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Pre-made lentiviral particles expressing SV40 large T-antigen gene under suCMV promoter. A GFP-Blasticidin fusion dual marker was expressed under RSV promoter allows to select by blasticidin antibiotic or sort via GFP signal, the transduced cells for long term expression (Dual markers). GFP signal providbe a convenient transduction monitoring for virus perfomrance.
SV40 large T-antigen causes cell immortalization and allow to produce high-titer lentivirus in your cell line. It was natively expressed without any tags. See product manual (.pdf).
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2018-12-26
Designing PCR programsBasic Principles (see also Page 01) The requirement of an optimal PCR reaction is to amplify a specific locus without any unspecific by-p 查看更多
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上海杏园瑞民生物工程有限公司在发布的Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片供应信息，浏览与Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片相关的产品或在搜索更多与Inflammasomes PCR Array 炎性小体基因表达PCR芯片相关的内容。 查看更多
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Clusterin是一种由CLU基因编码的蛋白质，它在大多数人体组织中表达，特别是在压力下，它有助于保护细胞。
由开罗大学男科和性学系的Taymour Mostafa领导的一个埃及研究小组发现，不育男性的精子中CLU的表达要高得多。
Mostafa和他的同事检查了124名男性的精液样本，其中一些人的精子活力降低，精子细胞形状异常或精子数量低。与健康精子的男性相比，他们发现精子功能障碍男性的凝聚素蛋白及其mRNA前体水平显着升高。他们还发现凝聚素水平与精子质量密切相关，因此CLU的表达越 查看更多
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2018-11-19
穆斯塔法Khammash领导的研究人员已经开发出一种新方法,它使用蓝光控制DNA的转录成RNA在单个细胞。这项技术也可以用于组织工程和干细胞研究。转录是一项基本生物过程的基因复制的RNA分子。这涉及到蛋白质,包括转录因子和称为rna聚合酶的分子机器。
转录因子的转录过程开始,必须首先连接到一个特定的DNA的一部分。这触发各种流程,导致DNA的RNA聚合酶的对接。这种蛋白质复杂然后螺旋分解双螺旋为了阅读的顺序基因并将其复制到一个RNA分子。所谓的信使RNA是一种便携式拷贝基因功能的蛋白质 查看更多
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2018-12-26
1. Inoculate the entire colony in 5 ml YPD culture O.N. or 12 hours2. Dilute into YPA medium (1% yeast extract, 2% Bacto-peptone, 2%KOAC) to OD600~ 0.2, Vigoro 查看更多
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2018-12-14
科学家首次将位于编码基因之外的突变与肿瘤基因表达的变化联系起来，有助于未来诊断和治疗策略的发展。癌症由于不受控制的细胞生长和分裂而发展，最终导致癌细胞在全身的转移性扩散，导致大量器官功能障碍。
开创性研究表明，转化为癌细胞是由细胞DNA突变的积累所驱动的。
研究人员已经阐明了基因内特定突变的影响，并发现这些突变在癌症的标志中发挥着不可或缺的作用。这项研究已经导致了当今临床中使用的许多成功治疗方法的发展。
然而，在癌细胞中发现的绝大多数突变都存在于基因之外的DNA序列中，称为非编码区。这 查看更多
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2018-12-15
DNA甲基化（DNA methylation）为DNA化学修饰的一种形式，能够在不改变DNA序列的前提下，改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5碳位共 查看更多
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2021-07-29
小鼠被广泛用于模拟人类代谢、疾病和药物应答，是医学研究中的一个基本工具。然而斯坦福大学的研究团队指出，人类和小鼠的基因表达存在着惊人的差异，不论是蛋白编码基因还是非编码基因。这项研究发表在十一月十七日的美国国家科学院院刊PNAS杂志上。Michael Snyder及其同事在15种组织中比较了人类和小鼠的基因表达情况，包括大脑、心脏、肝脏、肾脏等等。他们发现，物种间的基因表达差异要大于组织间的差异。举例来说，小鼠肝脏与人类肝脏基因表达的相... 查看更多
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2018-12-21
国家人类基因组研究所(NHGRI)研究人员参加了与丹佛科罗拉多大学，加拿大蒙特利尔麦吉尔大学和瑞士苏黎世大学儿童医院同事的国际研究，他们描述了一种涉及身体缺陷的新疾病。处理维生素B12或维生素B12的能力。这种罕见的遗传性疾病仅在男孩身上发现，可引起严重的神经症状，包括发育迟缓，癫痫和脑畸形。对新生儿的钴胺素代谢缺陷进行了筛选，但新的疾病以前没有被区分为相关病症，即钴胺素C缺乏症或cblC。随着他们的发现，2013年9月5日发表在美国人类遗传学杂志 [cell.com]上，研究人员在X 查看更多
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2021-09-13
基因表达 基因表达是指基因指导下的蛋白质合成过程。生物体生命活动中并不是所有的基因都同时表达，代谢过程中所需要的各种酶和蛋白质的基因以及构成细胞化学成分的各种编码基因，正常情况下是经常表达的，而与生物发育过程有关的基因则要在特定的时空才表达。逆转录PCR1.概念和原理RT-PCR称为逆转录PCR或反转录PCR，是指在体外将mRNA逆转录为互补cDNA后，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。2.科研和临床应用主要用于特异基因mRN... 查看更多
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2018-12-20
根据北卡罗来纳大学和加利福尼亚大学洛杉矶分校的一组科学家的说法，不同类型的幸福对人类基因组产生了惊人的不同影响。具有高水平所谓的eudaimonic福祉的人 - 在生活中具有深刻的目的和意义(Teresa母亲)带来的快乐 - 在他们的免疫细胞中显示出非常有利的基因表达谱。它们具有低水平的炎症基因表达和抗病毒和抗体基因的强烈表达。
然而，拥有相对较高的享乐幸福感的人 - 完全自我满足(名人)所带来的幸福类型 - 实际上恰恰相反。它们具有涉及高炎症和低抗病毒和抗体基因表达的不良表达谱。
在 查看更多
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如何选择合适的转录本进行过表达研究123
zhf83822015-04-15
我刚刚开始实验遇到了一些问题，请各位帮忙想想办法：在PUBMED和UCSC网站上都找不到小鼠来源的一个基因的转录本，只有人的，但是后续实验要做干扰和过表达，我该怎么办呢？请各位想想办法，谢谢！
【求助】蛋白表达水平转录水平 蛋白质和糖学技术讨论版论坛123
魏兴良2021-08-04
转录组分析概述123
杀生丸EIO2018-02-26
转录组是指某个物种或特定细胞在某一生理功能状态下，细胞内所有转录的mRNA产物的集合，包含了时间和空间的限定，是连接基因组遗传信息与生物功能的蛋白质组的必然纽带。转录水平的调控是目前研究最多的，也是生物体最重要的调控方式。
应用高通量技术进行转录组测序是一种快捷可靠的获取转录组信息的方法。mRNA的转录本表达分析，通过获得研究对象基因组转录区域的信息，鉴定转录发生位点，可变剪切等，其精确的计数方法更可对基因进行精确的定量分析。
应用高通量技术进行转录组测序是一种快捷可靠的获取转录组信息的方法。mRNA的转录本表达分析，通过获得研究对象基因组转录区域的信息，鉴定转录发生位点，可变剪切等，其精确的计数方法更可对基因进行精确的定量分析。
基因转录、翻译和基因表达的区别简述基因表达过程中复制和转录的...123
JanJun7B2018-03-02
1.模板不同:复制的模板是DNA的两条链，转录的模板是DNA的一条链。2.产物不同:复制的产物是DNA,转录的产物是RNA。3.原料不同:复制需要的原料是脱氧核苷酸，转录的原料是核糖核苷酸。4.需要的酶不一样:复制需要DNA聚合酶，转录需要RNA聚合酶。
基因的转录与翻译 真题练习123
llllllllklove2018-02-07
转录和翻译的模板就是基因的DNA序列,也就是说有了DNA序列,才有了某一种固定的蛋白质,即蛋白质的氨基酸序列是由DNA序列决定的.
小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)检测试剂盒123
我是小木瓜2017-03-22
某种转录因子有四种不同的亚型（N1N2N3N4），我想检测它们在某种细胞内的表达情况，能不能提取这种细胞的蛋白，然后跑western，通过敷育四种对应的抗体最后来确认哪种亚型表达得多，哪种亚型表达得少呀？我做了三次western，结果在对应的分子量区域都没有呈现条带出来！有前辈说这样做是无意义的，因为细胞可能对不同抗体的敏感性不同，所以跑western时用一种样本分别敷四种抗体的话是没有可比性的。真的是这样吗？我看文献里也有人做不同蛋白亚型在组织中的表达，他们能做出来条带。求各路大神指点啊！（抱拳）
低表达的转录因子如何筛选下游基因 核酸基因技术123
xy_she2021-07-23
大家好，本人实验小白一枚，目前在寻找自己的毕业课题，有个实验问题想请教论坛里面的各位大侠。前期的实验证明某个转录因子具有抑癌作用，在正常肝脏组织中高表达，在肝癌组织中低表达，在HepG2，SMMC-7721等肝癌细胞株中缺失表达。我现在想用染色质免疫共沉淀结合高通量测序的方法筛选它的下游基因，由于在肝癌细胞株中缺失表达，我可以构建一个过表达转录因子的质粒到肝癌细胞株中做染色质免疫共沉淀吗？或者还有更好的方法筛选下游基因吗？谢谢！
...陆剑课题组揭示uORF和microRNA在基因表达调控中的共同作用_Zhang123
帆帆08162021-07-25
蛋白质在细胞中的丰度变化很大程度上决定了不同组织如脑和肌肉，以及健康和不健康人类细胞之间的差异。长期以来人们都认为转录，这一控制遗传信息从DNA流向RNA的过程，对决定细胞内蛋白质的数量起主导作用。但在过去的十年里，有许多的研究则提出RNA翻译为蛋白质的速度差异是一个更为重要的因素。
近期发表在《科学》(Science)以及其他杂志上的一些新研究证实，转录实际上是决定蛋白质丰度中最具影响力的步骤。
例如，近期来自哈佛-麻省理工Broad研究所的Marko Jovanovic等在Science杂志上发表文章，称检测了处于稳定状态和响应细菌脂多糖(LPS)时的小鼠骨髓树突细胞。他们发现在稳定状态时，mRNA水平、翻译速度和蛋白质降解速度可分别解释68%、26%和8%的蛋白质表达差异。当用LPS刺激细胞时，mRNA水平似乎可以解释90%的蛋白质表达差异，而翻译和蛋白质降解只能解释4%和6%的差异。Jovanovic等发现，在LPS处理的情况下，核糖体、线粒体以及其他一些高表达管家蛋白的翻译和蛋白质降解速度发生了更多改变，表明这两个步骤在控制一些过程中发挥了重要的作用。
来自加州大学洛杉矶分校统计学和人类遗传学助理教授Jingyi Jessica Li，和劳伦斯伯克利国家实验室的Mark Biggin，则在PeerJ杂志的一篇论文中用两种方法重新分析了2011年一项Nature研究的数据，说明了一些检测错误。他们证实采用第一种方法结果表明mRNA水平差异可以解释最小56%的蛋白质水平差异，而第二种方法表明mRNA水平可以解释84%的蛋白质表达差异，其中转录占73%，RNA降解占11%，而翻译和蛋白质降解各自仅占8%。
在3月6日，发表在Science杂志上的一篇题为“Statistics requantitates the central dogma”的文章中，Li和Biggin综述了上述这些近期的研究，得出了转录是蛋白质丰度最大贡献者这一结论。他们认为，他们自身以及近期其他一些研究工作都采用了更细致的统计学方法，来评估或是减少了实验性检测错误。Li和Biggin认为，早期的一些研究得到的有关翻译影响的结果实际上是由于实验错误所导致。
研究人员提出，科学家们精确地模拟基因表达需要采用更准确的测量和分析方法。他们的研究对于鉴别出可以有效治疗各种疾病的药物具有重要的影响。
原文链接：Statistics requantitates the central dogma
Dynamic profiling of the protein life cycle in response to pathogens
近期发表在《科学》(Science)以及其他杂志上的一些新研究证实，转录实际上是决定蛋白质丰度中最具影响力的步骤。
例如，近期来自哈佛-麻省理工Broad研究所的Marko Jovanovic等在Science杂志上发表文章，称检测了处于稳定状态和响应细菌脂多糖(LPS)时的小鼠骨髓树突细胞。他们发现在稳定状态时，mRNA水平、翻译速度和蛋白质降解速度可分别解释68%、26%和8%的蛋白质表达差异。当用LPS刺激细胞时，mRNA水平似乎可以解释90%的蛋白质表达差异，而翻译和蛋白质降解只能解释4%和6%的差异。Jovanovic等发现，在LPS处理的情况下，核糖体、线粒体以及其他一些高表达管家蛋白的翻译和蛋白质降解速度发生了更多改变，表明这两个步骤在控制一些过程中发挥了重要的作用。
来自加州大学洛杉矶分校统计学和人类遗传学助理教授Jingyi Jessica Li，和劳伦斯伯克利国家实验室的Mark Biggin，则在PeerJ杂志的一篇论文中用两种方法重新分析了2011年一项Nature研究的数据，说明了一些检测错误。他们证实采用第一种方法结果表明mRNA水平差异可以解释最小56%的蛋白质水平差异，而第二种方法表明mRNA水平可以解释84%的蛋白质表达差异，其中转录占73%，RNA降解占11%，而翻译和蛋白质降解各自仅占8%。
在3月6日，发表在Science杂志上的一篇题为“Statistics requantitates the central dogma”的文章中，Li和Biggin综述了上述这些近期的研究，得出了转录是蛋白质丰度最大贡献者这一结论。他们认为，他们自身以及近期其他一些研究工作都采用了更细致的统计学方法，来评估或是减少了实验性检测错误。Li和Biggin认为，早期的一些研究得到的有关翻译影响的结果实际上是由于实验错误所导致。
研究人员提出，科学家们精确地模拟基因表达需要采用更准确的测量和分析方法。他们的研究对于鉴别出可以有效治疗各种疾病的药物具有重要的影响。
原文链接：Statistics requantitates the central dogma
Dynamic profiling of the protein life cycle in response to pathogens
【求助】如何研究新的调控转录因子基因表达的基因 实验方法 丁 ...123
suiyu1219852021-07-31
我请请教一下，如何验证一个转录因子在细胞内是否表达。我将细胞抽提RNA，逆转录后扩出该转录因子的基因，是否就可以表明该转录因子在该细胞内是表达的？因为是菜鸟，很多都不懂。请各位多多指教，不胜感激。
基因的表达量和转录本的表达量 组学大讲堂问答社区123
hi冰糖2018-03-04
不一样。
转录量和拷贝数是相等的（产生的RNA），但和表达量（蛋白质，最终产物）不同意思，只是表达的第一步，只有转录的也都同样顺利翻译成蛋白质才有同时满足的可能。
转录增加 不等于 表达增加表达增加 也不等于 转录增加成功转录 不代表 成功表达成功表达 说明 成功转录
基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。即表达=转录+翻译
转录量和拷贝数是相等的（产生的RNA），但和表达量（蛋白质，最终产物）不同意思，只是表达的第一步，只有转录的也都同样顺利翻译成蛋白质才有同时满足的可能。
转录增加 不等于 表达增加表达增加 也不等于 转录增加成功转录 不代表 成功表达成功表达 说明 成功转录
比较转录和复制的异同点_123
栤葑惡魔2018-02-27
表达包括转录和翻译
基因转录 123
罗特DSkn32021-07-26
在RNA聚合酶的催化下，以DNA为模板合成mRNA的过程称为转录（transcription）。在双链DNA中，作为转录模板的链称为模板链（template strand）或反义链（antisense strand）；而不作为转录模板的链称为编码链（coding strand）或有义链（sense strand），编码链与模板链互补，它与转录产物的差异仅在于DNA中的胸腺嘧啶（T）变为RNA中的尿嘧啶（U）。在含许多基因的DNA双链中，每个基因的模板链并不总是在同一条链上，亦即可作为某些基因模板链的一条链，同时也可以是另外一些基因的编码链。
转录后要进行加工，转录后的加工包括： 几乎全部的真核 mRNA 端都具“帽子”结构。虽然真核生物的mRNA的转录以嘌呤核苷酸三磷酸（pppAG或pppG）领头，但在5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7GpppAGpNp）。mRNA 5’端的这种结构称为帽子（cap）。不同真核生物的mRNA具有不同的帽子。
mRNA的帽结构功能：①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合；②m7Gppp结构能有效地封闭RNA 5’末端，以保护mRNA免疫5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定性。 （postranslational processing）：从核糖体上释放出来的多肽需要进一步加工修饰才能形成具有生物活性的蛋白质。翻译后的肽链加工包括肽链切断，某些氨基酸的羟基化、磷酸化、乙酰化、糖基化等。真核生物在新生手肽链翻译后将甲硫氨酸裂解掉。有一类基因的翻译产物前体含有多种氨基酸顺序，可以切断为不同的蛋白质或肽，称为多蛋白质（polyprotein）。例如胰岛素（insulin）是先合成86个氨基酸的初级翻译产物，称为胰岛素原（proinsulin），胰岛素原包括A、B、C三段，经过加工，切去其中无活性的C肽段，并在A肽和B肽之间形成二硫键，这样才得到由51个氨基酸组成的有活性的胰岛素。向左转|向右转
转录后要进行加工，转录后的加工包括： 几乎全部的真核 mRNA 端都具“帽子”结构。虽然真核生物的mRNA的转录以嘌呤核苷酸三磷酸（pppAG或pppG）领头，但在5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7GpppAGpNp）。mRNA 5’端的这种结构称为帽子（cap）。不同真核生物的mRNA具有不同的帽子。
mRNA的帽结构功能：①能被核糖体小亚基识别，促使mRNA和核糖体的结合；②m7Gppp结构能有效地封闭RNA 5’末端，以保护mRNA免疫5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定性。 （postranslational processing）：从核糖体上释放出来的多肽需要进一步加工修饰才能形成具有生物活性的蛋白质。翻译后的肽链加工包括肽链切断，某些氨基酸的羟基化、磷酸化、乙酰化、糖基化等。真核生物在新生手肽链翻译后将甲硫氨酸裂解掉。有一类基因的翻译产物前体含有多种氨基酸顺序，可以切断为不同的蛋白质或肽，称为多蛋白质（polyprotein）。例如胰岛素（insulin）是先合成86个氨基酸的初级翻译产物，称为胰岛素原（proinsulin），胰岛素原包括A、B、C三段，经过加工，切去其中无活性的C肽段，并在A肽和B肽之间形成二硫键，这样才得到由51个氨基酸组成的有活性的胰岛素。向左转|向右转
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