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实验流程：
1.设计合成3条shRNA质粒
2.利用脂质体转染目的细胞（3条shRNA质粒和一条空载体（NC））
3.检测干扰效率，如RealtimePCR或者WesternBlot等
4.将筛选出的干扰效率最好的shRNA用于后续实验
筛选出的干扰片段可亚克隆到shRNA质粒、腺病毒质粒、慢病毒质粒等载体上，用于后续质粒转染，腺病毒包装或慢病毒包装等
服务内容
1、RNAi是转录后水平的基因沉默机制；
2、RNAi具有很高的特异性，只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA；
3、RNAi抑制基因表达具有很高的效率，表型可以达到缺失突变体表型的程度，而且相对很少量的dsRNA分子（数量远远少于内源mRNA的数量）就能完全抑制相应基因的表达，是以催化放大的方式进行的；
4、RNAi抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限，在不同细胞间长距离传递和维持信号甚至传播至整个有机体以及可遗传等特点；
5、dsRNA不得短于21个碱基，并且长链dsRNA也在细胞内被Dicer酶切割为21bp左右的siRNA，并由siRNA来介导mRNA切割。而且大于30bp的dsRNA不能在哺乳动物中诱导特异的RNA干扰，而是细胞非特异性和全面的基因表达受抑和凋亡；
6、ATP依赖性：在去除ATP的样品中RNA干扰现象降低或消失显示RNA干扰是一个ATP依赖的过程。可能是Dicer和RISC的酶切反应必须由ATP提供能量。
价格周期
咨询
客户须知
客户提供
1、目的基因序列或登录号
2、需转染的细胞或代购
3、目的蛋白一抗（WB验证）
服务承诺
终产品
1、构建好的shRNA质粒及其穿刺保存菌；
2、电子版的测序结果及彩图；
3、干扰效率检测实验报告。
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发布于 ： 2018-05-26
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