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AbD Serotec/Golimumab antibody | AbD25455/0.1 mg/HCA289
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AbD Serotec/Golimumab antibody | AbD25455/0.1 mg/HCA289
品牌 / 
bio-rad-antibodies
货号 / 
HCA289
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Human Anti-Golimumab Antibody, clone AbD25455 is an anti-idiotypic antibody that specifically recognizes the monoclonal antibody drug golimumab. This antibody binds to both free golimumab and to golimumab bound to its target tumor necrosis factor alpha (TNFα). Clone AbD25455 does not inhibit the binding of golimumab to its target TNFα and can be used to measure total golimumab and biosimilar products in bioanalytical assays.Clone AbD25455 is an affinity-matured variant of clone AbD20897 (HCA242), with about 7-fold affinity improvement.A pair of anti golimumab antibodies can be used to develop a pharmacokinetic (PK) bridging assay to measure free drug. This antibody, in monovalent Fab format, is recommended as the capture antibody, paired with an antibody in full immunoglobulin format, clone AbD25451_hIgG1 (HCA290), as the detection antibody.Golimumab, marketed under the brand name Simponi is a recombinant human IgG1/kappa monoclonal antibody approved for the treatment of rheumatoid arthritis, psoriatic arthritis and ankylosing spondylitis. This therapeutic antibody, directed against TNFα, acts by blocking the binding of TNFα to its receptors, resulting in a down-regulation of the inflammatory response associated with autoimmune diseases.View a summary of all anti-golimumab antibodies

Product Details

Product Form
A monovalent human recombinant Fab (lambda light chain) selected from the HuCAL® phage display library, expressed in E. coli. The antibody is tagged with a DYKDDDDK tag and a HIS-tag (HHHHHH) at the C-terminus of the antibody heavy chain. This antibody is supplied as a liquid.
Preparation
Metal chelate affinity chromatography
Buffer Solution
Phosphate buffered saline
Preservative Stabilisers
0.01% Thiomersal
Immunogen
Golimumab
Affinity
The monovalent intrinsic affinity of AbD25455 was measured as KD = 0.9 nM by real time, label free molecular interaction analysis on immobilized golimumab
Approx. Protein Concentrations
Antibody concentration 0.5 mg/ml

Storage Information

Storage
Store at +4oC or at -20oC if preferred.Storage in frost-free freezers is not recommended.This product should be stored undiluted. Avoid repeated freezing and thawing as this may denature the antibody. Should this product contain a precipitate we recommend microcentrifugation before use.
Guarantee
12 months from date of despatch

More Information

Acknowledgements
Sold under license of U.S. Patents 6753136, 7785859 and 8273688 and corresponding patents. This antibody was developed by Bio-Rad, Zeppelinstr. 4, 82178 Puchheim, Germany. Simponi is a registered trademark of Janssen Biotech, Inc. in the USA and Merck & Co, Inc. in Europe.His-tag is a registered trademark of EMD Biosciences.
Licensed Use
For in vitro research purposes and for commercial applications for the provision of in vitro testing services to support preclinical and clinical drug development. Any re-sale in any form or any other commercial application needs a written agreement with Bio-Rad.
Regulatory
For research purposes only

Applications of Golimumab antibody

This product has been reported to work in the following applications. This information is derived from testing within our laboratories, peer-reviewed publications or personal communications from the originators. Please refer to references indicated for further information. For general protocol recommendations, please visit the antibody protocols page.
Application NameVerifiedMin DilutionMax Dilution
ELISA
    Where this product has not been tested for use in a particular technique this does not necessarily exclude its use in such procedures. Suggested working dilutions are given as a guide only. It is recommended that the user titrates the product for use in their own system using appropriate negative/positive controls.
    Technical Advice
    Recommended protocols and further information about HuCAL recombinant antibody technology can be found in theHuCAL Antibodies Technical Manual
    ELISA
    Clone AbD25455 can be used in a direct or indirect ELISA system or as capture antibody for golimumab in a bridging ELISA together with HCA290 (AbD25455_hIgG1) as the detection reagent. Protocol: PK bridging ELISA to measure total drug

    Useful Reagents Available

    DescriptionProduct CodeApplicationsPack SizeList PriceQuantity
    Human anti GolimumabHCA290E 0.1 mgloader
    Human anti Golimumab:HRPHCA290PE 0.1 mgloader
    LYNX Rapid HRP Antibody Conjugation KitLNK001PCJ 1 Conjugation For 400µg Antibody
    Mouse anti Penta Histidine Tag:HRPMCA5995PE WB 125 µlloader
    Mouse anti Human IgG (Fc) CH2 Domain:HRPMCA647PC* E 0.2 mgloader

    Product Specific References

    References for Golimumab antibody

    1. Harth, S. et al. (2019) Generation by phage display and characterization of drug-target complex-specific antibodies for pharmacokinetic analysis of biotherapeutics. MAbs. 11 (1): 178-90.
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    最近导师要求做一个关于PARP家族蛋白在肝癌和癌旁组织中转录以及表达情况的初步研究,以确定目前的课题是否有很大价值。我之前一直在做湿实验,没有生信背景,所以对这个工作比较头疼。我不会编程,所以直接上网查找有没有可以在网上直接进行分析的网站。我一开始是上cbioportal上对肝癌的mRNA转录谱进行分析,但网站里面提供的对照是一个所谓的标准正常人。我没查到这个所谓的标准正常人是什么,而且导师说肝癌可能存在个体差异,所以要求用肝癌及其对应的癌旁组织的转录谱和表达谱进行分析。我上GEO搜索癌旁组织(paracanceroustissue),根本什么想要的结果都没有。我现在完全是一头雾水,无从下手,希望有做相关领域工作的前辈们或是做与之类似的工作的前辈们提供指导,非常感谢!

    如何在转录水平 检测某基因的表达
    1.基因丢失:体细胞分化过程必须将某些基因永久性的关闭,最简单有效的方式就是将其丢失.2.基因扩增:发育分化、环境条件的改变,对某些产物的需要量急剧增加--增加该基因的拷贝数.3、基因重排:某些基因片段改变原来的书顺序重新排列.4、甲基化修饰,脊椎动物,DNA上特定的CpG序列的C处可发生甲基化修饰.5、染色质结构的修饰.
    检测目的基因是否转录通常采用分子杂交的方法。 基因表达分为转录及翻译两阶段,转录是以DNA(基因)为模板生成mRNA的过程,翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程,检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。
    蛋白质在细胞中的丰度变化很大程度上决定了不同组织如脑和肌肉,以及健康和不健康人类细胞之间的差异。长期以来人们都认为转录,这一控制遗传信息从DNA流向RNA的过程,对决定细胞内蛋白质的数量起主导作用。但在过去的十年里,有许多的研究则提出RNA翻译为蛋白质的速度差异是一个更为重要的因素。
    近期发表在《科学》(Science)以及其他杂志上的一些新研究证实,转录实际上是决定蛋白质丰度中最具影响力的步骤。
    例如,近期来自哈佛-麻省理工Broad研究所的Marko Jovanovic等在Science杂志上发表文章,称检测了处于稳定状态和响应细菌脂多糖(LPS)时的小鼠骨髓树突细胞。他们发现在稳定状态时,mRNA水平、翻译速度和蛋白质降解速度可分别解释68%、26%和8%的蛋白质表达差异。当用LPS刺激细胞时,mRNA水平似乎可以解释90%的蛋白质表达差异,而翻译和蛋白质降解只能解释4%和6%的差异。Jovanovic等发现,在LPS处理的情况下,核糖体、线粒体以及其他一些高表达管家蛋白的翻译和蛋白质降解速度发生了更多改变,表明这两个步骤在控制一些过程中发挥了重要的作用。
    来自加州大学洛杉矶分校统计学和人类遗传学助理教授Jingyi Jessica Li,和劳伦斯伯克利国家实验室的Mark Biggin,则在PeerJ杂志的一篇论文中用两种方法重新分析了2011年一项Nature研究的数据,说明了一些检测错误。他们证实采用第一种方法结果表明mRNA水平差异可以解释最小56%的蛋白质水平差异,而第二种方法表明mRNA水平可以解释84%的蛋白质表达差异,其中转录占73%,RNA降解占11%,而翻译和蛋白质降解各自仅占8%。
    在3月6日,发表在Science杂志上的一篇题为“Statistics requantitates the central dogma”的文章中,Li和Biggin综述了上述这些近期的研究,得出了转录是蛋白质丰度最大贡献者这一结论。他们认为,他们自身以及近期其他一些研究工作都采用了更细致的统计学方法,来评估或是减少了实验性检测错误。Li和Biggin认为,早期的一些研究得到的有关翻译影响的结果实际上是由于实验错误所导致。
    研究人员提出,科学家们精确地模拟基因表达需要采用更准确的测量和分析方法。他们的研究对于鉴别出可以有效治疗各种疾病的药物具有重要的影响。
    原文链接:Statistics requantitates the central dogma
    Dynamic profiling of the protein life cycle in response to pathogens
    转录组分析概述123
    杀生丸EIO2018-02-26
    转录组是指某个物种或特定细胞在某一生理功能状态下,细胞内所有转录的mRNA产物的集合,包含了时间和空间的限定,是连接基因组遗传信息与生物功能的蛋白质组的必然纽带。转录水平的调控是目前研究最多的,也是生物体最重要的调控方式。
      应用高通量技术进行转录组测序是一种快捷可靠的获取转录组信息的方法。mRNA的转录本表达分析,通过获得研究对象基因组转录区域的信息,鉴定转录发生位点,可变剪切等,其精确的计数方法更可对基因进行精确的定量分析。
    转录组数据中,RPKM是Reads Per Kilo bases per Million reads的缩写,代表每百万reads中来自于某基因每千碱基长度的reads数。

    转录是遗传信息由DNA转换到RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,转录是mRNA以及非编码RNA(tRNA、rRNA等)的合成步骤。是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以ATP、CTP、GTP、UTP四种核苷三磷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。
    不一样。
    基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。
    即表达=转录+翻译
    转录量和拷贝数是相等的(产生的RNA),但和表达量(蛋白质,最终产物)不同意思,只是表达的第一步,只有转录的也都同样顺利翻译成蛋白质才有同时满足的可能。
    转录增加 不等于 表达增加表达增加 也不等于 转录增加成功转录 不代表 成功表达成功表达 说明 成功转录
    准备做双荧光酶报告基因,设计了A转录因子过表达质粒,和启动子报告基因,考虑能不能直接用A转录因子蛋白代替A转录因子过表达质粒;这样用报告基因转染细胞再加A转录因子到细胞培养液中培养,这样能不能行得通?
    比较转录和复制的异同点_123
    栤葑惡魔2018-02-27
    表达包括转录和翻译
    基因转录1123
    2021-07-21
    我想知道什么是转录基因?
    下列有关基因表达的叙述正确的是(  )A.基因表达包括转录和翻译两个过程,均发生在细胞核中B.转录的模板是基因的一条链,翻译的模板是tRNAC.转录和翻译的原料都是氨基酸,都需要消耗能量D.转录和翻译都需要酶的催化,但酶的种类和功能不同

    生命活动丰富多彩、千变万化。但是万变不离其宗,不管如何变化都围绕着中心法则展开。核酸作为遗传物质指导蛋白质的表达,表达产生的一些特殊蛋白(如转录因子、调控蛋白)反过来又对DNA指导合成蛋白质的过程进行调控。对基因表达调控的研究一直是生物学研究热点,涉及到生命活动的各个过程,也是各类信号通路研究无法绕过的部分。

    当面对某个基因表达调控研究时,第一个想到的研究对象是什么?没错,就是基因的启动子。通过启动子区域对基因表达进行调控是最直接有效的手段,所以也是研究基因表达调控的重点。现在的基因数据库信息丰富,拿到基因及其启动子序列非常简单。那么问题又来了,拿到启动子序列以后,下一步怎么找相关的调控蛋白/转录因子呢?生物信息学方法预测?你会得到很多可能的目标调控蛋白/转录因子,还要做实验一个一个验证。凝胶迁移(EMSA),染色质免疫共沉淀(ChIP)?只能针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,而且还需要相应探针/抗体,对于大量筛选无能为力。

    美国Signosis的转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂可以方便、高效地解决这一问题。该方法专门用于筛查与特定DNA序列(通常是含有转录因子结合位点的启动子序列)相互作用的调控蛋白/转录因子,获得目的基因的启动子序列后,使用该方法可以筛查48/96种常见的调控蛋白/转录因子与启动子序列结合情况。该方法利用转录因子与特定DNA序列结合的特点,针对每一种转录因子设计相应的生物素标记探针;当混合探针与核蛋白样本共同孵育时,探针与相应的转录因子结合形成转录因子/探针复合物;除去游离的探针,收集转录因子/探针复合物;分离复合物中的DNA探针,探针的量与转录因子含量呈正相关。在探针混合物中同时加入启动子片段,如果DNA序列中含有转录因子结合位点,就会与生物素标记的探针竞争性结合转录因子,转录因子与相应探针形成的复合物减少。通过比较有无目的基因启动子片段中转录因子探针检测差异,可以分析出与无目的基因启动子片段相互作用的转录因子种类。

    这种方法可以简单、快速地在48/96种常见转录因子筛选出与目的启动子片段相互作用的调控蛋白/转录因子,从而进一步探索目的基因的表达调控。待筛选的调控蛋白/转录因子都是在生命活动中起重要通的调控蛋白/转录因子,大大方便了后续的基因表调控、信号通路及其它方面的研究。



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