
WesternBlottingHRPSubstrate
lumigenECLExtra(TMA-3)isaproprietaryacridanbasedchemiluminescentsubstrateforhighlysensitivedetectionofWesternblottedandELISAcapturedproteinsthatareboundtohorserADIshperoxidase(HRP)labeledantibodies.
- Veryrapidonsetofchemiluminescence-imagescanberecordedinseconds
- Excellentsensitivity-lowpicogramtomidfemtogram
- Reducedantibodyusage-morethan10-foldreductionintheusageofexpensiveantibodyconjugates
- Temperatureinsensitive-analyticalresultsareinsensitivetotemperaturesfrom22°C-35°Creducingtheneedforprecisetemperaturecontrol
- Sustainedsignalduration -overseveralhoursallowsconvenientimaging
StableWorkingSolution
AsignificantfeatureofLumigenECLExtraisitsexcellentstABIlity.Unlikemostotherchemiluminescentperoxidasesubstrates,theworkingsolutionisstableatroomtemperatureforatleastoneweekandat2-8°Cforatleastonemonth.Withthisstability,theworkingsolutioncanbepreparedandstoredforlateruse.
RapidPeakIntensity
ReactionofthesubstratewithHRPenzymegeneratesrapidluminescenceofveryhighintensitywithinseconds.Peakintensityoflightemissionoccursat440nm.
ProductSpecifications
ebiomall.com






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第一,血清成分复杂,最好用密理博的Montage Albumin Deplete Kit去除血清里50%的白蛋白
第二,磷酸化蛋白提取蛋白的时候,最好加入原钒酸钠,和磷酸酶抑制剂,防止蛋白脱磷酸化。
第三,不要用牛奶做封闭剂,用BSA。因为牛奶中含有磷酸化酪蛋白,防止非特异带。
第四,如果条带杂带多,而且,条带弱,可以选择millipore的signal boost,增加条带特异性,而且,增强条带的亮度。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶,内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
1. 使用预染 Marker,不过分子量不是特别准;
2. 所使用的 Marker 条带与待测蛋白质带有相同的抗原表位,比如都带有 His 融合标签;
3. 可以使用普通的 Marker 转膜使用 丽春红 等染色,然后在膜上标记出 Marker 各条带的位置。
考马斯亮兰染液也可以重复用。新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟。
一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入4度保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃.

