【求助】膜蛋白的coIP问题

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【求助】膜蛋白的coIP问题

2021-07-25

问题描述：

我需要做一个人类膜蛋白的co-ip，现在有三种抗体可以选择，请问大侠我选择哪种比较好：
1.用这个人类膜蛋白c端末短肽（14个残基，478-492）偶联KLH生产的兔多克隆抗体（abcam公司产品）
2.用大鼠的同源膜蛋白c端（具体哪一段不清楚）生产的兔多克隆抗体（abcam公司产品），我比对过人和大鼠的这个膜蛋白，同源性很高，c端完全一样（这里也很困惑公司为什么说是大鼠来源的）
3.用这个人类膜蛋白两个跨膜区之间的一个loop环序列（42个残基，218-260）生产的兔多克隆抗体（santa公司产品）
这三个抗体理论上来讲哪个更好些呢？请有经验的大虾给予指点！
另：我听说abcam的抗体比santa好，是吗？
在线等，急！

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小新翼翼

用户

这个膜蛋白的基本结构是十二个跨膜区，N端，C端，一个大的loop环，这三个胞内结构域。不知道一般情况下膜蛋白哪个区域更有可能是与其他蛋白相互作用的区域呢？我是准备用这个抗体来co-ip天然状态下（细胞或组织）与之相互作用的蛋白。我在想，如果抗体能很好结合该膜蛋白，那么它与其他蛋白的结合位点肯定与抗体的结合位点不一样。这样的话选择抗体是不是应该尽量避开这个膜蛋白可能与其他蛋白相互作用的位点。比如c端可能与其他蛋白相互作用，那我是不是选择用loop环生产的多抗会更好（即选择3）？想法可能有点好笑，初次接触co-ip，望大虾不吝赐教！急！

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小新翼翼

用户

怎么没人回啊？真的很着急啊，帮帮我吧，先谢谢了！

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续写幸福-

用户

请问做膜蛋白的co-IP需要交联剂吗？

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