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Numerous techniques have been developed to prepare immunoliposomes based on the nucleophilic reactivity of free amine groups of proteins or peptides. One of the most popular and commonly used methods is to covalently couple free carboxylic groups to primary amines through activation of the carboxyl groups with EDC (1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide). EDC, which is a so-called zero-length crosslinking agent, reacts with the carboxyl to form an amine reactive intermediate (O-acylisourea). The produced O-acylisourea can be easily displaced by nucleophilic attack from primary amino groups in the reaction mixture. However, this intermediate is unstable and hydrolyzed in aqueous solutions. In order to prevent the intermediate hydrolysis, sulfo-NHS (N-hydroxysulfosuccinimide) is added to EDC to produce a significantly more stable and more soluble active intermediate (NHS ester).
Consequently, the immunoliposomes are prepared by a two-step coupling procedure: first, activating the free carboxyl group on the antibody, peptide or protein with EDC and sulfo-NHS, and then covalently conjugating antibody to the lipids through displacement of sulfo-NHS groups by amine groups of the liposomes, as depicted below. EDC/sulfo-NHS coupling reactions are highly selective and highly efficient, and the biological activity of the protein or peptide is preserved.
ImmunoFluor™-Amine is a PEGylated product. For other amine reactive (PEGylated and non-PEGyalated products) and also ImmunoFluor™ products suitable for other types conjugation methods see here.
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2021-09-15
ImmunoWay生物的使命是用更好的产品和服务来帮助世界各地的生命科学的研究者，简化并加速他们的研究。专注于开发出创新的和可靠的免疫学和细胞学产品。ImmunoWay生物是开发高品质的与癌症、细胞凋亡、细胞生长和信号转导相关的ELISA试剂盒，细胞凋亡检测试剂盒，细胞代谢检测试剂盒，抗体，抗体/蛋白芯片的先驱。公司目前有八千多种抗体，其中信号传导相关的抗体1200 查看更多
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2021-09-17
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多
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2021-09-21
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2021-09-22
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2021-09-09
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2021-09-08
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2021-09-18
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多
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2021-09-10
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2021-09-07
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2021-09-13
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常见问题
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用pcr检测一个因子,没用wb检测怎么解释123
允儿08132021-07-21
OneShineSybrGreenpreMix试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响，例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证，得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在2000Lux光照强度下可以保存12h，超过12h产品性能则会下降。OneShineSybrGreenpreMix这款试剂盒除了价格适中外，还主要有以下优点：1、适用于RealTimePCR反应，可以快速、准确地对目的基因进行定量检测。2、在2×OneShineSybrGreenpreMix中，预先混有SybrGreen，PCR体系配制时只需入模板、引物、ddH2O即可，操作方便快捷。3、含有更耐高温并持续稳定的DNAPolymerase，可以维持更多的循环数，提供了选择循环数更大的空间。更大的Ct值选择范围就意味着可以支持微量目的基因检测，检测范围fM-nM。4、反应的Buffer更适合，使反应的基线更水平，无荧光污染信号。使线性期更陡峭，避免了Ct值的无效浮动。使平台期更平直。也确保了引物与模板能够更特异地结合。5、SybrGreen更耐高温更足量，确保只要扩增反应在进行，目的DNA双链在增加，就有线性强度的荧光产生。6、dNTPs更足量，确保反应有更高的平台期荧光信号。7、Mg2+浓度更适合，确保线性期有爆发式的目的DNA片段合成，提高了线性期反应体系的扩增系数和线性期的长度。8、更高的仪器适配性，SybrGreen染料可以被各大主流仪器的激发光所激发，产生明亮的荧光信号，有利于仪器对信号的捕捉和处理。我们的产品与市面上目前常见的一种产品相比较有如下区别：ROC公司的产品没有熔解温度，或者熔解温度太高。但是ROC公司的产品Ct值出现略早，这是因为ROC公司使用了一种小分子量的DNA聚合酶，这种酶与模板和引物的结合较快和较松散，但是扩增的效率和扩增的特异性就不能保证了，类似于温水煮青蛙不温不火的；这种酶还有一个弱点就是不耐冻融。我们使用的是Taq酶，是一种分子量较大的DNA聚合酶，这种酶与模板和引物结合比较慢，但是慢工出细活，这种酶的特异性较好，一旦激活便呈现爆发式的扩增，类似于不鸣则已一鸣惊人。我们产品熔解温度是ROC公司不可比拟的，线性范围和斜率也是ROC公司不可比拟的。详见下图：向左转|向右转
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒试用注意事项?及工作原理是怎样...123
wling1592021-08-04
博凌科为 高纯质粒小量制备试剂盒
原理简介：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐，低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐，高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项：
◆ 第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留， 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点：
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好，能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速，方便，不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取，同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁，会严重阻碍细菌细胞的裂解，因此必须在裂解细胞前破除，方法如下：
收集适量的菌体，加入250ul溶液P2，充分悬浮菌液，加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
原理简介：
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐，低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐，高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
注意事项：
◆ 第一次使用时，将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后（终浓度100ug/ml）置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活，提取的质粒可能会有混杂有微量RNA残留， 这时可在溶液P1中补加RNase A即可。
◆ 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入45ml无水乙醇，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
◆ 温度低时溶液P2中SDS可能会出现浑浊或者析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
◆ 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
试剂盒特点：
◆ 产量高---一次提取高达30ug以上的质粒。
◆ 纯度高---OD260/OD280一般为1.80~1.85本试剂盒提取的质粒纯度好，能充分保证测序所需要的读长(用于ABI3730测序一般可达1000bp有效读长)。
◆ 快速，方便，不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。
提示
BIOTEKE的质粒提取试剂盒既适用于革兰氏阴性菌中质粒的提取，同时也可从革兰氏阳性菌中提取质粒。由于革兰氏阳性菌外被一层较厚的细胞壁，会严重阻碍细菌细胞的裂解，因此必须在裂解细胞前破除，方法如下：
收集适量的菌体，加入250ul溶液P2，充分悬浮菌液，加入溶菌酶使其终浓度在10-20mg/ml左右在37℃处理30分钟左右。加入溶菌酶的浓度和处理的时间可根据不同的菌主和具体实验条件进行调整。
免疫荧光染色法中,标记一种抗体只能检测一种抗原的方法是A、补体...123
棕油菊花2032021-08-08
美国IDEXX公司 本实验室长期使用中，主要是伪狂犬抗体检测，鉴别诊断以及猪瘟抗体检测。每一个盒子大概5000-6000之间。 敏感性与特异性非常好。 国产的就不行了。如果是初步检测武汉科前的还不错，兰州兽医研究所的也可以。
【求助】转染质粒后多长时间蛋白表达达到最高峰 蛋白质和糖学 丁...123
情系3PA232018-02-06
需要根据具体情况进行具体分析，推荐从以下角度进行分析：对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计，分别取样然后做SDS-PAGEWB分析；参考实验室经验数据；尝试采用磁珠IP试剂盒产品（义翘有相关产品）进行小量样品的快速纯化；…
【求助】关于WB内参的问题~~~~急求解释 蛋白质和糖学论坛123
2021-07-23
浓缩胶的目的使得loading的样品能够在同一条水平线上进入分离胶,如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。而在分离是理论上(实际上也是)小电压长时间分离的效果会更好,但是在操作过程中没...
【求助】新手 请问westernblot测NFKB、FLT3是用总蛋白提取试剂...123
inter12072010-11-08
请问哪个公司的WB试剂盒好用？小弟刚接触，做WB的要的材料好多，不知有无合适的试剂盒可以减少工作量，请了解的大侠指教下！！
【求助】请问有Western blot 做的比较好的公司么 实验方法 丁 ...123
3453456022018-02-13
不是的看你实验如何做了，试剂盒这块有技术支持的，你可以咨询下厂家，wb的实验需要的东西还是很多的，还是要参考详细的配方再做
做WB的时候,用的PVDF膜究竟有没有正反_问答详情_WB试剂盒_...123
守望相依ぃ2212021-07-22
这个膜的两面是不一样的。一面粗糙，一面光滑吧。如果这个算正反面的话，那么就是有正反面的。但是对于WB来说在转膜前是没有正反面之分的。你用粗糙的面贴着胶转膜和光滑的面贴着胶转膜，蛋白都能转到膜上去的。不会因为你膜贴反了而蛋白转膜不成功啥的。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶，内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶，内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物 实验方法...123
deadbird12021-07-25
天根RNA试剂盒DP419提取的蛋白可以做WB吗：分三层后，上层是RNA，那个中间层的蛋白怎么提出来纯化一下做WB？请高手解答，非常感谢！
氙气对脑白质损伤新生大鼠脑组织Bax、Bcl2蛋白及EphrinB2、...123
′妆雪雪ㄟ5bWz2018-02-09
α-平滑肌肌动蛋白是23kD。
1、如果是提取的总蛋白，然后做WB，用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的，这是公认的东西。
2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白，再用β-actin作为内参似乎不妥，因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物处理细胞，比较处理前后某种膜蛋白的表达情况，此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，β-actin就是检测不到的。
1、如果是提取的总蛋白，然后做WB，用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的，这是公认的东西。
2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白，再用β-actin作为内参似乎不妥，因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而，如果我们试验目的是用药物处理细胞，比较处理前后某种膜蛋白的表达情况，此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了，因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话，β-actin就是检测不到的。
谁能解释下WB检测和化学发光检测【恐艾吧】123
Curtain6542018-02-07
wb是确诊实验。发光是初筛实验。
【实验求助】检测凋亡的caspase通路是选择WB还是酶活试剂盒 ...123
futuo19882021-08-06
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