*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
ff
用户
扩增目标基因，纯化后，用分光光度计，定浓度后做为标准品。最好是将此目标基因接入TA克隆，转导入大肠杆菌后扩增，抽质粒，可达1X10十二次方，再以每10倍稀释后作为标准品，一般从1X10八次方开始稀释。标准品一般选六个点，起跳的Ct值最好在20-30之间。另外，标准品及样品要同时重复做2-3管，标准曲线的R值在0.98以上，每10倍稀释的标准品Ct值一般相差3.3左右。
已帮助
0人
0人
liumeng
用户我现在在做，两个系统，sybrgreen和taqman。我是用质粒DNA做标准曲线，（测OD，计算copy数，按指数级稀释，从10的0次方到10的5次方，测ct，每次每个样本做两份，比较ct值，去掉可疑数据。这样做大概9次，作出曲线）。以后的样本测出的ct值上标准曲线，得出copy数。我的感觉SYBRGREEN好用，但是不是特异性的。Taqprobe虽然特异，但是比较麻烦。做标准曲线最好用质粒DNA，而不用PCR产物。还有就是PCR的program，我用的SYBRGREEN是95度15分，94度15秒、60度30秒、72度30秒、40个循环。我试过很多基因，用这个程序结果都很好。
已帮助
0人
0人
ff
用户扩增目标基因，纯化后，用分光光度计，定浓度后做为标准品。最好是将此目标基因接入TA克隆，转导入大肠杆菌后扩增，抽质粒，可达1X10十二次方，再以每10倍稀释后作为标准品，一般从1X10八次方开始稀释。标准品一般选六个点，起跳的Ct值最好在20-30之间。另外，标准品及样品要同时重复做2-3管，标准曲线的R值在0.98以上，每10倍稀释的标准品Ct值一般相差3.3左右。
▍
相关分类
▍
相关文章
【板绘】人物练习_ (゜゜)つロ 干杯~bilibili
守望先锋联赛第二赛季第二阶段前瞻
实时荧光定量PCR技术
Dye Filling to Stain Amphid and Phasmid Neurons线虫实验生物在线...
健康所乐卫东研究组发现组蛋白去乙酰化对神经前体分化的重要作用
RhodaminePhalloidin/Calcofluor Staining 实验方法
成骨相关基因方向的医学|核心|好投期刊有哪些_成骨相关基因方向的...
chisso智索滤芯chisso智索滤芯批发、促销价格、产地货源
BS3交联剂（50 mg）| bissulfosuccinimidyl suberate; BS3; sulfoDSS; ...
EZ Biosystems公司实验试剂EZ Biosystems正品
检测转基因大豆品系MON87705的PCR引物组合及应用
LacZ Cell Staining and βgalactosidase Embryo Staining 实验...
▍
相关问答
