求助：荧光分光光度计操作说明（LS 45）
2021-07-29
问题描述：
请教各位高手，荧光分光光度法测物质的含量是否必须绘制标准曲线？如果不做标准曲线，能不能用Beer定律一类的公式来计算物质的相对含量？请做过荧光分光光度法的高手指点一下，如果有这方面的操作说明，尤其是如何计算待检物质含量的例子，能否说一下，先谢谢了。邮箱wzhnanhua@eyou.com
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zzyywwllpp
用户
我认为最好是用标准曲线法.方法很简单的,配制五个以上的标准点,每个标准品的浓度呈梯度变化,分别测量其荧光强度值即可.如果光度计不能直接绘制成标准曲线,可以用其他绘图软件绘出.我个人认为不能用比尔定律,比尔定律是指不同浓度的样品对光的吸收不同,而荧光分光光度计是指不同浓度的样品受到光的激发后其所发出的荧光强度不同,浓度越高荧光强度越强,所以用荧光分光光度计测量的样品必须本身可被激发出荧光或被荧光染料染色.另外并不是所有物质的测量都需标准曲线的,比如用荧光分光光度计测活细胞内钙离子就需用特殊方法和软件.
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yunzhongying
用户多谢了，zzyywwllpp我测的是细胞内蛋白激酶活性的变化，因为用的活性检测试剂盒里没有提供用哪种试剂作标准品座标准曲线，所以很为难。看来还是需要到生产商那里去咨询一下。
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