【求助】酪氨酸酶抑制剂筛选问题
2012-04-06
问题描述：
本人最近在做中药里酪氨酸酶抑制剂的筛选，存在一些疑惑，望大家帮忙解答。
1、测定酶比活力：底物需要过量么？测定时间多长？是否可以加入过量的底物，然后测定3min吸光度的增加值，从吸光度的变化值计算比活力。
2、在酶抑制剂筛选的过程中，是否需要保证底物过量？还是要水浴一定时间让反应完全？我看到文献说用终浓度为0.1μmol/mL的底物，终浓度为45U/ml的酶，我想问，假设总体积为1ml，那么终浓度为45U/ml的酶岂不是每分钟能转化4.8μmol的底物？那么0.1μmol/mL的底物不就几秒钟就反应完了？那么怎么测定初速度？
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zjs12309
用户
求解答。
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傻妞丫丫
用户您好，请问您的问题解决了吗？我现在也在做酪氨酸酶抑制实验，结果是负值，不知道是不是条件没有控制好，想请教请教。
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