Description
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Whole Cell Lysate, 1 mg (2 mg/ml)
General Notes:
Growth media: DMEM supplemented with 10% FBS
Cell lysate was prepared by homogenization in RIPA buffer (25mM Tris HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS) supplemented with 5 µg/ml of aprotinin and 5 µg/ml of leupeptin. Cell debris were removed by centrifugation (5 minutes at 12,000 RPM). Concentration of total protein was determined using BCA protein assay.
Storage Instructions
Shipped at 4°C. Upon delivery aliquot. Store at -80°C. Avoid freeze / thaw cycle.
Volume
0.5 ml
Concentration
1 mg at 2 mg/ml
Purity
Whole Cell Lysate
Altogen Labs Research Services:
Altogen Labs provides GLP-compliant contract research studies for pre-clinical research, IND applications, and drug development. Biology CRO services include: Xenograft models (30+), development of stable cell lines, ELISA assay development, cell-based and tissue targeted RNAi studies, safety pharm/tox assays, and other studies (visit AltogenLabs.com).
Volume Options:
- 1 mg of A204 Whole Cell Lysate (Catalog #8890)
- 1 mg of A375 Whole Cell Lysate (Catalog #8891)
- 1 mg of A431 Whole Cell Lysate (Catalog #8892)
- 1 mg of A549 Whole Cell Lysate (Catalog #8893)
- 1 mg of AGS Whole Cell Lysate (Catalog #8894)
- 1 mg of AR42J Whole Cell Lysate (Catalog #8895)
- 1 mg of ARPE-19 Whole Cell Lysate (Catalog #8896)
- 1 mg of ASMC Whole Cell Lysate (Catalog #8897)
- 1 mg of AsPC-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8898)
- 1 mg of Astrocyte Whole Cell Lysate (Catalog #8899)
- 1 mg of B16-F10 Whole Cell Lysate (Catalog #8900)
- 1 mg of BALB/3T3 Whole Cell Lysate (Catalog #8901)
- 1 mg of bEnd-3 Whole Cell Lysate (Catalog #8902)
- 1 mg of Beta-TC-6 Whole Cell Lysate (Catalog #8903)
- 1 mg of BHK-21 Whole Cell Lysate (Catalog #8904)
- 1 mg of BJ Whole Cell Lysate (Catalog #8905)
- 1 mg of BMS2 Whole Cell Lysate (Catalog #8906)
- 1 mg of BT-20 Whole Cell Lysate (Catalog #8907)
- 1 mg of BxPC-3 Whole Cell Lysate (Catalog #8908)
- 1 mg of C2C12 Whole Cell Lysate (Catalog #8909)
- 1 mg of C6 Whole Cell Lysate (Catalog #8910)
- 1 mg of Caco-2 Whole Cell Lysate (Catalog #8911)
- 1 mg of Caki-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8912)
- 1 mg of Calu-3 Whole Cell Lysate (Catalog #8913)
- 1 mg of Calu-6 Whole Cell Lysate (Catalog #8914)
- 1 mg of Capan-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8915)
- 1 mg of CFPEo Whole Cell Lysate (Catalog #8916)
- 1 mg of CHO Whole Cell Lysate (Catalog #8917)
- 1 mg of CHO-K1 Whole Cell Lysate (Catalog #8918)
- 1 mg of Chromaffin Whole Cell Lysate (Catalog #8919)
- 1 mg of CLBPEC Whole Cell Lysate (Catalog #8920)
- 1 mg of COLO205 Whole Cell Lysate (Catalog #8921)
- 1 mg of COS-7 Whole Cell Lysate (Catalog #8922)
- 1 mg of CT26.WT Whole Cell Lysate (Catalog #8923)
- 1 mg of D-407 Whole Cell Lysate (Catalog #8924)
- 1 mg of D-451 Whole Cell Lysate (Catalog #8925)
- 1 mg of Detroit551 Whole Cell Lysate (Catalog #8926)
- 1 mg of DI-TNC1 Whole Cell Lysate (Catalog #8927)
- 1 mg of DLD-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8928)
- 1 mg of DU145 Whole Cell Lysate (Catalog #8929)
- 1 mg of FaDu Whole Cell Lysate (Catalog #8930)
- 1 mg of Fibroblast Whole Cell Lysate (Catalog #8931)
- 1 mg of H9c2 Whole Cell Lysate (Catalog #8932)
- 1 mg of HCAEC Whole Cell Lysate (Catalog #8933)
- 1 mg of HCC1937 Whole Cell Lysate (Catalog #8934)
- 1 mg of HCN-1A Whole Cell Lysate (Catalog #8935)
- 1 mg of HCS-2 Whole Cell Lysate (Catalog #8936)
- 1 mg of HCT-116 Whole Cell Lysate (Catalog #8937)
- 1 mg of HEK-293 Whole Cell Lysate (Catalog #8938)
- 1 mg of HeLa Whole Cell Lysate (Catalog #8939)
- 1 mg of HeLa-S3 Whole Cell Lysate (Catalog #8940)
- 1 mg of Hep-3B Whole Cell Lysate (Catalog #8941)
- 1 mg of Hepa 1-6 Whole Cell Lysate (Catalog #8942)
- 1 mg of HepG2 Whole Cell Lysate (Catalog #8943)
- 1 mg of HMEC Whole Cell Lysate (Catalog #8944)
- 1 mg of HT-1080 Whole Cell Lysate (Catalog #8945)
- 1 mg of HT-29 Whole Cell Lysate (Catalog #8946)
- 1 mg of HUH-7 Whole Cell Lysate (Catalog #8947)
- 1 mg of HUVEC Whole Cell Lysate (Catalog #8948)
- 1 mg of IMR-90 Whole Cell Lysate (Catalog #8949)
- 1 mg of IRR-MRC5 Whole Cell Lysate (Catalog #8950)
- 1 mg of KB Whole Cell Lysate (Catalog #8952)
- 1 mg of Keratinocyte Whole Cell Lysate (Catalog #8953)
- 1 mg of L6 Whole Cell Lysate (Catalog #8954)
- 1 mg of LNCAP Whole Cell Lysate (Catalog #8955)
- 1 mg of LoVo Whole Cell Lysate (Catalog #8956)
- 1 mg of LS-174T Whole Cell Lysate (Catalog #8957)
- 1 mg of MCF-7 Whole Cell Lysate (Catalog #8958)
- 1 mg of MDA-MB Whole Cell Lysate (Catalog #8959)
- 1 mg of MDCK Whole Cell Lysate (Catalog #8960)
- 1 mg of MEF Whole Cell Lysate (Catalog #8961)
- 1 mg of MG-63 Whole Cell Lysate (Catalog #8962)
- 1 mg of MIA PaCa Whole Cell Lysate (Catalog #8963)
- 1 mg of MRC5 Whole Cell Lysate (Catalog #8964)
- 1 mg of NCI-H1299 Whole Cell Lysate (Catalog #8965)
- 1 mg of NCI-H1975 Whole Cell Lysate (Catalog #8966)
- 1 mg of NCI-H23 Whole Cell Lysate (Catalog #8967)
- 1 mg of NCI-H292 Whole Cell Lysate (Catalog #8968)
- 1 mg of NCI-H358 Whole Cell Lysate (Catalog #8969)
- 1 mg of NCI-H441 Whole Cell Lysate (Catalog #8970)
- 1 mg of NCI-H460 Whole Cell Lysate (Catalog #8971)
- 1 mg of NCI-N87 Whole Cell Lysate (Catalog #8972)
- 1 mg of Neuro-2a Whole Cell Lysate (Catalog #8973)
- 1 mg of NIH3T3 Whole Cell Lysate (Catalog #8974)
- 1 mg of NTERA-2 Whole Cell Lysate (Catalog #8975)
- 1 mg of PANC-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8976)
- 1 mg of PC-12 Whole Cell Lysate (Catalog #8977)
- 1 mg of PC-3 Whole Cell Lysate (Catalog #8978)
- 1 mg of PGHAM Whole Cell Lysate (Catalog #8979)
- 1 mg of RD Whole Cell Lysate (Catalog #8980)
- 1 mg of SK-BR3 Whole Cell Lysate (Catalog #8981)
- 1 mg of SK-MEL-28 Whole Cell Lysate (Catalog #8982)
- 1 mg of SKNAS Whole Cell Lysate (Catalog #8983)
- 1 mg of SK-N-MC Whole Cell Lysate (Catalog #8984)
- 1 mg of SK-N-SH Whole Cell Lysate (Catalog #8985)
- 1 mg of SK-OV-3 Whole Cell Lysate (Catalog #8986)
- 1 mg of SW480 Whole Cell Lysate (Catalog #8987)
- 1 mg of T98G Whole Cell Lysate (Catalog #8988)
- 1 mg of U87 Whole Cell Lysate (Catalog #8989)
- 1 mg of VERO Whole Cell Lysate (Catalog #8990)
- 1 mg of Weri-Rb-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8991)
- 1 mg of ZR-75-1 Whole Cell Lysate (Catalog #8992)
- 1 mg of 293 Whole Cell Lysate (Catalog #8993)
- 1 mg of 293T/17 Whole Cell Lysate (Catalog #8994)
- 1 mg of 3LL Whole Cell Lysate (Catalog #8995)
- 1 mg of 3T3 L1 Whole Cell Lysate (Catalog #8996)
- 1 mg of 4T1 Whole Cell Lysate (Catalog #8997)
- 1 mg of 786-O Whole Cell Lysate (Catalog #8998)
AltogenBiosystems是一家开发和制造用于生命科学研究，药物发现和开发的转染试剂盒的生物技术公司。转染试剂盒针对特定癌细胞系和原代细胞培养进行了优化，可将生物分子有效递送到靶组织中。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现体外（癌细胞系）和体内（动物组织靶向试剂、癌细胞系）递送货物分子，包括质粒DNA，各种类型的RNA（mRNA，siRNA，shRNA，microRNA），蛋白质和小分子研究。
Altogen生命科学公司致力于研发，生产和销售特定细胞系的转染试剂，用于细胞间生物分子的传递，并通过对转染试剂类型的设计将siRNA和质粒DNA有效地转入不同的细胞系和原代细胞内。Altogen公司开发的聚合物，脂质体，纳米粒子为基础的转染技术分别针对分子生物学，组合化学，和细胞生物学而分别应用。Altogen定制服务提供符合GLP要求定制研究服务，包括代稳定的细胞系，细胞银行和冷冻保存，焦磷酸测序，克隆，RNA干扰（RNAi）和基因沉默服务，发展分析，siRNA文库筛选，并转染服务。稳定的肿瘤细胞株和原代细胞的产生，可以是非常昂贵和费时。该公司的细胞培养科学家的细胞株的选择，无论是利息或shRNA表达载体的稳定表达的基因改造。标准的RNAi技术服务，包括设计与合成的siRNA的利益，验证siRNA的沉默效率，siRNA转染条件的优化，使高效的基因沉默细胞系或原代培养细胞的靶基因。转染培养细胞的瞬时或稳定的引入外源性分子和遗传物质（即RNA或DNA），通常是在生物实验室用来研究基因功能，基因表达的调节，生化映射，突变分析，和蛋白质的生产。科学家利用各种载体分子，这种分子，使质粒DNA（PDNA），信使RNA（mRNA），短干扰RNA（siRNA），小分子RNA（miRNA）的，并进入肿瘤细胞株和原代细胞的蛋白质的基因交付。不幸的是，无单提货的方法或转染试剂，可以适用于所有类型的细胞，细胞的细胞毒性和转染效率显着不同，取决于试剂，协议，并正在利用细胞类型。Altogen生物系统公司提供超过60种类型的细胞的预优化转染试剂盒。纳米粒子，脂质和聚合物基ALTOGEN®在体内转染试剂，使交付功能的RNA和DNA分子在体内。PEG脂质体在体内输送系统减少由于PEG修饰的先天免疫反应，并提供高效的siRNA转染的DNA，并在体内的蛋白质。由科学“杂志（2010年12月17日）：PEG脂质体在体内转染试剂盒siRNA的特色Altogen生物系统功能的特定细胞系转染试剂盒
120+细胞转染试剂和活体组织靶向试剂盒制造商AltogenBiosystems是一家生物技术公司，开发和制造用于生命科学研究、药物发现和开发的转染试剂盒。Altogen®体内转染试剂可有效地将生物分子导入靶组织。细胞转染试剂盒针对特定的癌细胞系和原代细胞进行了优化。通过先进的试剂配方和优化的转染方案实现货物分子（DNA、RNA、蛋白质）的高效传递。AltogenBiosystems利用高分子化学、分子和细胞生物学的专业知识，开发了新的体内外给药技术。转染是将外源分子导入培养细胞中，常用于研究基因功能、基因表达调控、生化定位和蛋白质生产。不幸的是，由于细胞毒性和转染效率的差异很大，并且取决于所使用的试剂、方案和细胞类型，因此没有一种单一的传递方法或转染试剂可应用于所有类型的细胞。AltogenBiosystems为120多个癌细胞系和原代细胞类型提供优化的转染试剂盒和电穿孔产品。体内转染试剂可实现组织靶向给药。Altogen的转染试剂盒包括用于体外（癌细胞系）和体内（用于动物研究的组织靶向试剂）转染的转染增强剂试剂和转染复合物冷凝器。Altogen实验室提供符合GLP的实验室合同研究服务。我们的生物CRO服务包括异种移植物的疗效、IND应用的pharm/tox研究和安全性测试、分析开发（ELISA、IC-50、qPCR）、90多个异种移植物动物模型、RNAi和基因沉默服务。Altogen的细胞培养科学家通过在28天内培育出稳定的细胞系，将选择的细胞系转化为稳定表达感兴趣的基因。
ebiomall.com
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百奥森18分钟霉菌毒素检测试剂盒，有需要的可以了解下！多种规格型号可供选择
产品名称
黄曲霉毒素B1(AFB1）酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素B1(AFB1）酶免检测试剂盒
赭曲霉毒素A（OTA）酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮（ZEN）酶免检测试剂盒
玉米赤霉烯酮（ZEN）酶免检测试剂盒
呕吐毒素（DON）酶免检测试剂盒
黄曲霉毒素M1（AFM1）酶免检测试剂盒
总黄曲霉毒素(AFT）酶免检测试剂盒
T-2毒素（T-2）酶免检测试剂盒
伏马毒素B1（FB1）酶免检测试剂盒
ldh试剂盒指乳酸脱氢酶检测试剂盒，是一种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。
ctl毒性杀伤检测试剂盒是基于LDH在胞浆内含量丰富，正常时不能通过细胞膜，当细胞受损伤或死亡时可释放到细胞外，此时细胞培养液中LDH活性与细胞死亡数目成正比，用比色法测定并与靶细胞对照孔LDH活性比较，可计算效应细胞对靶细胞的杀伤。
我用Promega公司的双荧光素酶检测试剂盒（E2920）检测到的firefly萤光素酶活性很低，只有4*10的3次方；海肾萤光素酶活性有10的6次方。
我用Ad293细胞做了转染，fireflyluciferase质粒：RanillaLuciferase质粒=0.1ug：0.025ug/一个孔（96孔板），共转染了二天，再进行双萤光素酶检测。
我想了解fireflyluciferase活性用promega的这个E2920-双萤光素酶试剂盒检测得到10的3次方，这种数值正常吗？
我做了3次重复实验，每次firefly萤光素酶活性很低，只有4*10的3次方；而海肾萤光素酶活性有10的6次方。
求指教？fireflyluciferase活性低？会是什么原因呢？
1、 配制JC-1染色工作液：
取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1，剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml，其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推。
2、 设置阳性对照：
推荐CCCP(10mM)加入到细胞培养液中处理细胞。随后按照下述方法装载JC-1，进行线粒体膜电位的检测。对于特定的细胞，CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同，需自行参考相关文献资料确定。
3、对于悬浮细胞：
a. 取1～6×105细胞，重悬于0.5ml细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。
b. 加入0.5ml JC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入4ml蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 4℃ 600g离心3～4min，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
f. 再用JC-1 Buffer(1×)重悬后，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
4、对于贴壁细胞：
注意：对于贴壁细胞，如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测，应先收集细胞，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
a.吸除6孔板培养液，根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次，加入1ml细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。
b. 加入1ml JC-1染色工作液，充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育。
c. 在孵育期间，按照每1ml JC-1 Buffer(5×)加入蒸馏水的比例，配制适量的JC-1 Buffer(1×)，并放置于冰浴。
d. 37℃孵育结束后， 吸除上清，用JC-1 Buffer(1×)洗涤2次。
e. 加入2ml细胞培养液，培养液中可以含有血清和酚红。
f. 荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。
5、对于纯化的线粒体：
a. 把配制好的JC-1染色工作液再用JC-1 Buffer(1×)稀释5倍。
b. 0.9ml 5倍稀释的JC-1染色工作液中加入0.1ml总蛋白量为10～100μg纯化的线粒体。
c. 用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测：混匀后直接用荧光分光光度计进行时间扫描，激发波长为485nm，发射波长为590nm。如果使用荧光酶标仪，激发波长不能设置为485nm时，可以在475～520nm范围内设置激发波长。另外，也可以参考下面步骤6中的波长设置进行荧光检测。
d. 用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察：方法同下面的步骤6。
6、荧光观测和结果分析：
检测JC-1单体时可以把激发光设置为490nm，发射光设置为530nm；检测JC-1聚合物时，可以把激发光设置为525nm，发射光设置为590nm。出现红色荧光说明线粒体膜电位比较正常，细胞的状态也比较正常。
注意事项：
1、 JC-1 Stain(200×)应完全溶解混匀后使用，但应避免反复冻融。必须先把JC-1 Stain(200×)用ddH2O充分溶解混匀后，才可加入JC-1 Buffer(1×)。不可先配制JC-1 Buffer(1×)再加入JC-1 Stain(200×)，否则导致JC-1很难充分溶解，严重影响后续的检测。
2、 对于6孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
3、 装载完JC-1后用JC-1 Buffer(1×)洗涤时，尽量使JC-1 Buffer(1×)保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
4、 勿把JC-1 Buffer(5×)全部配制成1×，因为操作过程中需直接使用JC-1 Buffer(5×)。
5、 如JC-1 Buffer(5×)中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
6、 CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，有一定毒性，请注意小心防护。
试剂盒在全球市场上的研发与销售呈快速上升趋势,2005年全球市场销售额超过200亿美元,且以15%左右的速度逐年增长.一方面是试剂盒的迅猛发展,而另一方面试剂盒市场良莠不齐的现象愈加明显,试剂盒的生产、销售及认证认可体制尚不完善,没有相应的标准或质量评价政策.且其灵敏度,稳定性及假阴/阳性控制尚不能满足检测需要,采用试剂盒进行检测的公信度受到质疑.
同时,食品安全领域是当前问题最多、最受关注的领域,这个领域的检测包括了物理、化学、微生物及分子生物学基础理论,无论是按检测原理、用途还是其它分类方式,涉及食品安全检测项目的试剂盒的品种是最全最多的.因此,从该领域着手从事评价制度的研究,便于获得基础性数据结果,并由此推广至动植物检疫及其它领域.
随着H7N9禽流感疫情的不断发散,国家流感中心已经多次发放人感染H7N9禽流感检测试剂,覆盖了全国31个流感网络实验室,并表示,诊断试剂的广泛发放是实现关口前移,控制疫情传播、蔓延的重要手段.而一旦H7N9监测关口继续前移,主动监测范围扩大,病毒检测试剂的需求量将进一步加大.
可采用H7N9亚型禽流感病毒RNA检测试剂盒（荧光PCR法）和H7N9禽流感病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）,定价分别为48人份/盒和48反应/盒,相比市场此前预期的100-200元之间的价格定位低了很多.在检验方法上,卫纪委提醒,前者需要配备全自动荧光PCR检测仪专用PCR扩增管和核酸分离试剂盒(硅胶膜吸附法)等必须设备及咽拭子样本,后者卫计委推荐采用达安基因生产的核酸提取试剂盒进行检验.
