实时荧光定量PCR 引物与普通PCR一样吗

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2021-07-27

问题描述：

两者间用的引物有什么区别，可以用一样的序列去设计吗

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bcy3383483

用户

实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定量的意义了

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hunyaa911

用户

不是一回事荧光PCR是为了检测mRNA表达水平所以只要在整条mRNA上选取特异性好的一段两百bp左右的序列扩增就可以了普通PCR是为了扩增特定的片段或者基因设计在哪是要看你需要扩增哪部分的

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yan25011614

用户

荧光是定量判定起始模板浓度的..跟普通PCR引物是一样的不同的只是反应中加入了探针或者燃料用于实时监控~！

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