Product Specifications:
Item# 1131-B: Biotin Murine Anti-gp120 HIV-1 YU2 mAb IgG
Mass/vial: Approximately 50µg IgG
Volume: 50µl
Diluent: PBS
Stabilizer: 2.5% BSA
Preservative: 0.02% Azide
Storage: 4°C
Physical State: Liquid
B/P Ratio: 10 - 20
Stability: At least 6 months at 4°C
Minimum Dilution: 1 : 5000
Applications: ELISA, Westerns, FACS, Immunohistopcytology.
Description: Biotin conjugated Murine anti-gp120 (HIV-1) YU2 M Tropic mAb
Purification: Highly purified mAb IgG (>95% pure) was used for Biotin conjugation and the conjugate purified by gel exclusion chromatography.
Specificity: This biotin conjugated mAb binds to native and recombinant HIV-1 gp120 YU2 M Tropic and HIV-1 MN ( Dual Tropic ), but not to HIV-1 ADA M Tropic, in Dot Blot assays, ELISA and Western ELISA.
Biological Activity: None
Application and Instructions for use:
Recommended dilutions for use are approximate values. A dose dependent response assay should be performed to determine the optimal concentration for use in specific applications. ELISA may be performed in 1 : 5000 dilution range depending on the concentration of the test ligand and specificity and sensitivity of the secondary reagents. Western ELISA may be performed in 10-100pg gp120 range with 0.1-0.5µg/ml conjugate.
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范可尼贫血(FA)是骨髓衰竭(BMF)的最常见遗传性原因,现已鉴定 18 个 FA 基因,其中 FANCA、FANCC、FANCG 和 FANCD2 最常见。FA 在儿童早期出现进行性 BMF,此时通过染色体断裂试验通常可以诊断。FA 患者的造血干细胞基因终生处于不断变化中,可发展为骨髓增生异常综合征(MDS)或急性髓系白血病(AML),突出特征是染色体不平衡易位,导致拷贝数异常。此外 FA 患者发生实体瘤
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Like ubiquitin, SUMO (small ubiquitin-related modifier) proteins are small protein tags that are conjugated to proteins to modify their function. The ubiquiti
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北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的双功能能交联剂供应信息,浏览与双功能能交联剂相关的产品或在搜索更多与双功能能交联剂相关的内容。
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北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的蛋白交联剂供应信息,浏览与蛋白交联剂相关的产品或在搜索更多与蛋白交联剂相关的内容。
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Cell adhesion is a fundamental feature of multicellular organisms including their defense mechanisms. In the later case in mammals, leukocytes play central rol
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一、ChIP实验的技术基因表达的控制从根本上来说是蛋白-DNA的相互作用。这些相互作用可通过生化分析轻松地弄清,如凝胶阻滞分析。但如果研究人员想知道基因组DNA的特定部分是否参与,通常会选择染色质免疫沉淀技术(ChIP)。ChIP是在全基因组范围内识别DNA与蛋白质相互作用的标准方法,最初用于组蛋白修饰研究,后来也用于转录因子。整个实验涉及到一系列蛋白质组学和
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多药耐药 (multidrug resistance,MDR),是指由一种药物诱发,同时对其他孙和作用机理不同的多种抗肿瘤药物具有交叉耐药性。目前认为 MDR 是肿瘤细胞对化疗药物毒性损伤的最重要的自我保护防御机制,是肿瘤细胞耐药的常见形式,也是白血病化疗失败和复发的主要原因而成为当今肿瘤治疗的一大难题,据美国癌症协会估计,90% 以上肿瘤患者死于不同程度的耐药。据此逆转
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G-protein coupled receptors (GPCRs) are one of the largest gene families of signaling proteins. Residing in the plasma membrane with seven transmembrane domain
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北京北方同正生物技术发展有限公司在发布的双功能交联剂(三)供应信息,浏览与双功能交联剂(三)相关的产品或在搜索更多与双功能交联剂(三)相关的内容。
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为满足市场需要,结合中国本土市场的环境和发展,通过筛选,我公司已经和Avanti、cordenpharma、Matreya、nanocs、creative、laysan、Polypure、iris、Lu...
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一、电泳分类 根据缓冲体系和凝胶孔径的不同,可以分为连续电泳和不连续电泳;根据样品的处理方式的不同,又可以分为变性SDS-PAGE及活性SDS-PAGE电泳,以及带有烷基化作用的还原SDS电泳;根据电泳的形式,又可以分为圆盘电泳,水平电泳,垂直电泳及平板电泳。 目前实验室常用的为不连续的变性的还原SDS-PAGE垂直电泳。 二、垂直电泳装备 三、不连续电泳 用浓缩胶(上
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蛋白质的交联作用 :在一定条件下,蛋白质分子问可以通过其侧链上的特定基团联结在一起形成更大的分子从而使蛋白质变性,即分子交联。在氧化剂(如空气中的氧)存在的条件下,蛋白质分子可发生硫氢基与硫氢基的氧化型交联从而生成二硫键。蛋白质中的半胱氨酸易于发生这种二硫键型交联,使食物的机械强度增加,例如面粉在加水揉制成面团的过程中就发生了这样的变化。拒绝采集!在强热下,蛋白质分子可通过氨基酸残基上的羟基、氨基、羧基之间的脱水缩台而交联,而这种交联多数情况下不利于我们对食品蛋白质的消化利用。在碱性条件下,蛋白质中的半胱氨酸(胱氨酸)或羟基氨酸可发生消去反厦脱去H。s、HzO等,产生脱氢丙氨酸残基。该残基还可与赖氨酸反应.生成对人体不利的赖丙氨酸,使可利用的赖氨酸含量降低-严重降低蛋白质的营养价值。
蛋白质的交联作用 :在一定条件下,蛋白质分子问可以通过其侧链上的特定基团联结在一起形成更大的分子从而使蛋白质变性,即分子交联。在氧化剂(如空气中的氧)存在的条件下,蛋白质分子可发生硫氢基与硫氢基的氧化型交联从而生成二硫键。蛋白质中的半胱氨酸易于发生这种二硫键型交联,使食物的机械强度增加,例如面粉在加水揉制成面团的过程中就发生了这样的变化。拒绝采集!在强热下,蛋白质分子可通过氨基酸残基上的羟基、氨基、羧基之间的脱水缩台而交联,而这种交联多数情况下不利于我们对食品蛋白质的消化利用。在碱性条件下,蛋白质中的半胱氨酸(胱氨酸)或羟基氨酸可发生消去反厦脱去H。s、HzO等,产生脱氢丙氨酸残基。该残基还可与赖氨酸反应.生成对人体不利的赖丙氨酸,使可利用的赖氨酸含量降低-严重降低蛋白质的营养价值。
这个课题怎么做?
要用几种不同材料来做这个实验
还要自己设计试验方法步骤所用仪器用品!
实在很是头疼谢谢!
Chemical cross-linking化学交联
指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。
一、多肽与载体蛋白交联
对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
二、抗体的运用
由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
三、抗原和辨认区域
大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
四、进行KLH交联的化学办法
我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
七、抗体的产值
抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。
1.凝胶阻滞实验:在凝胶电泳中,由于电场的作用,裸露的DNA分子向正电极移动距离的大小是同其分子量的对数成反比.如果某种DNA分子结合上一种特殊的蛋白质,那么由于分子量的加大它在凝胶中的迁移作用便会受到阻滞,于是朝正极移动的距离也就相应的缩短,因而在凝胶中出现滞后的条带,这就是凝胶阻滞实验的基本原理. 2.DNaseI足迹试验(DNaseI footFIrinting assay) DNaseI足迹试验是一种测定DNA结合蛋白在DNA上的准确结合位点的技术.当DNA分子中的某一区段同特异的转录因子结合之后便可以得到保护而免受DNaseI 酶的切割作用,而不会产生出相应的切割分子,结果在凝胶电泳放射性自显影图片上便出现了一个空白区,俗称为“足迹”. 3.甲基化干扰实验(Methylation interference assay)是根据DMS(硫酸二甲酯)能够使DNA分子中裸露的鸟嘌呤(G)残基甲基化,而六氢吡啶又会对甲基化的G残基作特异性的化学切割这一原理设计的另一种研究蛋白质同DNA相互作用的实验方法. 4.Pull-down实验:拉下实验又叫做蛋白质体外结合实验(binding assay in vitro),是一种在试管中检测蛋白质之间相互作用的方法.其基本原理是将某种小肽(例如生物素、6-His标签以及谷胱甘肽转移酶等)的编码基因与诱饵蛋白的编码基因重组,表达为融合蛋白.分离纯化融合蛋白并与磁珠结合,使之固相化之后,再与表达目的细胞提取物混合保温适当时间,例如在4℃下保温过夜,使目标蛋白同已经固定在磁珠表面的融合蛋白中的诱饵蛋白充分的结合.然后回收磁珠,pull出目的片段 5.生物芯片技术是基于生物大分子间相互作用的大规模并行分析方法,使得生命科学研究中所涉及的样品反应、检测、分析等过程得以连续化、集成化和微型化,现已成为当今生命科学研究领域发展最快的技术之一 6.染色体沉淀:用细菌基因组与目的蛋白孵育,然后用甲醛交联,随机断裂,然后WB分析. 7.酵母单杂交: 酵母单杂交(Yeast one-hybrid)是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报道基因表达的原理,克隆与靶元件特异结合的转录因子基因(cDNA)的有效方法.其理论基础是:许多真核生物的转录激活子由物理和功能上独立的DNA结合区(DNA-binding domain BD)和转录激活区(Activation domain AD)组成,因此可构建各种基因与AD的融合表达载体,在酵母中表达为融合蛋白时,根据报道基因的表达情况,便能筛选出与靶元件有特异结合区域的蛋白.理论上,在单杂交检测中,任何靶元件都可被用于筛选一种与之有特异结合区域的蛋白.
比如说二者都与蛋白的胺基反应,这是它们的共同点。那么前者是否可以与蛋白的巯基反应而后者不能呢?
明胶作为胶粘剂,其对纤维的粘合并不亚于合成树脂,其优越性在于适用期长,但其耐水性较差。为提高其耐水性,通常在明胶粘合剂中加多聚甲醛硬化交联剂,可降低明胶的水溶性,在没有改变胶原的生物降解的前提下,使得明胶分子链间形成交联键,使粘度提高,加强了凝固的结构,提高了明胶机械性能。明胶作为枯合剂,可用于砂布、砂纸的制造,此外也可用于生产胶带纸中。
明胶与干酪素都是蛋白质类,其分子结构同属氨基酸,但前者比后者价格便宜很多,而且在我国的产盆很大,因此具有代替干酪素做涂料胶粘剂的可能性。
紫外交联能证明蛋白质相互作用
在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题.
重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因.现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性.为此需要:
a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件;
b、分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子;
这些问题的研究都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用.
研究DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括:
a、凝胶阻滞实验; b、DNase 1 足迹实验;
c、甲基化干扰实验; d、体内足迹实验; f、拉下实验.