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DIARECT/ TMB Super Sensitive One Component HRP Microwell Substrate/TMBS-1000-01/ 1000 mL
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DIARECT/ TMB Super Sensitive One Component HRP Microwell Substrate/TMBS-1000-01/ 1000 mL
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DIARECT
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TMBS-1000-01
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TMBSuperSensitiveOneComponentHRPMicrowellSubstratecontains3,3’,5,5’-tetramethylbenzidineinamildlyacidicbuffer.Thesubstrateissuppliedasareadytousesolution.
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底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺/金属盐DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。   1.需要的溶液和特殊设备   DAB,0.05mol/LTris缓冲... 查看更多>
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辣根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。... 查看更多>
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米氏方程(Michaelis-Menten equation)表示一个酶促反应的起始速度与底物浓度关系的速度方程。在酶促反应中,在低浓度底物情况下,反应相对于底物是一级反应(first order reaction);而当底物浓度处于中间范围时,反应(相对于底物)是混合级反应(mixed order reaction)。当底物浓度增加时,反应由一级反... 查看更多>
2021-09-17
底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。... 查看更多>
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【现货促销】 WesternBright ECL Spray底物,【现货促销】 WesternBright ECL Spray底物 查看更多>
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决定酶促反应最大速度Vm的因素是什么?是同一底物,尽管加不同种酶,其Vmax都相同吗?可以画曲线图解释一下吗?可是根据米曼氏方程来看又有点矛盾,Km变大,Vmax也需变大,才可使v变大。所以题目所述到底应该怎么理解呢

加入1400ppm的亚铁,而双氧水则作为强氧化剂使用.5~4:双氧水与硫酸亚铁的质量比为1:2。硫酸亚铁中2价铁离子与双氧水(H2O2)的强氧化还用作用生成羟基自由基的过程。通常按质量浓度双氧水。也就是说Fe2+,比如除COD,还与药剂含量及水质因素有关:H2O2=1。 以水中COD含量计算其投加量则H2O2,一般有机物体现为还原性,那么硫酸亚铁的比例就要大一些,所以若是除COD的话。具体的投加量并不是固定的:3换算即可,可先计算出所需双氧水投加量,可依照以下计算公式芬顿药剂的投加比例量计算 芬顿药剂主要组成包括硫酸亚铁与双氧水,在实际应用中,这两种药剂也常被单独用于废水处理中,硫酸亚铁主要作为还原剂:1。 芬顿药剂投加量除了与水中污染物含量有关(有机物一般体现为还原性):COD的质量浓度为1,按照需要氧化200ppm的COD计算,再按硫酸亚铁跟双氧水的体积比一般为,加亚铁前保证处理反应器中的pH值在3、混凝剂使用,可相应投加多一点的双氧水,可根据水中污染物进行调节.0,反应40min左右。两者组合技术则为高级强氧化技术:H2O2=1,如果芬顿体系中如果氧化性物质多:COD=1,如水中还原性物质比较多:3,具体根据污染物浓度进行正交实验来确定,如果还原性物质多双氧水就要多一点,因此芬顿药剂的投加比例及浓度需要根据实际情况进行调整(硫酸亚铁芬顿试剂投加过量对废水的影响)。 先确定好芬顿硫酸亚铁与双氧水投加顺序,再加入700ppm的双氧水:3的摩尔浓度进行投加,相反的氧化性物质比较多时则Fe2+的投加比例须增大,再根据废水性质计算出芬顿试剂的投加量:1,摩尔浓度Fe2+:1
我做了ELISA方法学建立的实验,可惜按照三版全国临床检验规程上的方法配制底物液,显色偏浅,请高手指教,或者给我新的配方.或者给我指导,谢谢!
以OPD和TMB为底物的显色 在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。37℃ 30分钟可使HRP的底物催化反应完全,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。 此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppe ndorf管中,观察是否有显色出现,以OPD为底物,配好后应为无色,则需避光进行,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应无需避光,显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。ELISA的比色测定 ELISA的比色测定由酶标仪进行测定后,有许多阴性测定孔的吸光度值为负数或测定假阳性率大大增加等。这主要是未能正确理解和使用酶标仪所致。故需强调下面两点:1)比色测定时,一定要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。在行ELISA测定时 ,以TMB(比色波长450nm)为底物和以OPD(比色波长492nm)为底物的试剂盒均有使用,滤光片需根据要求随时更换。故易出现滤光片错用的问题。2)单波长或双波长比色选择的问题。单波长比色以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定;而双波长比色则在敏感波长450nm和非敏感波长630nm各测定1次。敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和。非敏感波长下测定即改变波长至一定值,使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零,此时测得的为脏物的吸光度值。最后酶标仪给出的数值为敏感波长与非敏感波长下的吸光度值的差。如在使用双波长比色时,仍设空白孔,就可能会造成前面提到的测定孔吸光度为负数的现象。由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性,故而在ELISA测定比色时最好使用双波长比色。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
反应底物浓度为什么不会影响反应速率
酶促反应速率跟底物浓度,pH,温度,酶的 浓度等因素有关,当底物浓度足够高时,酶的浓度相对较低,酶只能与一部分底物结合,导致速率有一个最大值.
酶的活性和温度,酸碱度等条件有关
调节至最适合温度(一般是37度),合适的酸碱度时,酶的活性最高
相关疾病:肝炎肾衰竭休克今天遇到1ICU病人病史是休克肾功不全审生化单时遇到一情况ALT与AST结果与2天前的结果差异极大查看生化反应曲线,如下图很明显是底物耗尽的图,需要稀释,用生理......
辣根过氧化物酶底物

ABTS
水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm及650nm具有两个主要的吸收峰。


OPD
和HRP反应时生成桔黄色的产物,在492nm时吸收最大。OPD易溶于底物缓冲液,如StablePeroxidaseSubstrateBuffer。


TMB
被过氧化氢氧化时(由HRP催化)可形成蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸或磷酸后,它会变成黄色,最大吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高,达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少,但这也可能产生较高的背景,所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。
水解过程如下几种方法
向左转|向右转向左转|向右转向左转|向右转向左转|向右转
酶既可以作为催化剂,也可以作为另一个化学反应的反应物。
底物为参与生化反应的物质,可为化学元素、分子或化合物,经酶作用可形成产物。一个生化反应的底物往往同时也是另一个化学反应的产物。
特定的底物会在特定的酶作用下,合成或分解。
酶,指具有生物催化功能的高分子物质。 在酶的催化反应体系中,反应物分子被称为底物,底物通过酶的催化转化为另一种分子。几乎所有的细胞活动进程都需要酶的参与,以提高效率。与其他非生物催化剂相似,酶通过降低化学反应的活化能来加快反应速率,大多数的酶可以将其催化的反应之速率提高上百万倍;事实上,酶是提供另一条活化能需求较低的途径,使更多反应粒子能拥有不少于活化能的动能,从而加快反应速率。酶作为催化剂,本身在反应过程中不被消耗,也不影响反应的化学平衡。酶有正催化作用也有负催化作用,不只是加快反应速率,也有减低反应速率。与其他非生物催化剂不同的是,酶具有高度的专一性,只催化特定的反应或产生特定的构型。