骨素标准品相关的内容。 查看更多
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这3点不注意,可能会毁了流式结果_补偿123
葬花Sh32018-01-17
流式细胞术中荧光补偿该如何调节？
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中，而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢？l 调节电压l 检测荧光通道的自发荧光l 每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照？l 细胞l 补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选，但是当细胞数量有限，无多余细胞用于抗体单染或感兴趣的表面抗原表达较低，阳性分群不明显不足以用来调节补偿时，建议选择补偿微球。补偿调节时要注意：l 使用未染色的细胞做PMT的电压设置l 不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球：OneComp eBeads与UltraComp eBeads。微球大小和淋巴细胞相当，可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群：一群是可以结合抗体的阳性群，一群是不会与抗体反应的阴性群。优点：l 使用方便，一滴即可l 使用实验抗体与微球有效结合调节补偿，无需再用CD4分群来调节l 细胞替代物，适应各种孵育时间，结果稳定流式细胞术中荧光补偿该如何调节？l 能与各种种属和亚型的抗体反应ProductSpecies CompatibilityChain RecognitionFeaturesMouse IgRat IgHamster IgRabbit IgKappa Light ChainLambda Light ChainOne DropOne VialAll cell sizesViolet LaserUltraComp eBeads 01-2222√√√√※√√√√√√OneComp eBeads 01-1111√√√√※√√√√√Competitor X Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Anti-Rat Ig, k√√Competitor X Anti-Rat/Hamster Ig, k√√√Competitor X Plus Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Plus Anti-Rat Ig, k√√Competitor Z Anti-Mouse Bead Kit√√√
竞争品牌的微球是分种属的，使用不同抗体要购买多个产品以使用注：兔来源的抗体与微球结合力较弱，但某些还是可以使用l 适用于各种激发光---适用于488 nm 蓝光，532 nm 绿光，561 nm 黄光，633-635 nm 红光，UltraComp eBeads尤其适用紫外 (355 nm) 或者 紫色 (405 nm) 激光器l 微球本身信号经过优化适合补偿调节l 价格相当，有小包装操作步骤：1. 准备好流式管，每种荧光抗体一个；2. 将微球翻转或者涡旋混匀；3. 在每管中加入一滴微球；4. 在管中分别加入相应的 1 test 抗体（不同抗体 1 test 的用量不同，具体参见说明书）；5. 敲击或者涡旋混匀；6. 2-8℃暗处孵育 15-30 分钟；7. 每管加 2ml 流式染色缓冲液，400-600 x g 离心 3-5 分钟；8. 弃上清，每管加入 0.2-0.4 mL 流式染色缓冲液；9. 混匀后上机分析
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中，而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢？l 调节电压l 检测荧光通道的自发荧光l 每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照？l 细胞l 补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选，但是当细胞数量有限，无多余细胞用于抗体单染或感兴趣的表面抗原表达较低，阳性分群不明显不足以用来调节补偿时，建议选择补偿微球。补偿调节时要注意：l 使用未染色的细胞做PMT的电压设置l 不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球：OneComp eBeads与UltraComp eBeads。微球大小和淋巴细胞相当，可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群：一群是可以结合抗体的阳性群，一群是不会与抗体反应的阴性群。优点：l 使用方便，一滴即可l 使用实验抗体与微球有效结合调节补偿，无需再用CD4分群来调节l 细胞替代物，适应各种孵育时间，结果稳定流式细胞术中荧光补偿该如何调节？l 能与各种种属和亚型的抗体反应ProductSpecies CompatibilityChain RecognitionFeaturesMouse IgRat IgHamster IgRabbit IgKappa Light ChainLambda Light ChainOne DropOne VialAll cell sizesViolet LaserUltraComp eBeads 01-2222√√√√※√√√√√√OneComp eBeads 01-1111√√√√※√√√√√Competitor X Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Anti-Rat Ig, k√√Competitor X Anti-Rat/Hamster Ig, k√√√Competitor X Plus Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Plus Anti-Rat Ig, k√√Competitor Z Anti-Mouse Bead Kit√√√
竞争品牌的微球是分种属的，使用不同抗体要购买多个产品以使用注：兔来源的抗体与微球结合力较弱，但某些还是可以使用l 适用于各种激发光---适用于488 nm 蓝光，532 nm 绿光，561 nm 黄光，633-635 nm 红光，UltraComp eBeads尤其适用紫外 (355 nm) 或者 紫色 (405 nm) 激光器l 微球本身信号经过优化适合补偿调节l 价格相当，有小包装操作步骤：1. 准备好流式管，每种荧光抗体一个；2. 将微球翻转或者涡旋混匀；3. 在每管中加入一滴微球；4. 在管中分别加入相应的 1 test 抗体（不同抗体 1 test 的用量不同，具体参见说明书）；5. 敲击或者涡旋混匀；6. 2-8℃暗处孵育 15-30 分钟；7. 每管加 2ml 流式染色缓冲液，400-600 x g 离心 3-5 分钟；8. 弃上清，每管加入 0.2-0.4 mL 流式染色缓冲液；9. 混匀后上机分析
流式细胞仪可以定量测定细胞中的_或某种特异蛋白的含量,以及细胞...123
七宗罪01852018-01-17
可以，这个和western定量的原理类似，需要有标准品来作比对。不过很难。因为流式主要是用来最相对量的比较的。
细胞内的蛋白，用荧光标记的单克隆抗体识别后，用流式可以测出每个细胞的相对荧光强度。有一种特异性的微球，可以吸附一系列不同定量分子数的抗体。这种微球吸附同样的荧光抗体，可以做出荧光强度和所吸附抗体分子数量的标准曲线。然后拿细胞检测的荧光强度和这个标准曲线对比，得到细胞内所结合的抗体数。因为单克隆抗体只结合相同的抗原表位，所以可以推算出细胞内蛋白的分子数量了。
解释结果的时候要考虑到抗体的特异性和染色的效果等影响因素。
细胞内的蛋白，用荧光标记的单克隆抗体识别后，用流式可以测出每个细胞的相对荧光强度。有一种特异性的微球，可以吸附一系列不同定量分子数的抗体。这种微球吸附同样的荧光抗体，可以做出荧光强度和所吸附抗体分子数量的标准曲线。然后拿细胞检测的荧光强度和这个标准曲线对比，得到细胞内所结合的抗体数。因为单克隆抗体只结合相同的抗原表位，所以可以推算出细胞内蛋白的分子数量了。
解释结果的时候要考虑到抗体的特异性和染色的效果等影响因素。
海藻酸钠微球血管栓塞剂(简称KMG)_国产器械数据库_药智数据123
du_yq2005-09-01
相关疾病：目前微球栓塞剂的研究为肿瘤治疗的热点之一,其疗效和适应症有待探讨.请有这方面经验的战友发表高见.理论上用作肝动脉栓塞微球的粒径应在40-200um之间，小于40um则有可能通过动静脉吻合进入静脉，大于......
国内首创注射用前列地尔干乳剂优帝尔 123
foxbine2018-01-17
第三代前列地尔制剂——优帝尔，富含了“脂微球载体技术”与“脂微球保护技术”两大核心技术。“脂微球载体技术”具有良好的靶向性、持续性、高效性、低副作用的特点：
靶向性——脂微球载体以其特有的亲和力聚集于病变部位；
持续性——在脂微球的保护作用下，前列地尔主要在肺部的灭活明显降低；
高效性——仅需传统剂型几十分之一的给药量，且疗效更佳；
低副作用——在脂微球的屏障作用下，前列地尔对血管的刺激和炎性反应明显减少；
“脂微球保护技术”的引入，使得优帝尔的剂型稳定性更高，用药更安全：
剂型稳定性更高——优帝尔仅需在阴凉处（不超过20℃）保存，这样带来的好处是：南方地区无需冷藏储存，北方地区也不用再担心药物因温度过低而冻结，从而影响临床用药。（蓓畅、凯时等同类产品在运输、贮藏过程中必须保证环境温度范围在0-5℃）
用药更安全——市场上已有北京泰德制药有限公司生产的“前列地尔注射液”，商品名“凯时”，该品种也是运用脂微球化技术的一类制剂。但是该品种由于自身生产工艺的缺点，其中的主要杂质—PGA1相当高，质量标准中规定其限度高达60%，对产品中其他杂质也未进行控制。而药友公司通过长达近10年的摸索，通过无菌过滤和低温冷冻干燥技术，制备的“注射用前列地尔干乳剂”可将杂质PGA1严格控制在10%以内，其他杂质控制在1%以内，表明药友公司采用的冷冻干燥方法更加有利于产品的质量控制。因此药友公司注射用前列地尔干乳剂提出了比“凯时”更为严格的质量标准要求，有效保证产品质量。由于本品质量的提升，使得本品可以储存在常见的阴凉条件下，而不是“凯时”相当苛刻的储存条件要求。药友公司技术人员通过大量科学研究，探索出特殊的冻干保护剂和严格的冻干过程控制实现了脂微球的冻干技术，使本品既保留了脂微球的物理性质，又显著提升了脂微球的化学稳定性。因此，“优帝尔”的执行标准仅为前列地尔注射液执行标准的六分之一。
靶向性——脂微球载体以其特有的亲和力聚集于病变部位；
持续性——在脂微球的保护作用下，前列地尔主要在肺部的灭活明显降低；
高效性——仅需传统剂型几十分之一的给药量，且疗效更佳；
低副作用——在脂微球的屏障作用下，前列地尔对血管的刺激和炎性反应明显减少；
“脂微球保护技术”的引入，使得优帝尔的剂型稳定性更高，用药更安全：
剂型稳定性更高——优帝尔仅需在阴凉处（不超过20℃）保存，这样带来的好处是：南方地区无需冷藏储存，北方地区也不用再担心药物因温度过低而冻结，从而影响临床用药。（蓓畅、凯时等同类产品在运输、贮藏过程中必须保证环境温度范围在0-5℃）
用药更安全——市场上已有北京泰德制药有限公司生产的“前列地尔注射液”，商品名“凯时”，该品种也是运用脂微球化技术的一类制剂。但是该品种由于自身生产工艺的缺点，其中的主要杂质—PGA1相当高，质量标准中规定其限度高达60%，对产品中其他杂质也未进行控制。而药友公司通过长达近10年的摸索，通过无菌过滤和低温冷冻干燥技术，制备的“注射用前列地尔干乳剂”可将杂质PGA1严格控制在10%以内，其他杂质控制在1%以内，表明药友公司采用的冷冻干燥方法更加有利于产品的质量控制。因此药友公司注射用前列地尔干乳剂提出了比“凯时”更为严格的质量标准要求，有效保证产品质量。由于本品质量的提升，使得本品可以储存在常见的阴凉条件下，而不是“凯时”相当苛刻的储存条件要求。药友公司技术人员通过大量科学研究，探索出特殊的冻干保护剂和严格的冻干过程控制实现了脂微球的冻干技术，使本品既保留了脂微球的物理性质，又显著提升了脂微球的化学稳定性。因此，“优帝尔”的执行标准仅为前列地尔注射液执行标准的六分之一。
求方法：怎么用流式细胞术检测血清中IL_问答详情_微球标准品_标准...123
温柔ˉd悎憈2018-01-17
目前最常用的方法就是使用微球阵的multiplex。早以商品化了。
以BD出品的为例，你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球，每一种都是两种不同荧光强度组合，所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后，再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体（同样颜色）。这样，只要微球上结合有细胞因子，这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球（哪种细胞因子），第三种荧光是识别抗体上的，来定量。试剂盒还会提供标准品，用来做标准曲线。
以BD出品的为例，你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球，每一种都是两种不同荧光强度组合，所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后，再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体（同样颜色）。这样，只要微球上结合有细胞因子，这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球（哪种细胞因子），第三种荧光是识别抗体上的，来定量。试剂盒还会提供标准品，用来做标准曲线。
【讨论】【microspheres】大家来说说缓释微球 制剂技术讨论版...123
davidszy2007-12-11
注射用缓释微球制剂，这个国外上世纪80年代中期就有产品问世的剂型，在国内仍然举步为艰,和其它很多新剂型一样停留于低水平重复的阶段。然而，随着化学药品开发难度的增大，国内新药开发的目光越来越向中药和生物技术药品转变，多肽蛋白药物作为生物技术药品中最重要的一个分支，其药物本身的特点与微球制剂特点的切合度很高，因此我相信相信微球制剂在未来不长时间内，前景光明。从园子里关于微球请教帖的数量也可见一斑，07年微球的请教帖明显多于之前的年份。
目前国内的制药企业对微粒释放系统的立项开发越来越多，园子里已经就脂质体展开了很多火热的讨论，我个人也参与其中，大家交流经验，取长补短，渐渐的找到了方向，系统而固定的讨论交流是非常有好处的。
因此在此倡议建立一个微球的交流区，让大家相互交流比如：微球产业化、技术难点、实验中遇到的问题、相关理论的探讨、最新进展交流等等
目前国内的制药企业对微粒释放系统的立项开发越来越多，园子里已经就脂质体展开了很多火热的讨论，我个人也参与其中，大家交流经验，取长补短，渐渐的找到了方向，系统而固定的讨论交流是非常有好处的。
因此在此倡议建立一个微球的交流区，让大家相互交流比如：微球产业化、技术难点、实验中遇到的问题、相关理论的探讨、最新进展交流等等
流式细胞术(FCM)简介123
莠琹鮓瑂侏2018-01-17
CV是流式做仪器校准的时候，使用标准品的荧光微球来测量的。每个厂家的要求不一样。比如BD的CS&T要求是小于6%
敢问大神微球微囊注射剂不会堵塞微循环吗 制剂技术讨论版...123
dxy_7y9wn0ge2017-12-03
静脉注射乳剂粒径都要0.5微米吧
PSL标准粒子发生器每分钟可以产生多少PSL微球?123
2018-01-17
高输出聚苯乙烯胶乳粒子发生器可以每分钟产生高达7.2x1010 PSL微球，粒径为0.12μm。当这种气溶胶与720cfm的空气混合，用于以每分钟90英尺测试24“×48”过滤器时，系统输出将产生每立方英尺1×108挑战性上游气溶胶量。
对于六分之一效率（99.9999％）ULPA过滤器，该系统挑战将产生100个粒子/ 立方英尺的下游气溶胶浓度或将在标称1.0cfm激光粒子计数器（LPC）中产生100个粒子/分钟的计数速率。
过滤器效率以及过滤器中任何相关联的泄漏可以通过LPC简单地检测。标准集团的高输出PSL气溶胶发生器取代了传统过滤器测试和无尘室认证中使用的DOP（邻苯二甲酸二辛酯）和其他油基气溶胶发生器。
对于六分之一效率（99.9999％）ULPA过滤器，该系统挑战将产生100个粒子/ 立方英尺的下游气溶胶浓度或将在标称1.0cfm激光粒子计数器（LPC）中产生100个粒子/分钟的计数速率。
过滤器效率以及过滤器中任何相关联的泄漏可以通过LPC简单地检测。标准集团的高输出PSL气溶胶发生器取代了传统过滤器测试和无尘室认证中使用的DOP（邻苯二甲酸二辛酯）和其他油基气溶胶发生器。
荧光微球活化后离心得不到沉淀 免疫学讨论版123
雨落魂殇2021-07-26
【原创】荧光微球吞噬实验的ProtocolPolysciences品牌咨询123
mornsmile2021-07-29
最近有两位战友发信询问我的荧光微球吞噬实验的Protocol。
现分享于此：
LatexBeadsPhagocytosisassay
---Materials
*Fluorescencelabeledlatexbeads(1umdiameter),2.5%aqueoussUSPension
*3%BSAcontaining25mMNa2HPO4,pH6.0
*0,3%(w/v)azide
*Culturemediumcontaining5%FBS
*Distilledwater,PBS
*Bathsonication,6(12)-wellplates
---Cellcultureandtreatment
1,Inoculateplateswith7,0104cells/cm2perwell.Incubateat37℃,5%CO2for24hr,bestuntil50-70%confluenceisreached
2,Removeculturemediumandexposethecellstotestmaterial.Incubateat37℃,5%CO2for24hr.
---Preparationofcoatedlatexbeads
1，Washlatexbeadswithdistilledwaterandpelletat10,000gfor8minatRT.
2，Resuspendlatexbeadsin3%BSAcontaining25mMNa3PO4(pH6.0)andincubateatRTfor15minwithbathsonication.
*CoatingbeadsinBSAinsuresbeadsremaininamonodispersestate.
3，Washthebeadsoncewithculturemediumcontaining5%FBS.
4，Resuspendthebeadsinculturemediumatconcentration2.0%.Thisisbeadsstock.Storedindarknessat4℃.
---Assay
1，Controlsandsamples:Intactcontrol(Nostaining)1well
-Negativecontrol(azidetreated)1well
-Normalcontrol1well
-sample5wells
*Inordertodifferentiatebetweenphagocytosedbeadsandbeadsnonspecificallyadheretothecellsurface,controlcellsareexposedto0,3%(w/v)azidefor10minpriortotheadditionofcoatedbeads.Thistreatmentcompromisesmicroglialenergeticprocessesandfewbeadswereinternalizedasobservedbyfluorescentmicroscopy.Meanfluorescenceofazide-treatedmicrogliawasusedasthenegativecontrolandwassubtractedfromvaluesobtainedinexperimentalsamples.
2，Forexperimentsusing6well-plates,15μlbeadsstockin1mlculturemediumisappliedtoeachwell.Votexthebeadsstockwellandtakeout105μlandaddinto7mlculturemedium.Bathsonificatefor10minatRTindarkness.Thisisbeadsworkingsolution.
Forexperimentsusing12well-plates,6μlbeadsstockin0.4mlculturemediumisappliedtoeachwell.
3，WasheachwelltwicewithPBSandreplacewithbeadsworkingsolution,1ml/wellfor6-wellplate,0.4ml/wellfor12well-plate.Incubateinthedarkat37℃for80-120min.
4，Removebeadsworkingsolutionandwash3timeswithPBStoremoveexcessbeads.
5，LiftthecellsbyscrappingortrypsinizationandwashthecellswishPBS.
6，StainwithPI(4ug/mlfinalconcentration)andrunforFACS.
现分享于此：
LatexBeadsPhagocytosisassay
---Materials
*Fluorescencelabeledlatexbeads(1umdiameter),2.5%aqueoussUSPension
*3%BSAcontaining25mMNa2HPO4,pH6.0
*0,3%(w/v)azide
*Culturemediumcontaining5%FBS
*Distilledwater,PBS
*Bathsonication,6(12)-wellplates
---Cellcultureandtreatment
1,Inoculateplateswith7,0104cells/cm2perwell.Incubateat37℃,5%CO2for24hr,bestuntil50-70%confluenceisreached
2,Removeculturemediumandexposethecellstotestmaterial.Incubateat37℃,5%CO2for24hr.
---Preparationofcoatedlatexbeads
1，Washlatexbeadswithdistilledwaterandpelletat10,000gfor8minatRT.
2，Resuspendlatexbeadsin3%BSAcontaining25mMNa3PO4(pH6.0)andincubateatRTfor15minwithbathsonication.
*CoatingbeadsinBSAinsuresbeadsremaininamonodispersestate.
3，Washthebeadsoncewithculturemediumcontaining5%FBS.
4，Resuspendthebeadsinculturemediumatconcentration2.0%.Thisisbeadsstock.Storedindarknessat4℃.
---Assay
1，Controlsandsamples:Intactcontrol(Nostaining)1well
-Negativecontrol(azidetreated)1well
-Normalcontrol1well
-sample5wells
*Inordertodifferentiatebetweenphagocytosedbeadsandbeadsnonspecificallyadheretothecellsurface,controlcellsareexposedto0,3%(w/v)azidefor10minpriortotheadditionofcoatedbeads.Thistreatmentcompromisesmicroglialenergeticprocessesandfewbeadswereinternalizedasobservedbyfluorescentmicroscopy.Meanfluorescenceofazide-treatedmicrogliawasusedasthenegativecontrolandwassubtractedfromvaluesobtainedinexperimentalsamples.
2，Forexperimentsusing6well-plates,15μlbeadsstockin1mlculturemediumisappliedtoeachwell.Votexthebeadsstockwellandtakeout105μlandaddinto7mlculturemedium.Bathsonificatefor10minatRTindarkness.Thisisbeadsworkingsolution.
Forexperimentsusing12well-plates,6μlbeadsstockin0.4mlculturemediumisappliedtoeachwell.
3，WasheachwelltwicewithPBSandreplacewithbeadsworkingsolution,1ml/wellfor6-wellplate,0.4ml/wellfor12well-plate.Incubateinthedarkat37℃for80-120min.
4，Removebeadsworkingsolutionandwash3timeswithPBStoremoveexcessbeads.
5，LiftthecellsbyscrappingortrypsinizationandwashthecellswishPBS.
6，StainwithPI(4ug/mlfinalconcentration)andrunforFACS.
【 资源】爱贝芙(PMMA微球填充剂)并发症治疗经验转 修复重建和...123
lost102021-07-28
原文：ClinicalExperiencewithPolymethylmethacrylateMicrosphereFillerComplications---见3楼附件Aesthetic......
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