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Anoptimizedreversetranscriptasesystemfortheproductionoffull-lengthCDNA.
Producefull-lengthcDNAwithRNAseH-mutant- Achievehigherspecificityatelevatedtemperatures,upto55°C
EpiScript™RnaseH-ReverseTranscriptase(EpiScriptRT),analternativetoSuperScript®IIReverseTranscriptase,isarecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity.Itishighlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromlongRNAtemplates.EpiScriptRTiscapableofproducingcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNAforreal-timeRT-PCR(qRT-PCR)analysisandotherapplications.
Applications
- First-strandcDNAsynthesisforsubsequentPCRorreal-timePCR.
Benefits
- RecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity
- Activeattemperaturesupto55°C
- Highlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNA
- BestvalueinanRNaseH-ReverseTranscriptase
Storage:Storeonlyat-20°Cinafreezerwithoutadefrostcycle.
StorageBuffer:EpiScriptRTissuppliedina50%glycerolsolutioncontaining50mMTris-HCl(pH7.5),100mMsodiumchloride,1mMDTT,0.1mMEDTA,and0.1%Triton®X-100.
UnitDefinition:OneunitofEpiScriptRTcatalyzestheincorporationof1nmolofdTTPintoacid-insolublematerialin10minutesat37°Cusingsaturatingamountsofoligo(dT)-primedpoly(rA)astemplate.
ContaminatingActivityAssays:EpiScriptRTisfreeofdetectableexonuclease,endonuclease,andRNaseactivities.
Figure1.EpiScript™ReverseTranscriptaseperformedequallyorbetterthancomparablereversetranscriptasesfromothervendors.First-strandsynthesisreactionswereassembledaccordingtomanufacturer´sspecifications.InputRNAwas1µgofJurkattotalRNA(Ambion®).Reactionswereprimedusing50ngofpoly-T(16-18)DNA.2ndstrandqPCRwasperformedusingBio-RadiQSYBRmastermixandgene-specificprimersthatyielded250-350bpamplicons.Reactionswererepeated4-fold.PGDF-R(PlateletDerivedGrowthFactorReceptor),TNF(TumorNecrosisFactor),IL-1b(Interleukin-1beta),IL-2(Interleukin2).ImagecourtesyofMatthewKellinger,Illumina®Inc.
 |  | Figure2(clicktoenlarge).EpiScript™ReverseTranscriptaseproducessimiliartranscriptcoverageindependentoftranscriptlength.EpiScriptwasusedtoprimefirststrandcDNAeitherfromtotalRNAusingoligo-dT(leftpanel)orpolyA+selectedRNAwithrandomhexamers(rightpanel).ThecDNAwasconvertedintoIllumina®-compatIBLelibrariesandsequenced.Thereadswerealignedtotranscriptsbaseduponvariouslengthclassesandreaddensityplottedrelativetothepercentdistancefromthe5´endofthetranscripts;0%referstothe5´endand100%isthe3´end.Asexpected,oligo-dTprimingresultsinamorepronounced3´biasthanrandompriming. |
 | Figure3.UseofEpiScript®ReverseTranscriptaseforfirststrandcDNAresultsindetectionofsimilartranscriptcategoriesindependentofinputamount.EpiScriptRTwasusedtorandomprime5ngor50pgofhumantotalRNAandthecDNAwasconvertedintolibrariesforIllumina®sequencing.ReadswerealignedusingTophatandannotatedwithCufflinksandthepercentageofeachmajorcategoryisvisualizedasapiechart.Equivalentresultsareobservedforboth5ngand50pgofinputRNA. |
ORDERINFORMATION
Contents:EpiScriptRNaseH-ReverseTranscriptase,10XReactionBuffer,100mMDTT.蚂蚁淘电商平台
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-09-14
2013 年 12 月，中国报道了首例人感染 H10N8 甲型禽流感病毒死亡病例，患者为一名 73 岁女性，临床诊断为重症肺炎，并伴有高血压、心脏病、重症肌无力等基础性疾病，免疫水平低下，有活禽市场暴露史。患者住院 9 天后因呼吸衰竭、休克死亡，所有密切接触者未出现异常。 从该例患者体内分离出的 H10N8 型禽流感病毒亚型通常见于迁徙性鸟类以及活禽市场，虽然尚未肯定人 查看更多
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2021-08-26
E.片段之间有待连接封口 请帮忙给出正确答案和分析,谢谢! 点击查看答案4 大肠杆菌RNA聚合酶全酶由___因子和核心酶___所组成。 请帮忙给出正确答案和分... 查看更多
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2021-08-28
上海北诺生物科技有限公司在发布的M-MLV反转录酶供应信息，浏览与M-MLV反转录酶相关的产品或在搜索更多与M-MLV反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
AMV反转录酶是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的solarbio品牌的试剂，产品来源于solarbio。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的AMV反转录酶试剂销售服务商之一，在北京等地方销售AMV反转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业AMV反转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的AMV反转录酶产品 查看更多
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2021-08-30
反转录酶M-MLV使用说明（Promega） 1、产品简介莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV RT）是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）转录为cD 查看更多
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2021-09-13
日前，美国最高法院裁定，天然的人类基因 DNA 序列不能申请专利，但是人工合成的、去除了内含子序列的 cDNA 不是自然产物, 因此仍有申请专利的资格。 对医学影响有限 这个裁定主要围绕 BRCA1 和 BRCA2 基因的专利效用，该基因的突变可大大增加个体罹患乳腺癌和卵巢癌的风险。美国犹他州的巨数遗传公司是第一个对这两个基因进行测序的公司，并在 1996 年申请了专利，从 查看更多
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2021-09-10
近日，来自德国海德堡 (Heidelberg) 欧洲分子生物学实验室 (EMBL) 的科研人员首次揭开了包被反转录病毒遗传物质的外壳的精细结构，比如 HIV，当这些反转录病毒复制成很多拷贝，大量组装过程中这种外壳结构显得尤为关键，且在病毒的整个生命周期当中，也是一个潜在的易感阶段。研究成果在线发表于《自然》杂志(Nature)，该项研究也为潜在的以病毒外壳为靶点的药物研发提 查看更多
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2021-08-31
新乡智宝生物科技有限公司在发布的m-mlv反转录酶供应信息，浏览与m-mlv反转录酶相关的产品或在搜索更多与m-mlv反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-08-27
本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多
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2021-09-22
丝氨酸/苏氨酸激酶 Akt（又称作蛋白激酶 B 或 PKB）作为一种原癌基因，已经成为医学界主要的关注热点，这是因为它在调控各种不同细胞功能（包括代谢、生长、增殖、存活、转录以及蛋白质合成）方面发挥重要作用。能够激活 Akt 信号级联放大的因子，包括受体酪氨酸激酶、整合素、B 细胞和 T 细胞受体、细胞因子受体、G 蛋白偶联受体，以及其他能够通过磷脂酰肌醇三激酶 查看更多
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2021-09-12
技术文章AMV和M-MuLV在应用上的区别更多逆转录酶文章请点击：http://www.e1617.com/nizhuanlumei-2191/... 查看更多
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2021-09-03
Power M-MLV 反转录酶是由北京百泰克生物技术有限公司代理或销售的Bioteke品牌的试剂，产品来源于中国。北京百泰克生物技术有限公司是中国最权威的Power M-MLV 反转录酶试剂销售服务商之一，在北京等地方销售Power M-MLV 反转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业Power M-MLV 反转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的Power M-MLV 反转录酶产品 查看更多
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商品咨询
人有反转录酶吗,有什么作用 123
zhou431_4312021-08-17
RNA反转录 分子生物 综合其他论坛学术科研互动平台123
2018-02-28
底物应该指的是dNTP吧，以RNA为模板，在反转录酶的作用下合成cDNA。
组织/细胞RNA快速提取试剂盒*,不需要DNA酶消化,直接可用于反转...123
莎莎o4W瓰2021-07-24
反转录酶具有以下那些功能_左手题库123
毛光成2021-08-19
一名两句也说不清楚,请到图书馆或新华书店去查遗传方面的书.我是生物系的.
RNA病毒的复制或逆转录所需的酶是哪里来的?123
先忧后乐者2021-08-20
同学，首先要理解，含有RNA病毒繁殖方式主要有以下几个：RNA病毒，一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞，就直接作为mRNA，翻译出所编码的蛋白质，其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶。然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RNA，最后病毒RNA和衣壳蛋白自我装配成成熟的病毒颗粒。这类病毒很多，如ssRNA噬菌体、脊髓灰质炎病毒、鼻病毒、TMV等。另一类ssRNA病毒，它们的复制特点是病毒颗粒中的ssRNA病毒为负链，进入寄主后不能直接作为mRNA，而是先以负链RNA为模板由转录酶转录出与负链RNA互补的RNA，再以这个互补RNA作为mRNA翻译出遗传密码所决定的蛋白质。这类病毒称之为负链非侵染型病毒，如滤泡性口腔炎病毒、流感病毒、副流感病毒、莴苣坏死黄化病毒等。最后，还有一类特殊的ssRNA病毒即反转录病毒。该类病毒通常引起人和动物的肿瘤，其中包括造成人免疫性缺陷症的艾滋病病毒、白血病病毒、肉瘤病毒等。在它们的髓核中携带反转录酶，能使RNA反向转录成DNA，丰富和发展了分子生物学的中心法则。它们的复制有其特有的特点，一是单链RNA的基因组必须反转录成双链DNA；二是随后这种DNA必须整合到细胞DNA中；三是整合状态长期持续下去并传给子代细胞，也可能转录RNA，生产子代病毒或使细胞转化；四是感染细胞不会死亡，分裂不停止。也就是说这类病毒的潜伏期很长，有时可以终身带毒而不发病。所以说，RNA病毒种类如此多，有的用不着逆转录酶，有的自带逆转录酶，有的则直接利用细胞内现成的逆转录酶。明白了吗？
【求助】反转录后如果没有把酶灭活会怎么样 核酸基因技术讨论版...123
shuixiao19852021-08-21
好多酶的试剂说明书上都要求反应结束后灭活，如fermentas的MLV就是写着，反应结束后70度10分钟灭活，如果反转完了没有这个灭活，直接放冰箱中储存备用，会怎么样？影响后面PCR的扩增吗？
反转录酶的活性有哪些呢? 123
羻龢靛2018-03-26
如RNA解旋酶（RNA helicases）.个人认为应该不存在具有催化活性的DNA,因为根据酶的作用过程,其是要发生构象变化或者能够与底物想结合的,而DNA的双螺旋结构相对较稳定
基因工程复习资料123
外婆桥66L齦2018-03-11
为什么说端粒酶是反转录酶只要是细胞，就得走向衰老，现代研究表明，细胞的衰老和端粒的变短有关系。端粒就是DNA，随着细胞分裂次数的增多，端粒在不断变短，端粒酶就是组织端粒变短的。然而正常细胞中，端粒酶的活性受抑制，端粒酶是怎么染端粒变长的呢？实际上端粒酶是由RNA组成的，可以根据碱基互补配对逆转形成DNA，使得变短的端粒变长。所以说端粒酶可以逆转录形成端粒，使端粒不减短！
在基因工程里什么时候是反转录什么时候是逆转录123
Saydaai2021-07-22
人工合成基因的方法主要有两条途径：一是以目的基因转录成的mRNA为模板，逆转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因；二是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的 mRNA序列，然后按碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学的方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。
逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式，需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别，但是逆转录是RNA类病毒自主行为，在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程；反转录是进行基因工程过程中，人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA，并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程，但地点不同，相对性的来说，逆转录在体内，反转录在体外。
逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式，需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别，但是逆转录是RNA类病毒自主行为，在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程；反转录是进行基因工程过程中，人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA，并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程，但地点不同，相对性的来说，逆转录在体内，反转录在体外。
逆转录四个大步骤热点千牛作业网123
碎裂v42018-03-26
1、使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s
2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL
3、65℃保温5min，然后冰浴5min；
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT（200mM）1μL
逆转录酶（M-MLV）1μL
5、轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s；
6、先在37℃保温1hr，然后70℃保温15min；
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转
2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL
3、65℃保温5min，然后冰浴5min；
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT（200mM）1μL
逆转录酶（M-MLV）1μL
5、轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s；
6、先在37℃保温1hr，然后70℃保温15min；
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转
反转录酶的注意事项123
灰太狼咳卫2352021-08-01
反转录酶
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
RT PCR的反转录酶的选择 123
hemiao6262021-08-16
请问反转录酶AMV和MLV有什么区别？若何选择啊？
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