请使用支持JavaScript的浏览器! +,Excellgen/Thermus aquaticus Muts DNA mismatch repair protein, C-6X His-MBP-Taq-Muts/EG-197/500 µg,转录表达,Excellgen,Excellgen, Inc.,,500 µg蚂蚁淘商城
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Excellgen/Thermus aquaticus Muts DNA mismatch repair protein, C-6X His-MBP-Taq-Muts/EG-197/500 µg
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Excellgen/Thermus aquaticus Muts DNA mismatch repair protein, C-6X His-MBP-Taq-Muts/EG-197/500 µg
品牌 / 
Excellgen
货号 / 
EG-197
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ProductNameThermusaquaticusMutSDNAmismatchrepairprotein,C-6XHis-MBP-Taq-Muts
Size500µg
Description

TheTaqMutSDNAmismatchproteinrecognizesheteroduplexDNAscontainingmispairedorunpairedbases.ThisMutsproteinbindsinvitrotoheteroduplexDNAscontainingmispairedorunpairedbasesoverawidetemperaturerangefrom4to70 °CandhasaThermostableATPaseactivity.ThisthermostableTaqMutSisactiveattemperaturebetween0to75°C.SinceTaqMutSefficientlybindsto1-4basesdeletion(orinsertion)andmismatchbasepairsofGT,CTandAG,itisusefulfordetectingthesemutations.MutationscanbedetectedinpolyacrylamidegelsoronasolidphasesuchasNiagaroseoramylosebeads,ormagneticNi-NTAparticles.

Applications
  • RemovemismatchDNA(errorcorrection)fromgenesynthesisreaction
  • Mutationdetectionandremoval
  • RapidisothermalSNPdetection
SourceE.coli
FusionTagMBPtagatN-terminusand6XHistagatC-terminus
PurificationMethodFPLC
Concentration1mg/ml
Purity

~95%asdeterminedbySDS-PAGE

Accession#AAC43637,TAU3311,U33117
GeneNameThermusaquaticusMutSDNAmismatchrepairprotein
MW135.9kDa
ProteinSequence1MGKIEEGKLVIWINGDKGYNGLAEVGKKFEKDTGIKVTVEHPDKLEEKFPQVAATGDGPD
61IIFWAHDRFGGYAQSGLLAEITPDKAFQDKLYPFTWDAVRYNGKLIAYPIAVEALSLIYN
121KDLLPNPPKTWEEIPALDKELKAKGKSALMFNLQEPYFTWPLIAADGGYAFKYENGKYDI
181KDVGVDNAGAKAGLTFLVDLIKNKHMNADTDYSIAEAAFNKGETAMTINGPWAWSNIDTS
241KVNYGVTVLPTFKGQPSKPFVGVLSAGINAASPNKELAKEFLENYLLTDEGLEAVNKDKP
301LGAVALKSYEEELVKDPRIAATMENAQKGEIMPNIPQMSAFWYAVRTAVINAASGRQTVD
361EALKDAQTNSSSNNNNNNNNNNLGDDDDKLEVLFQGPHMEGMLKGEGPGPLPPLLQQYVE
421LRDQYPDYLLLFQVGDFYECFGEDAERLARALGLVLTHKTSKDFTTPMAGIPLRAFEAYA
481ERLLKMGFRLAVADQVEPAEEAEGLVRREVTQLLTPGTLLQESLLPREANYLAAIATGDG
541WGLAFLDVSTGEFKGTVLKSKSALYDELFRHRPAEVLLAPELLENGAFLDEFRKRFPVML
601SEAPFEPEGEGPLALRRARGALLAYAQRTQGGALSLQPFRFYDPGAFMRLPEATLRALEV
661FEPLRGQDTLFSVLDETRTAPGRRLLQSWLRHPLLDRGPLEARLDRVEGFVREGALREGV
721RRLLYRLADLERLATRLELGRASPKDLGALRRSLQILPELRALLGEEVGLPDLSPLKEEL
781EAALVEDPPLKVSEGGLIREGYDPDLDALRAAHREGVAYFLELEERERERTGIPTLKVGY
841NAVFGYYLEVTRPYYERVPKEYRPVQTLKDRQRYTLPEMKEKEREVYRLEALIRRREEEV
901FLEVRERAKRQAEALREAARILAELDVYAALAEVAVRYGYVRPRFGDRLQIRAGRHPVVE
961RRTEFVPNDLEMAHELVLITGPNMAGKSTFLRQTALIALLAQVGSFVPAEEAHLPLFDGI
1021YTRIGASDDLAGGKSTFMVEMEEVALILKEATENSLVLLDEVGRGTSSLDGVAIATAVAE
1081ALHERRAYTLFATHYFELTALGLPRLKNLHVAAREEAGGLVFYHQVLPGPASKSYGVEVA
1141AMAGLPKEVVARARALLQAMAARREGALDAVLERLLALDPDRLTPLEALRLLQELKALAL
1201GAPLDTMKGKLAAALEHHHHHH
StorageBuffer20mMTris-HCl,pH8.0,250mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,50%Glycerol
ReactionBuffer100mMKCl,50mMTris-HCl,pH8.5,5~20mMMgCl2,0.1mMEDTA,1mMDTT,2%Glycerol,65°C
Storage-20to-80°C.
Shipping4°Cordryice

Protocol

(example)

1.AfterfirstroundPCR,purifyPCRfragmentsusingQiagenQIAquickPCRpurificationkitwithelutionindH2O.

2.DilutePCRproductto250ng/µlin10mMTris–HCl,pH7.8,50mMNaClandheatto95oCfor5minfollowedbycoolingat0.1oC/sto25oC.

3.Addbindingbuffer(20mMTris–HCl,pH7.8,10mMNaCl,5mMMgCl2,1mMDTTand5%glycerol)toannealedPCRproduct,adjustDNAconcentrationto11.5ng/µl,add6XHis-MBP–MutSdimersto950nM.

4.Incubatethemixtureatroomtemperaturefor10min,thenaddanequalvolumeofamyloseresin(NEB)preequilibratedwith1Xbindingbuffer,andincubatefor30minatroomtemperature.

5.Gentlyspindownbeadsandsavesupernatantforsubsequentprocessing(secondroundPCR,cloningetc).

References

1.Protein-mediatederrorcorrectionfordenovoDNAsynthesis.NucleicAcidsRes.2004Nov23;32(20):e162.

2.CorrectingerrorsinsyntheticDNAthroughconsensusshuffling.NucleicAcidsRes.2005Mar30;33(6):e55.

3.MutSasatoolformutationdetection.ActaBiochimPol.2005;52(3):575-83.Epub2005Aug4.

4.OnetubemutationdetectionusingsensitivefluorescentdyeingofMutSprotectedDNA.NucleicAcidsRes.2000Apr15;28(8):E36.

5.RapidSNPdiagnosticsusingasymmetricisothermalamplificationandanewmismatch-suppressiontechnology.NatureMethods-4,257-262(2007)doi:10.1038/nmeth1007

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下面的方案分成 3 个阶段:用 pTet-tTAk 稳定转染成纤维细胞,稳定转染可诱导表达 tTA 的 NIH-3T3 细胞,分析转染细胞中的蛋白表达。稳定转染细胞系表达反式激活因子和靶基因分为两个阶段。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。 查看更多>
玉米果穗顶部籽秕粒瘪或未结籽粒,称之为秃顶,又叫“秃尖”,是玉米生产中常见的现象,一般会导致玉米减产5%~10%,严重的甚至在30%以上。造成玉米秃尖有品种的遗传因素,但也受到种植密度和干旱胁迫等环境条件的影响。近日,为了解析玉米秃尖的分子生理机制,阿根廷布宜诺斯艾利斯大学的科研人员系统研究了杂交品种、播种密度和灌溉条件对玉米秃尖的影响。进一步地,研究人员在同步人工授粉后的2-6天内,收集果穗籽粒样本研究其基因表达模式并分析籽粒的糖份含... 查看更多>
Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1 alpha (PGC-1a) is a tissue-specific coactivator that enhances the activity of many nuclear recep 查看更多>
【摘要】目的:探讨BAI1mRNA表达水平与不同级别胶质瘤间的关系。方法:选取病理分级为WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤标本依次为12例、12例、14例,正常脑组织标本6例;提取总RNA,用半定量RT-PCR法检测BAI1基因的转录表达情况。结果:BAI1mRNA在所有正常脑组织和26例(68.4%)胶质瘤中表达。正常脑组织的BAI1基因转录表达水平高于胶质瘤组,P<0.05;各级胶质瘤间BAI1基因转录表达水平差异没有统计学意义。结论:BA... 查看更多>
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Mitogen-activated protein (MAP) kinases are important players in signal transduction pathways activated by a range of stimuli and mediate a number of physiolog 查看更多>
2021-07-20
中国将开发自主知识产权肿瘤基因表达谱芯片 查看更多>
1. Inoculate the entire colony in 5 ml YPD culture O.N. or 12 hours2. Dilute into YPA medium (1% yeast extract, 2% Bacto-peptone, 2%KOAC) to OD600~ 0.2, Vigoro 查看更多>
原核基因表达调控乳糖操纵子核心的:▪没有乳糖,基因关闭。▪有乳糖,基因被诱导开放。▪有葡萄糖时,乳糖操纵子是不表达的。结构:调节方式:阻遏蛋白的负性调节:诱导剂:别乳糖,半乳糖,IPTG;2.CAP的正性调节:两种调节方式的关系:乳糖操纵子中有2道开关:▪CAP结合到CAP位点发挥正控作用▪乳糖诱导去阻遏只有两道开关同时打开时,基因才能转录。色氨酸(trp)操纵子核心的:有色氨酸不表达,无色氨酸表达结构:结构基因是合成色氨酸的。(理解上... 查看更多>
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是的,必须,rna病毒需要逆转录成DNA之后进行这个步骤,朊病毒需要逆转两次之后进行。但是注意这是必须的两步,不是只有两步。
比较转录和复制的异同点_123
栤葑惡魔2018-02-27
表达包括转录和翻译
生命活动丰富多彩、千变万化。但是万变不离其宗,不管如何变化都围绕着中心法则展开。核酸作为遗传物质指导蛋白质的表达,表达产生的一些特殊蛋白(如转录因子、调控蛋白)反过来又对DNA指导合成蛋白质的过程进行调控。对基因表达调控的研究一直是生物学研究热点,涉及到生命活动的各个过程,也是各类信号通路研究无法绕过的部分。
当面对某个基因表达调控研究时,第一个想到的研究对象是什么?没错,就是基因的启动子。通过启动子区域对基因表达进行调控是最直接有效的手段,所以也是研究基因表达调控的重点。现在的基因数据库信息丰富,拿到基因及其启动子序列非常简单。那么问题又来了,拿到启动子序列以后,下一步怎么找相关的调控蛋白/转录因子呢?生物信息学方法预测?你会得到很多可能的目标调控蛋白/转录因子,还要做实验一个一个验证。凝胶迁移(EMSA),染色质免疫共沉淀(ChIP)?只能针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,而且还需要相应探针/抗体,对于大量筛选无能为力。
美国Signosis的转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂可以方便、高效地解决这一问题。该方法专门用于筛查与特定DNA序列(通常是含有转录因子结合位点的启动子序列)相互作用的调控蛋白/转录因子,获得目的基因的启动子序列后,使用该方法可以筛查48/96种常见的调控蛋白/转录因子与启动子序列结合情况。该方法利用转录因子与特定DNA序列结合的特点,针对每一种转录因子设计相应的生物素标记探针;当混合探针与核蛋白样本共同孵育时,探针与相应的转录因子结合形成转录因子/探针复合物;除去游离的探针,收集转录因子/探针复合物;分离复合物中的DNA探针,探针的量与探针的量与转录因子含量呈正相关。在探针混合物中同时加入启动子片段,如果DNA序列中含有转录因子结合位点,就会与生物素标记的探针竞争性结合转录因子,转录因子与相应探针形成的复合物减少。通过比较有无目的基因启动子片段中转录因子探针检测差异,可以分析出与无目的基因启动子片段相互作用的转录因子种类。
这种方法可以简单、快速地在48/96种常见转录因子筛选出与目的启动子片段相互作用的调控蛋白/转录因子,从而进一步探索目的基因的表达调控。待筛选的调控蛋白/转录因子都是在生命活动中起重要通的调控蛋白/转录因子,大大方便了后续的基因表调控、信号通路及其它方面的研究。
http://www.biomart.cn/infosupply/17197307.htm

转录因子(启动子结合)微孔板阵列检测试剂I(FA-2001_Promoter-binding_TF_profiling_assay_I).pdf(91.72k)
基因转录是指DNA分子转录成RNA
翻译是指mRNA在核糖体的帮助下翻译成肽链
基因表达则是二者的统一,即DNA转录成RNA,RNA翻译成肽链,并最终折叠成有意义的蛋白质
下列有关基因表达的叙述正确的是(  )A.基因表达包括转录和翻译两个过程,均发生在细胞核中B.转录的模板是基因的一条链,翻译的模板是tRNAC.转录和翻译的原料都是氨基酸,都需要消耗能量D.转录和翻译都需要酶的催化,但酶的种类和功能不同

大家好,本人实验小白一枚,目前在寻找自己的毕业课题,有个实验问题想请教论坛里面的各位大侠。前期的实验证明某个转录因子具有抑癌作用,在正常肝脏组织中高表达,在肝癌组织中低表达,在HepG2,SMMC-7721等肝癌细胞株中缺失表达。我现在想用染色质免疫共沉淀结合高通量测序的方法筛选它的下游基因,由于在肝癌细胞株中缺失表达,我可以构建一个过表达转录因子的质粒到肝癌细胞株中做染色质免疫共沉淀吗?或者还有更好的方法筛选下游基因吗?谢谢!

本人最近在用双向电泳技术研究一种细菌(H)不同血清型的两个菌株(H1和H2)的分泌蛋白差异,结果经双向电泳筛选出一些差异蛋白。之后挑取其中二个差异蛋白利用实时荧光定量PCR相对定量方法分析其转录水平。结果发现这两个蛋白在菌株H1的表达量远低于在菌株H2的表达,但是荧光定量PCR分析发现这两个蛋白的转录水平菌株H1是菌株H2的五十倍,现在正为此事烦恼,哪位高人能给些指点呢?
转录和翻译的模板就是基因的DNA序列,也就是说有了DNA序列,才有了某一种固定的蛋白质,即蛋白质的氨基酸序列是由DNA序列决定的.
翻译,基因表达调控123
爪机粉丝008B22021-07-30
这句话翻译成英文是:Genes are expressed by transcription and translation, and what controls transcription
不一样。
基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。
即表达=转录+翻译
转录量和拷贝数是相等的(产生的RNA),但和表达量(蛋白质,最终产物)不同意思,只是表达的第一步,只有转录的也都同样顺利翻译成蛋白质才有同时满足的可能。
转录增加 不等于 表达增加表达增加 也不等于 转录增加成功转录 不代表 成功表达成功表达 说明 成功转录
一个基因要转录并表达,需要经过mRNA,如果知道基因序列,可以采用RT-PCR的方法鉴定mRNA是否表达,如果有mRNA一般就是表达蛋白,如果没有mRNA一般不表达蛋白。