
【求助】RNA干扰试验结果不降反升?
2021-07-25
问题描述:
本人正在进行某一基因的RNA干扰试验,今天PCR显示干扰后结果不降反升,不知道问题出在什么地方,小生刚入此道,希望各位多多指教!多谢!
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bio_vector


奈何楼楼主 本人正在进行某一基因的RNA干扰试验,今天PCR显示干扰后结果不降反升,不知道问题出在什么地方,小生刚入此道,希望各位多多指教!多谢!可能的问题太多了,最关键的一环在与试验设计,siRNA设计与合成。细胞状态,转染剂量和条件等等。阳性对照结果直接说明你的效果,阴性对照辅助分析。你的说明太简单。

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tiger22


看过一篇文献,提到过RNAa(RNAactivate),就是不降反升的例子,好像是PNAS的一篇文章,但是作用靶点好象是在非编码区。

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yy30


1995年,康乃尔大学的SuGuo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C.elegans)的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本想利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA以期观察到基因表达的增强,但得到的结果是二者都同样地切断了par-1基因的表达途径。这是与传统上对反义RNA技术的解释正好相反。该研究小组一直未能给这个意外以合理解释。有没有可能siRNA设计有问题,没有起到干扰效果,反而正好达到了增强基因表达的作用呢?我自己瞎猜的:)
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