
The PreciPette™ is the next generation of highprecision liquid handling instruments from BioPioneer. The PreciPettefeatures improved actuation forces and anearly 20% reduction in overall weight. Every aspect of accuracy, reliabilityand user comfort has been carefully reviewed in designing these high precisionpipettes.The result is an advanced pipette that exhibits superioraccuracy and ergonomics and is comfortable to use, even during prolonged andrepetitive pipetting.
• Adjustable with Roto-Lock™ • Light weight with reduced forces
• Full volumerange (0.1µL-10mL)
• Superioraccuracy and reproducibility
• Outstanding user comfort
ebiomall.com






>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
检测荧光信号的步骤有误:一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性。
模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。
模板降解:避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。
2.Ct值出现过晚(Ct>38)
扩增效率低:反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。
PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。
3.标准曲线线性关系不佳
加样存在误差:使得标准品不呈梯度。
标准品出现降解:应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。
引物或探针不佳:重新设计更好的引物和探针。
模板中存在抑制物,或模板浓度过高
4.负对照有信号
引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
引物浓度不佳:重庆新桥医院网上预约挂号www.cqxqyy.net适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
5.溶解曲线不止一个主峰
引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
6.扩增效率低
反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。
7.同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?
判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性
如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。
8.扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?
参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)
模板的浓度太高或者降解
荧光染料的降解

