

Lumiprobe,LLC.是美国一家高品质生物技术公司,专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。主要产品有:活性染料(ReactiveDye)和SYBRGreenI染料,定制合成荧光双标记引物。产品主要应用:点击化学(ClickChemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
Lumiprobe产品包括:羧酸类染料、羰基类染料,标记分子氨基活性染料,标记分子巯基活性染料,动物活体成像用染料,蛋白质、多肽、核酸等生物分子标记染料、点击化学等。渠道正规(市场上部分是分装,质量不能保证),质量保证,价格极具竞争力,而且我们的货期仅需要5-7工作日,不需要像其他家攒单导致货期3-4周。 Thisisakitforthelabelingofantibodiesandproteinsof similarsizewithsulfo-Cyanine5fluorophore.ThedyeisattachedbyNHSesterchemistry,andthentheexcessofthefluorophoreisremovedbymeansofgelfiltrationusingenclosedspincolumns.Theprotocolrequiresonlyaround40minutesoftime,andprovidesdesaltedantibodyinPBSbuffercontainingoptimalnumberoffluorophoresperAb.Thekitcontainscomponentsfor10reactions,upto100ugofantibodyperreaction.
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甲苯二异氰酸酯(TDI)有两种异构体:2,4-甲苯二异氰酸酯和2,6-甲苯二异氰酸酯。甲苯二异氰酸酯是水白色或淡黄色液体,具有强烈的刺激性气味,在人体中具有积聚性和潜伏性,对皮肤、眼睛和呼吸道有强烈刺激作用,吸入高浓度的甲苯二异氰酸酯蒸气会引起支气管炎、支气管肺炎和肺水肿;液体与皮肤接触可引起皮炎。液体与眼睛接触可引起严重刺激作用,如果不加以治疗,可能导致永久性损伤。长期接触甲苯二异氰酸酯可引起慢性支气管炎。对甲苯二异氰酸酯过敏者,可能引起气喘、伴气喘、呼吸困难和咳嗽。
与乙醚、二甘醇、丙酮、四氯化碳、苯、氯苯、煤油、橄榄油混溶。能与含羟基的化合物、水、胺和具有活泼氢原子的化合物反应生成氨基甲酸酯、脲、氨基脲等。甲苯用混酸硝化得到2,4-和2,6-二硝基甲苯,然后在镍催化剂存在下加氢还原得到2,4-和2,6-二氨基甲苯,再在氯苯溶液中与光气反应制得。主要作为聚氨酯树脂的生产原料,用于生产聚氯酯泡抹塑料、涂料、橡胶、粘合剂、密封剂等。也可用作橡胶硫化剂、蛋白质交联剂等。包括泡沫塑料;聚氨酯涂料;聚氨酯橡胶;聚酰亚胺纤维和胶粘剂等也有一些应用。有2,4-甲苯二异氰酸酯和2,6-甲苯二异氰酸酯(TDI)两种异构体。按两种异构体含量的不同,工业上有三种规格的产品:(1)TDI-65含2,4-TDI65%,2,6-TDI35%;(2)TDI-80含2,4-TDI80%,2,6-TDI20%,最为常见;(3)TDI-100含2,4-TDI100%。与水作用产生二氧化碳。易与含有活性氢原子的化合物作用。与二元醇作用而成线型聚氨基甲酸酯或聚氨酯树脂。
指在光、热、高能辐射、机械力、超声波和交联剂等作用下,大分子链间通过化学键联结起来,形成网状或体形结构高分子的过程。橡胶的硫化、不饱和树脂的交联、环氧树脂的熟化等都是化学交联的例子。通过化学交联可改善聚合物的性能。如聚乙烯的化学交联可提高其强度和耐热性,又如皮革的鞣制过程是利用其蛋白质分子与甲醛作用,生成交联桥,以至失去溶解性。
本人使用的Collagen是sigma公司的,TypeI,BovineCollagenSolution,浓度为6mg/ml,用浓度为1M的NaOH溶液进行中和。200微升Collagen用了30微升的NaOH溶液,在调PH过程中有絮状物质产生并有局部凝胶,然后将调好PH的Collagen放至细胞培养箱中进行培养,2个小时之后也没有凝胶。是NaOH溶液加多了还是没有搅拌均匀,现在还在摸索阶段,不知道具体该加多少NaOH,还有如何将溶液混合均匀是个问题。求大神指导
1.用这个人类膜蛋白c端末短肽(14个残基,478-492)偶联KLH生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品)
2.用大鼠的同源膜蛋白c端(具体哪一段不清楚)生产的兔多克隆抗体(abcam公司产品),我比对过人和大鼠的这个膜蛋白,同源性很高,c端完全一样(这里也很困惑公司为什么说是大鼠来源的)
3.用这个人类膜蛋白两个跨膜区之间的一个loop环序列(42个残基,218-260)生产的兔多克隆抗体(santa公司产品)
这三个抗体理论上来讲哪个更好些呢?请有经验的大虾给予指点!
另:我听说abcam的抗体比santa好,是吗?
在线等,急!
对在动物体内发生免疫反响而言,大多数多肽的分子量都太小。将多肽与载体蛋白如KLH等交联以后,不仅能添加抗原的巨细,也能增强免疫性。咱们能够提供与KLH和BSA两种蛋白的交联。大多数客户挑选与KLH交联,由于KLH的免疫性非常好,而且BSA在许多试验中作为Blocking试剂,由于动物体内既会发生对多肽的抗体也会发生对载体蛋白的抗体,这么会呈现假阳性。
二、抗体的运用
由于抗体与许多生物分子,以蛋白和多肽等尤为明显,有很强的联系才能,抗体在生物医学研讨中占据共同的主要位置,在对蛋白的特性、含量的测定、散布状况的分析和蛋白的确证等方面都需要用到抗体。例如:确诊试剂盒如早孕试剂盒等,蛋白microalloy、immunohistochemistry 和普通的ELISA试验等。由于抗体有对特定分子很强的联系才能的特点,用抗体进行体内医治成了许多尽力的方向。成功的典范包含Genetech的Herceptin,用于医治一类特殊的乳腺癌和IDEC药业公司的Ritaxan,用于特定类型的Non-Hodgkin`s Lymphomas B-细胞。
三、抗原和辨认区域
大多数状况下,antigen和immunogen两个字是能够交换运用的,它们的差别是很小的。他们是别离指一个分子与免疫系统之间的两种类型的相互作用。一个immunogen是指能使一个生物组织的免疫系统发生免疫反响的分子,而一个antigen是指能与这种免疫反响的产品联系的分子,所以immunogen一定是antigen,但antigen纷歧定是immunogen,咱们这儿通用antigen,特指能与免疫反响的产品—抗体联系的分子。 辨认区域(epitopes)是指一个抗原分子中一个与抗体直接联系的一段特定的序列,关于任何抗原(抗原蛋白),很有可能有多个抗体辨认区域,对出产抗体而言,易于抗体辨认的部位的辨认区域最为理想。
四、进行KLH交联的化学办法
我们用MBS活化KLH,这么能将载体蛋白(KLH)上面的自在-SH与多肽末端的Cys的侧链-SH连接起来,这种办法直接,特异性高,而且安稳,一般挑选对免疫不主要的一端进行交联。 EDC活化载体上的-COOH,将载体的-COOH和多肽的-NH2连接起来也是一种可行的办法。但咱们只主张在多肽序列中有多个Cys时采用该办法。如果肽链中含有多个-COOH或-NH2基因,不主张运用该办法,由于会构成多重点交联的状况,使多肽构造受影响。常用载体蛋白除KLH外,还有BSA,Ovalbumin等,构成KLH的优势是它不搅扰ELISA或Western Blot等试验。
五、对抗原多肽交联适宜的肽链长度
一般主张10-15个残基进行交联。肽链越长,抗体辨认的区域越多,但也就越多时机构成安稳的二级构造。就不再是天然的方式了。太短的肽一般是没有用的,除非有足够的理由,如与有关宗族蛋白或别的蛋白有序列同源性等。
六、KLH交联多肽溶液呈乳状的要素
KLH是一个很大的而且聚合的蛋白。由于它的构造和巨细,它在水中的溶解度是很有限的,因而是乳状,这并不影响它的免疫性,这种混浊的溶液能够直接免疫动物。
七、抗体的产值
抗体的产值取决于许多要素:辨认区域的挑选,多肽的合成,载体的交联,免疫的操作步骤和动物的生理系统等等,因而抗体的产值是不等的。5-25mg都归于正常规模。
甲苯二异氰酸酯(TDI)有两种异构体:2,4-甲苯二异氰酸酯和2,6-甲苯二异氰酸酯。甲苯二异氰酸酯是水白色或淡黄色液体,具有强烈的刺激性气味,在人体中具有积聚性和潜伏性,对皮肤、眼睛和呼吸道有强烈刺激作用,吸入高浓度的甲苯二异氰酸酯蒸气会引起支气管炎、支气管肺炎和肺水肿;液体与皮肤接触可引起皮炎。液体与眼睛接触可引起严重刺激作用,如果不加以治疗,可能导致永久性损伤。长期接触甲苯二异氰酸酯可引起慢性支气管炎。对甲苯二异氰酸酯过敏者,可能引起气喘、伴气喘、呼吸困难和咳嗽。
与乙醚、二甘醇、丙酮、四氯化碳、苯、氯苯、煤油、橄榄油混溶。能与含羟基的化合物、水、胺和具有活泼氢原子的化合物反应生成氨基甲酸酯、脲、氨基脲等。甲苯用混酸硝化得到2,4-和2,6-二硝基甲苯,然后在镍催化剂存在下加氢还原得到2,4-和2,6-二氨基甲苯,再在氯苯溶液中与光气反应制得。主要作为聚氨酯树脂的生产原料,用于生产聚氯酯泡抹塑料、涂料、橡胶、粘合剂、密封剂等。也可用作橡胶硫化剂、蛋白质交联剂等。包括泡沫塑料;聚氨酯涂料;聚氨酯橡胶;聚酰亚胺纤维和胶粘剂等也有一些应用。
聚丙烯酰胺凝胶有以下优点:
①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有
格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少带有离子的侧基,因而电渗作用比较小,不易和样品相互作用。
②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成
不同程度交链结构,其空隙度可在一个较广的范围内变化,可以根据要分离物质分子
的大小,选择合适的凝胶成分,使之既有适宜的空隙度,又有比较好的机械性质。一
般说来,含丙烯酰胺7-7.5%的凝胶,机械性能适用于分离分子量范围不1万至100万物
质,1万以下的蛋白质则采用含丙烯酰胺15-30%的凝胶,而分子量特别大的可采用含
丙烯酰胺4%的凝胶,大孔胶易碎,小孔胶则难从管中取出,因此当丙烯酰胺的浓度增 加时可以减少双含丙烯酰胺,以改进凝胶的机械性能。
③在一定浓度范围聚丙烯酰胺对热稳定。凝胶无色透明,易观察,可用检测仪直接测定。
④丙烯酰胺是比较纯的化合物,可以精制,减少污染。合成聚丙烯酰胺凝胶的原料是丙烯酰胺和甲撑双丙烯酰胺。丙烯酰胺称单体,甲撑双
丙烯酰胺称交联剂,在水溶液中,单体和交联剂通过自由基引发的聚合反应形成凝 胶。
在聚丙烯酰胺凝胶形成的反应过程中,需要有催化剂参加,催化剂包括引发剂和
另速剂两部分。引发剂在凝胶形成中提供始自由基,通过自由基的传递,使丙烯酰胺
成为自由基,发动聚合反应,加速剂则可加快引发剂放自由基的速度。常用的引发剂 和加速剂的配伍如下表:
聚合反应催化剂配伍
引 发 剂 加 速 剂
(NH4)2S2O8 TEMED
(NH4)2S2O8DMAPN
核 黄 素 TEMED
注:(NH4)2S2O8,过硫酸胺 TEMED:N,N,N,N';四甲基乙二胺 DMAPN:β-二甲基胺基丙晴
用过硫酸铵引发的反应称化学聚合反应;用核黄素引发,需要强光照射反应液, 称光聚合反应。 聚丙烯酰胺聚合反应可受下列因素影响:
1、大气中氧能淬灭自由基,使聚合反应终止,所以在聚合过程中要使反应液与空气 隔绝。 2、某些材料如有机玻璃,能抑制聚合反应。
3、某些化学药物可以减慢反应速度,如赤血盐。 4、温度高聚合快,温展开
1。什么叫切断条件。是不是不能切断的话就不能释放出药物
2。透膜性是什么意思。是不是指如果药物要进入细胞内的话就要选有透膜性的交联剂
3。间臂长度是不是臂越长越好
4。iodinatable是什么意思
谢谢大家!
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