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Encapsula/Cellsome® made from Diether Lipids/5-ml/CDE-507
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Encapsula/Cellsome® made from Diether Lipids/5-ml/CDE-507
品牌 / 
Encapsula
货号 / 
CDE-507
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The fundamental structure of cell membranes is bilayers composed of phospholipids, and the vital function of the phospholipids in the membrane is to help keep it fluid and semi-permeable. Conventional glycerophospholipids have acyl chains attached to the sn-1 and sn-2 positions of the glycerol backbone via an ester bond. Ether lipids are a unique class of glycerophospholipids that have an alkyl chain attached to the sn-1 position by an ether bond (glycerol-ether lipids). In ether lipids, the alcohol group attached to the phosphate is generally choline or ethanolamine. Ether-linked phospholipids such as 1-alkyl-2-acyl-phosphatidylcholine and dialkylphosphatidylcholine are also found in the plasma and organelle membranes of mammalian species. Ether lipids form approximately 20% of the total phospholipid in mammals with different tissue distribution; brain, heart, spleen and white blood cells have the highest levels, while liver have a very little amount of ether lipids.

Studies on the formation and thermodynamic properties of ether-linked phospholipid bilayer membranes have indicated that in contrast to ester-linked phospholipid, the formation of the non-bilayer structure takes place spontaneously. This is attributed to the weaker interaction between polar headgroups in the ether-linked than that in the ester-linked phospholipids. It has also shown that the phase behavior of the ether-linked phospholipid bilayer membranes in ambient pressure is almost equivalent to that of the ester-linked phospholipid bilayer membranes under high temperatures and pressures, and the difference in the phase behavior decrease as the alkyl-chain length increases.

Due to distinctive properties of ether lipids, liposomes made from ether lipids exhibit very unique characteristics and performance: a) the ether bonds are more stable than ester linkages over a wide range of acidic or alkaline pH; b) stability properties of the liposomes is enhanced by bipolar lipids, and the saturated alkyl chains gives stability towards degradation in oxidative conditions; c) the unusual stereochemistry of the glycerol backbone enhance the resistance against the attacks by other organism phospholipases.

Phospholipase A2 (PLA2) cannot hydrolyze the ether lipid liposomes. Diether lipids do not go through hydrolysis due to having an ether bond instead of an acyl bond and therefore to do that, they are a suitable candidate for experiments that needs to be performed at a higher temperature for an extended period of time. For more information about hydrolysis and oxidation of phospholipids see here.

The structure of DOPC containing diester bond and prone to hydrolysis.
The structure of 18:1 diether lipid which cannot be hydrolyzed.

Saturated diether lipids can neither be hydrolyzed nor oxidized.

The structure of 18:0 diether lipid which can neither be hydrolyzed nor oxidized.
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蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多>
通过前期的早期初筛,经过生物信息学分析,会筛选到具有统计学意义的一部分具有表达差异的蛋白。这些蛋白需要经过进一步的优化,寻找到与疾病或某些通路有关的具有表达差异的蛋白,进一步缩小蛋白范围,这时就需要使用结果更为准确的蛋白定量或鉴定工具。经过优化后,需要对得到的更小范围生物标志物进行大样本量的验证,最终确定哪些生物标志物可以用于疾病 查看更多>
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您好,我要做质粒转染,还有后续的荧光定量和WB,麻烦您发给我这些资料,谢谢!sweetydxg@126.com
清洗液用高纯水稀释就行样本用标准品稀释液
我现在在用WB检测APP蛋白,但是总是不成功,不知道是否是蛋白提取有问题,因为APP蛋白是膜蛋白,我用的是总蛋白提取试剂盒,希望有经验的同志指点一下。谢谢!
美国IDEXX公司 本实验室长期使用中,主要是伪狂犬抗体检测,鉴别诊断以及猪瘟抗体检测。每一个盒子大概5000-6000之间。 敏感性与特异性非常好。 国产的就不行了。如果是初步检测武汉科前的还不错,兰州兽医研究所的也可以。
天根RNA试剂盒DP419提取的蛋白可以做WB吗:分三层后,上层是RNA,那个中间层的蛋白怎么提出来纯化一下做WB?请高手解答,非常感谢!

请问一下,我买了一盒碧云天的细胞膜蛋白提取试剂盒,想提取后进行WB检测。但是遇到了两个问题:

1、六孔板中的贴壁细胞需要RIPA裂解,煮沸后,再进行膜蛋白的提取吗?

2、WB上样前,需要加入loADIngbuffer吗?

谢谢各位大神~~

试剂:tris、Hcl、Nacl、脱脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tuwen20、一抗、二抗、显色剂及SDS-PAGE需要的试剂(tris、Hcl、TEMED、SDS、过硫酸铵、丙烯酰胺、N,N-甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、非预染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考马斯亮蓝R250)、预染蛋白Marker
耗材:滤纸、PVDF膜或NC膜、乳胶手套等
仪器:电泳仪、电转槽、摇床、制冰机(电转时需冰浴)等
这个膜的两面是不一样的。一面粗糙,一面光滑吧。如果这个算正反面的话,那么就是有正反面的。但是对于WB来说在转膜前是没有正反面之分的。你用粗糙的面贴着胶转膜和光滑的面贴着胶转膜,蛋白都能转到膜上去的。不会因为你膜贴反了而蛋白转膜不成功啥的。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶,内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
当然可以鉴别多种蛋白,属于半定量分析方法。跑胶后转膜,然后加一抗二抗检测第一种蛋白,曝光过后,洗几遍加另一种一抗和二抗,以此类推就可以
据我所知不是所用的单克隆抗体都适合用WB来检测的。有些抗体经过SDS-PAGE后蛋白会有些变性,这部分抗原决定簇会被破坏。然后你用一抗去识别是识别不出来的,也就是印染后会没有条带的。
当然做都是可以做,需要带上阴性和阳性的对照组,以区别出是抗体制备的问题还是抗原决定簇被破坏的问题。
这个蛋白做了一个多月了,一直没有结果,我是用碧云天RIPA+PMSF提取的,请问这种膜蛋白需要用专门的膜蛋白提取试剂盒提蛋白吗?求指教求指教
要检测Foxp3如何选择WB的试剂盒,什么叫稀释倍数呢。这个试剂盒里一般都有什么。国内与国外应该质量差不多吧,我中山的怎么样