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| Description: | Positive Control for EF8005-1 ELISA Kit |
| Type: | Positive Controls |
| Catalog Number: | CEF80051 |
| Species: | Human |
| Format: | Control |
| Size: | Vial |
| Presentation: | Lyophilized |
| Storage: | 2-8C before reconstitution and -20C after reconstitution |
| Research Area: | Glomerulonephritis |
| Entrez Gene: | 3426 |
| Omim: | 217030 |
| UniProt: | P05156 |
| Unigene: | Hs.312485 |
| Synonyms: | Complement Factor, C3B/C4B Inactivator, CFI, IF, AHUS3, ARMD13, C3b INA, C3b Inactivator, C3BINA, CFAI, Complement Control Protein Factor I, Complement Factor I Heavy Chain, Complement Factor I Light Chain, F1, Factor I, FI, I Factor, IF, OTTHUMP00000219728, OTTHUMP00000221928, KAF, Konglutinogen Activating Factor |
| Note: | This product can only be purchased with ELISA kits as a component or control. |
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2021-08-16
概述及注意事项：细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术，其来源先于组织切片技术，目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛，如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞，以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞 查看更多
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2021-08-31
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2021-08-23
Fixation and permeabilization protocol 5/30/91 Mike FinneyThis protocol works for all stages except dauers (which won"t open) andhypoclorite-treated eggs (whic 查看更多
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2021-08-25
Double dye filling (using DiO and di-4 ANEPPS)(Krista Williams) Dye Filling Label 15 ml centrifuge (c/f) tubes with strain name. Squirt ~1-2 ml M9 onto plate w 查看更多
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2021-09-17
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2021-08-22
EM Fixation of EmbryosAdapted following advice from Andy Fire and Jim Priess1. Mount embryos on slides as if for DIC, except agar has fixative. Agarose Fixativ 查看更多
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2021-09-14
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2021-09-15
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2021-08-27
DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4",6"-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw 查看更多
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2021-09-05
1. Obtain the last 2mm of tail and place directly into 200ul 1X PCR Bufferwith Nonionic Detergents (PBND) in a 1.5ml microfuge tube. (Tails can bestored at fro 查看更多
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2021-09-09
Exalpha Biologicals produces and sells products for Life Science Research, including monoclonal and polyclonal antibodies, for use in immunohistochemistry, wes 查看更多
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2021-08-21
一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中，并继续生长、增值。因此，由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多，异倍性，有结构畸变，常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l．新鲜胸腹水20—40毫升， 查看更多
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荧光定量数据如何处理 分子生物 PCR相关 论坛学术...123
soundname2021-08-16
请问荧光PCR获得的数据如何处理成扩增曲线，还有标准曲线怎么做啊？有没有什么资料可参考？
【求助】qPCR碰到的几个问题(带图表) 经验共享 分析测试百科123
此时彼岸2021-08-12
请教大家问题：我做的QPCR扩增同一个模板，结果熔融温度分别是74.45，74.17，75.71，75.09，75.21，73.93等，多数在74-75之间，73左右的就一个数值。原来做过用相同的模板扩增，熔融温度是》74《75之间的数值，熔融峰为单峰，且确定是目的基因，不是引物二聚体。并且，相同的标准品时隔一段时间（-80度保存），不同时间做PCR，结果CT值差别较大。有以下的疑问想和大家一起讨论：
1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物？熔融温度为56度的是不是没有扩增产物？
2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是荧光染料降解?我用的是试剂盒中的扩增酶，还没用几次。
3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解？
4.另外，我原来做CDNA梯度稀释做的挺好，可是这个直接是RNA为标准品，我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定，有的时候好，有的时候不好。请假大家有没有好的建议？
附件中有扩增曲线和熔融曲线，请大家帮忙分析，谢过了！
新建MicrosoftOfficeWord文档.docx(46.18k)
1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物？熔融温度为56度的是不是没有扩增产物？
2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是荧光染料降解?我用的是试剂盒中的扩增酶，还没用几次。
3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解？
4.另外，我原来做CDNA梯度稀释做的挺好，可是这个直接是RNA为标准品，我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定，有的时候好，有的时候不好。请假大家有没有好的建议？
附件中有扩增曲线和熔融曲线，请大家帮忙分析，谢过了！
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常用荧光染料及应用领域 123
zishuyu2018-01-17
还可以标记细胞内的某些蛋白吧
怎么判断荧光染料是否还有效123
冉芳1232021-07-21
一般情况，不管荧光染料还是其他染料，只要不是活性染料和还原染料，基本上都不存在失效问题。
你的荧光染料具体是哪一种？你可以通过染色试验来决定是否有效啊？一般荧光染料染色后，都会呈现明亮的颜色，比一般同样颜色要亮的多。只要能染上、只要有亮度，就是没失效。
你的荧光染料具体是哪一种？你可以通过染色试验来决定是否有效啊？一般荧光染料染色后，都会呈现明亮的颜色，比一般同样颜色要亮的多。只要能染上、只要有亮度，就是没失效。
【求助】关于荧光定量RQPCR中定量方法的两个求助问题!123
zhoubinbj2021-07-25
小弟就要进行荧光定量试验，所以在园子里面看了很多的资料？，真是似懂非懂，出现了很多的疑问，所以恳请各位指教一下，有些可能比较弱智，请各位不要见笑！非常感谢！
1.我知道一般缺省域值是3－15个循环荧光强度的标准方差的10倍，但是为什么公式是10×SD（6－15）？那仪器的本底荧光强度是前15个循环的荧光强度就算是baseline，那么仪器中用域值分析和用baseline分析有什么不同？域值能否改动？改动后的结果对于后续的分析有什么影响？一般什么时候需要改动？
2.所谓读板温度是不是就是每一部反应后检测荧光强度的步骤？是不是可以任意设定在某一步骤？譬如变性，退火，延伸甚至自己设定一个温度？
3.在做标准曲线的时候，对于标准品的要求是不是一般要求就是待扩增的目的片断，便于以后的扩增效率可比性？是不是这个也是购买的绝对标准品进行曲线作图的缺陷之一，虽然其绝对的定量已知？
4.在相对定量时候，如果内参和目的基因在同一管中进行扩增就是内参照法?不同管就是外参照法？是不是不太赞成内参照法，因为无法预知目的基因起始浓度，从而可能导致内参扩增效率远远大于目的基因而无法使用2-△△CT方法分析？
5.融解曲线的导出是不是在反应结束以后进行？融解曲线出现主峰异常增宽是什么原因导致？我还是不明白探针法是如何得出融解曲线的，主要是原理，因为染料法就是升高温度双链解链染料脱离？
6.如果用荧光染料方法进行试验，出现引物二具体很多，那么在NTC和加入模板的溶解曲线中dimer的峰值和模板中的峰值是否重叠？
敬请指教！非常感谢！
1.我知道一般缺省域值是3－15个循环荧光强度的标准方差的10倍，但是为什么公式是10×SD（6－15）？那仪器的本底荧光强度是前15个循环的荧光强度就算是baseline，那么仪器中用域值分析和用baseline分析有什么不同？域值能否改动？改动后的结果对于后续的分析有什么影响？一般什么时候需要改动？
2.所谓读板温度是不是就是每一部反应后检测荧光强度的步骤？是不是可以任意设定在某一步骤？譬如变性，退火，延伸甚至自己设定一个温度？
3.在做标准曲线的时候，对于标准品的要求是不是一般要求就是待扩增的目的片断，便于以后的扩增效率可比性？是不是这个也是购买的绝对标准品进行曲线作图的缺陷之一，虽然其绝对的定量已知？
4.在相对定量时候，如果内参和目的基因在同一管中进行扩增就是内参照法?不同管就是外参照法？是不是不太赞成内参照法，因为无法预知目的基因起始浓度，从而可能导致内参扩增效率远远大于目的基因而无法使用2-△△CT方法分析？
5.融解曲线的导出是不是在反应结束以后进行？融解曲线出现主峰异常增宽是什么原因导致？我还是不明白探针法是如何得出融解曲线的，主要是原理，因为染料法就是升高温度双链解链染料脱离？
6.如果用荧光染料方法进行试验，出现引物二具体很多，那么在NTC和加入模板的溶解曲线中dimer的峰值和模板中的峰值是否重叠？
敬请指教！非常感谢！
荧光染料按照化学架构分属于什么染料123
jffrain742021-08-14
荧光染料按照化学架构分属于什么染料
这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
常用抗体标记荧光染料的选择 实验方法123
尼玛君ekN2021-07-30
溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合，进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加，作为补偿，将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后，超螺旋度大为增加， 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限，可继续结合更多溴化乙锭，直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别，线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来，氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时，为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁，但其中最好的方法，也应是聚乙二醇分级沉淀法。
从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多，其分离的依据可利用分子大小不同，碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好，既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA，由于DNA片段较大易于损伤断裂，因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA，且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒，用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。
质粒DNA纯化的试验步骤：
测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头（或与其相当的转头）以8000rpm离心5min， 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h（VTi65 转头）、 以45 000rpm离心48h（Ti50转头）、以60 000rpm离心24h（Ti65转头）或者以60 000rpm离心24h（Ti70.1转头）。普通光照下，在梯中心可见两条DNA区带， 上部区带材料通常较少，由线状的细菌（染色体）DNA和带切口的环状质粒DNA组成：下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物，位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl－溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在，将扩展为一条宽带，并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷，可收集整个DNA区高产水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷，可收集整个DNA区带，用CsCl溶液（ρ=1.58g/ml）将体积调到15ml，在两个离心管中再度离心，使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入，为尽量减少污染的机会，首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带（杂色体DNA）：用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂，然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头（其斜面向上）插入管中，以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内，用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头（18号），将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多，其分离的依据可利用分子大小不同，碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好，既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA，由于DNA片段较大易于损伤断裂，因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA，且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒，用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。
质粒DNA纯化的试验步骤：
测量DNA溶液的体积，按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液（10mg/ml溶于水）；立即将溴化乙锭溶液（漂浮在表层）与DNA－氯化铯溶液混匀， 溶液的终密度应为1.55g/ml（溶液的折射率为1.3860）溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内（如用锡箔完全包裹的瓶子），于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头（或与其相当的转头）以8000rpm离心5min， 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h（VTi65 转头）、 以45 000rpm离心48h（Ti50转头）、以60 000rpm离心24h（Ti65转头）或者以60 000rpm离心24h（Ti70.1转头）。普通光照下，在梯中心可见两条DNA区带， 上部区带材料通常较少，由线状的细菌（染色体）DNA和带切口的环状质粒DNA组成：下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物，位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl－溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在，将扩展为一条宽带，并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷，可收集整个DNA区高产水平时才会出现，只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷，可收集整个DNA区带，用CsCl溶液（ρ=1.58g/ml）将体积调到15ml，在两个离心管中再度离心，使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入，为尽量减少污染的机会，首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带（杂色体DNA）：用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂，然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头（其斜面向上）插入管中，以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内，用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头（18号），将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
荧光定量 PCR 方法:探针法 VS 染料法?123
血刺续殇炏x2018-01-17
理想情况下毫无疑问应该是PCR扩增的指数期。
【求助】甲基化荧光定量pcr PCR技术讨论版123
莫莫惜2021-08-13
蛋白荧光染料大比拼 123
hency2018-01-17
GFP、EGFP、RFP，最常用的就是这三种自发荧光的蛋白了，还有FLuc，RLuc，这是两种需要激发的荧光蛋白
LS45/55 荧光/磷光/发光分光光度计使用说明书123
yunzhongying2021-07-29
请教各位高手，荧光分光光度法测物质的含量是否必须绘制标准曲线？如果不做标准曲线，能不能用Beer定律一类的公式来计算物质的相对含量？请做过荧光分光光度法的高手指点一下，如果有这方面的操作说明，尤其是如何计算待检物质含量的例子，能否说一下，先谢谢了。邮箱wzhnanhua@eyou.com
[求助]实时定量实验设计问题。急! PCR技术讨论版论坛123
zjl37682021-08-10
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