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Reaction Biology/EED (77-441) (GST)/RD-11-499
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Reaction Biology
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HumanrecombinantEEDexpressedinE.coliwithanN-terminalGST-tag.EEDfunctionsasH3K27me3readerwithinthePRC2/EED-EZH2complexandmediatesprotein-proteininteractions.Duringdevelopment,PolycombRepressiveComplex2(PRC2)istheprincipalmethyltransferaseresponsIBLeforgeneratingtrimethylatedhistoneH3lysine-27(H3K27me3),anepigeneticmarkessentialforprogrammedrepressionofgeneexpression1-5.

ACCESSION#:NM_003797

INCLUDESAMINOACIDS:77-441

TAG(S):N-terminalGST-tag

MW:69.0kDa

EXPRESSIONSYSTEM:E.Coli

SUPPLIEDAS:Solutionofpurifiedrecombinantproteinin50mMTris-HCl,pH7.5,500mMNaCl,1mMTCEP,10%glycerol(v/v).

STORAGE:-70°C.Thawquicklyandstoreonicebeforeuse.Theremaining,unused,undilutedproteinshouldbesnapfrozen,forexampleinadry/iceethanolbathorliquidnitrogen.Minimizefreeze/thawsifpossible,butverylowvolumealiquots(<5µl)orstorageofdilutedproteinisnotrecommended.

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ReactionBiology详细产品列表:货号产品价格(美元)HMT-11-376ASH1L(His)Methyltransferase325DMT-21-124DNMT1450DMT-21-125DNMT3aMethyltransferase450DMT-21-126 DNMT3b450HMT-11-101DOT1LMethyltransferase395HMT-25-115 EZH1Complex450HMT-25-114EZH2Complex799HMT-25-173EZH2-Y641FComplex799HMT-11-102G9aMethyltransferase(GST)(aa786-1210)299HMT-11-245G9aMethyltransferase(His)(aa913-1193)299HMT-12-104G9a/GLPComplexMethyltransferase325HMT-11-103GLPMethyltransferaseProtein299HMT-15-105MLL1Complex499HMT-15-106 MLL2Complex499HMT-15-107MLL3Complex499HMT-15-108 MLL4Complex499MT-11-359NNMT(GST)(NicotinamideN-Methyltransferase)299MT-11-358NNMT(His)(NicotinamideN-Methyltransferase)299HMT-11-319NRMT1(GST)325HMT-21-139NSD1Methyltransferase450HMT-21-1380NSD2(His)Methyltransferase450HMT-21-122 NSD2Methyltransferase550HMT-11-377NSD2SET(His)325HMT-21-159NSD2-E1099KMethyltransferase599HMT-11-378NSD2-E1099K-SET(His)325HMT-21-181NSD2-T1150AMethyltransferase450HMT-11-379NSD2-T1150A-SET(His)325HMT-11-132 NSD3Methyltransferase325HMT-21-348PRDM2Methyltransferase325HMT-21-152PRDM9Methyltransferase450HMT-11-119PRMT1Methyltransferase325HMT-11-113PRMT3Methyltransferase325HMT-11-120PRMT4Methyltransferase399HMT-21-172PRMT5Methyltransferase450HMT-22-434PRMT5(C449S)/MEP50799HMT-22-148PRMT5/MEP50Complex799HMT-11-121PRMT6Methyltransferase(GST)325HMT-21-380PRMT6Methyltransferase(His)325HMT-21-382PRMT7(His)450HMT-11-135PRMT8Methyltransferase325MT-11-356s-COMT(His)(SolubleCatechol-O-Methyltransferase)299MT-11-357s-COMT(V108M)(His)(SolubleCatechol-O-Methyltransferase)299HMT-15-116 SET1AComplex(5-subunits)499HMT-15-117SET1BComplex(5-subunits)499HMT-11-133SET7/9Methyltransferase299HMT-11-476SET8(GST)299HMT-11-118 SET8Methyltransferase299HMT-11-128 SETD2(GST)Methyltransferase299HMT-11-129SETD2(His)Methyltransferase299HMT-11-110SMYD2Methyltransferase325HMT-11-111SUV39H1Methyltransferase299HMT-11-418SUV39H2(GST)Methyltransferase299HMT-11-112SUV39H2(His)Methyltransferase299HMT-21-149SUV420H1-tv1Methyltransferase450HMT-21-150SUV420H1-tv2Methyltransferase450HMT-21-349SUV420H2Methyltransferase325HMT-14-109WRAD2375HMT-14-438(H3.3-H4)2Tetramer325HMT-35-435CoreHistones(Chicken)250HMT-11-184Fibrillarin(GST)325HMT-11-183Fibrillarin(His)325HMT-11-137GST-GAR299HMT-12-316H2A/H2Bdimers325HMT-11-180HistoneH1.050HMT-11-146HistoneH2A50HMT-11-147HistoneH2B50HMT-11-134 HistoneH3.350HMT-35-179Nucleosomes(ChickenMono/Di)280HMT-35-182Nucleosomes(ChickenOligo/PolyH5Enriched)280

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无氧呼吸:
反应底物——葡萄糖
反应产物——ATP、乙醇、CO2或ATP、乳酸

有氧呼吸:
反应底物——葡萄糖
反应产物——ATP、CO2、H2O
水解过程如下几种方法
向左转|向右转向左转|向右转向左转|向右转向左转|向右转
在做蛋白酶的动力学常数。[S]=100[E],不同浓度的底物ph基本接近,反应温度相同,酶在此温度下稳定。以产物的OD表示速率。但是,竟然发现底物浓度越低反应速率越快。以购买的胰蛋白酶做control,竟然也有同样趋势。有没有人能解释下为什么啊?
由于其结构未改变,只是活性位点结合了底物,因此不算失活,如果不需要酶了,它会被降解
我做了ELISA方法学建立的实验,可惜按照三版全国临床检验规程上的方法配制底物液,显色偏浅,请高手指教,或者给我新的配方.或者给我指导,谢谢!
以OPD和TMB为底物的显色 在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。37℃ 30分钟可使HRP的底物催化反应完全,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。 此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppe ndorf管中,观察是否有显色出现,以OPD为底物,配好后应为无色,则需避光进行,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应无需避光,显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。ELISA的比色测定 ELISA的比色测定由酶标仪进行测定后,有许多阴性测定孔的吸光度值为负数或测定假阳性率大大增加等。这主要是未能正确理解和使用酶标仪所致。故需强调下面两点:1)比色测定时,一定要注意酶标仪的波长是否已调至合适或所用滤光片是否正确。在行ELISA测定时 ,以TMB(比色波长450nm)为底物和以OPD(比色波长492nm)为底物的试剂盒均有使用,滤光片需根据要求随时更换。故易出现滤光片错用的问题。2)单波长或双波长比色选择的问题。单波长比色以对显色具有最大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定;而双波长比色则在敏感波长450nm和非敏感波长630nm各测定1次。敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和。非敏感波长下测定即改变波长至一定值,使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零,此时测得的为脏物的吸光度值。最后酶标仪给出的数值为敏感波长与非敏感波长下的吸光度值的差。如在使用双波长比色时,仍设空白孔,就可能会造成前面提到的测定孔吸光度为负数的现象。由于ELISA测定中单个空白孔的非特异吸收上有一定程度的不确定性,故而在ELISA测定比色时最好使用双波长比色。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
辣根过氧化物酶底物

ABTS
水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm及650nm具有两个主要的吸收峰。


OPD
和HRP反应时生成桔黄色的产物,在492nm时吸收最大。OPD易溶于底物缓冲液,如StablePeroxidaseSubstrateBuffer。


TMB
被过氧化氢氧化时(由HRP催化)可形成蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸或磷酸后,它会变成黄色,最大吸收峰为450nm。TMB灵敏度很高,达到相同的检测灵敏度需要的量比ABTS少,但这也可能产生较高的背景,所以要求使用较少的蛋白或较低的抗体浓度。
一般指的是酶促反应,物质1经过酶的催化反应变成物质2,那么物质1即为底物。
不算,因为酶和ATP反应前后总量不变。当然,蛋白酶和RNA酶不算(大部份酶由蛋白质构成,少部分由RNA构成)
可以。比如化学本质为蛋白质的酶在蛋白酶的作用下发生水解,此时该酶就是被作用的底物了。
大家好:
我是新手,来到丁香园看到有这么多的热心人,感到很高兴!!我也有很多问题需要大家的帮助!!实验已经作了一年了可是毫无进展,心里很是着急!!
我的课题是以外消旋的苯基乙二醇为底物,用假丝酵母催化生成手性纯的S-型苯基乙二醇,由于是老课题,所以目标是提高转化反应的底物浓度和菌体的使用批次(目前菌体使用一批后便不能再使用)。
我曾试过很多种方法,但均效果不大!我试着在转化过程中添加醛类,酮类,醇类作为辅助底物,增加菌体的使用批次。可效果不好,特别是添加了醇类后还有的起了反作用,因为我的这个转化过程中涉及到NAD和NADPH的再生。(其转化过程是酵母先催化将外消旋的苯基乙二醇变为酮,再将酮还原为醇,经过这一过程就将外消旋的苯基乙二醇变为手性纯的S-型了)
我还试过用固定化的方法,海藻酸钙包埋法,可是这样底物浓度就更低了!!
我现在不知道下一步该如何做了,很着急,请大家帮帮忙。谢谢了!!谢谢