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Anoptimizedreversetranscriptasesystemfortheproductionoffull-lengthCDNA.
Producefull-lengthcDNAwithRNAseH-mutant- Achievehigherspecificityatelevatedtemperatures,upto55°C
EpiScript™RnaseH-ReverseTranscriptase(EpiScriptRT),analternativetoSuperScript®IIReverseTranscriptase,isarecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity.Itishighlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromlongRNAtemplates.EpiScriptRTiscapableofproducingcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNAforreal-timeRT-PCR(qRT-PCR)analysisandotherapplications.
Applications
- First-strandcDNAsynthesisforsubsequentPCRorreal-timePCR.
Benefits
- RecombinantMMLVreversetranscriptasewithgreatlyreducedRNaseHactivity
- Activeattemperaturesupto55°C
- Highlyefficientatproducingfull-lengthcDNAfromaslittleas50pgoftotalRNA
- BestvalueinanRNaseH-ReverseTranscriptase
Storage:Storeonlyat-20°Cinafreezerwithoutadefrostcycle.
StorageBuffer:EpiScriptRTissuppliedina50%glycerolsolutioncontaining50mMTris-HCl(pH7.5),100mMsodiumchloride,1mMDTT,0.1mMEDTA,and0.1%Triton®X-100.
UnitDefinition:OneunitofEpiScriptRTcatalyzestheincorporationof1nmolofdTTPintoacid-insolublematerialin10minutesat37°Cusingsaturatingamountsofoligo(dT)-primedpoly(rA)astemplate.
ContaminatingActivityAssays:EpiScriptRTisfreeofdetectableexonuclease,endonuclease,andRNaseactivities.
Figure1.EpiScript™ReverseTranscriptaseperformedequallyorbetterthancomparablereversetranscriptasesfromothervendors.First-strandsynthesisreactionswereassembledaccordingtomanufacturer´sspecifications.InputRNAwas1µgofJurkattotalRNA(Ambion®).Reactionswereprimedusing50ngofpoly-T(16-18)DNA.2ndstrandqPCRwasperformedusingBio-RadiQSYBRmastermixandgene-specificprimersthatyielded250-350bpamplicons.Reactionswererepeated4-fold.PGDF-R(PlateletDerivedGrowthFactorReceptor),TNF(TumorNecrosisFactor),IL-1b(Interleukin-1beta),IL-2(Interleukin2).ImagecourtesyofMatthewKellinger,Illumina®Inc.
 |  | Figure2(clicktoenlarge).EpiScript™ReverseTranscriptaseproducessimiliartranscriptcoverageindependentoftranscriptlength.EpiScriptwasusedtoprimefirststrandcDNAeitherfromtotalRNAusingoligo-dT(leftpanel)orpolyA+selectedRNAwithrandomhexamers(rightpanel).ThecDNAwasconvertedintoIllumina®-compatIBLelibrariesandsequenced.Thereadswerealignedtotranscriptsbaseduponvariouslengthclassesandreaddensityplottedrelativetothepercentdistancefromthe5´endofthetranscripts;0%referstothe5´endand100%isthe3´end.Asexpected,oligo-dTprimingresultsinamorepronounced3´biasthanrandompriming. |
 | Figure3.UseofEpiScript®ReverseTranscriptaseforfirststrandcDNAresultsindetectionofsimilartranscriptcategoriesindependentofinputamount.EpiScriptRTwasusedtorandomprime5ngor50pgofhumantotalRNAandthecDNAwasconvertedintolibrariesforIllumina®sequencing.ReadswerealignedusingTophatandannotatedwithCufflinksandthepercentageofeachmajorcategoryisvisualizedasapiechart.Equivalentresultsareobservedforboth5ngand50pgofinputRNA. |
ORDERINFORMATION
Contents:EpiScriptRNaseH-ReverseTranscriptase,10XReactionBuffer,100mMDTT.蚂蚁淘电商平台
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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北京百泰克生物技术有限公司在发布的Thermo M-MLV 反转录酶供应信息，浏览与Thermo M-MLV 反转录酶相关的产品或在搜索更多与Thermo M-MLV 反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-18
AMV反转录酶；Promega原装；M5101是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的solarbio品牌的试剂，产品来源于solarbio。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的AMV反转录酶；Promega原装；M5101试剂销售服务商之一，在北京等地方销售AMV反转录酶；Promega原装；M5101试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业AMV反转录酶；Promega原装；M5101仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的AMV反转录酶；Promega原装；M5101产品 查看更多
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2021-09-01
北京赛百盛基因技术有限公司在发布的M-MLV反转录酶供应信息，浏览与M-MLV反转录酶相关的产品或在搜索更多与M-MLV反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-21
基因工程的关键技术是脱氧核糖核酸的连接和重组，在此过程中一些酶起着至关重要的作用，这些酶统称为基因工程工具酶。工具酶种类繁多、功能各异，主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。其中，以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用最为突出。这些酶具有特异... 查看更多
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2021-08-28
上海北诺生物科技有限公司在发布的M-MLV反转录酶供应信息，浏览与M-MLV反转录酶相关的产品或在搜索更多与M-MLV反转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-17
北京智杰方远科技有限公司在发布的反转录酶III试剂盒供应信息，浏览与反转录酶III试剂盒相关的产品或在搜索更多与反转录酶III试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-09-09
之一 具有高扩增活性，高热稳定性的反转录酶 反转录酶，又称逆转录酶，是依赖RNA为模板的DNA聚合酶的统称。美国科学家H.M.Temin和D.Baltimore在1970年发现了反转录酶，并因此获得了1975年的诺贝尔生理学医学奖。反转录酶的发现对遗传工程技术起来到了巨大的推动作用，是研究真核或者原核生物目的基因，构建cDNA文库等实验不可或缺的工具，与Taq酶等共同构成了现代生物技术的的基础工具酶。 目前已... 查看更多
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2021-09-15
众所周知，外科手术切除是早期单个原发性非小细胞肺癌（NSCLC）的首选治疗方案。饶是如此，术后患者仍有 30% 发生远处转移或局部复发。之前许多文献表明，术中肿瘤细胞的脱落可能是复发潜在因素之一。所以，部分研究者对定量检测肿瘤细胞在术中脱落或转移颇感兴趣。据某些文献报道显示，检测脱落的肿瘤细胞主要手段有细胞形态学检查、免疫组化染色或直接用反转录 查看更多
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2021-08-30
反转录酶M-MLV使用说明（Promega） 1、产品简介莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶（M-MLV RT）是一种RNA依赖的DNA聚合酶，能使mRNA（>5kb）转录为cD 查看更多
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2021-09-16
根据吉利德年度报表显示，吉利德有 7 种在售的艾滋病药物，品牌名分别为：Atripla、Truvada、Viread、Complera、Vitekta、Tybost、Stribild。预计在接下来的 5 年内，吉利德艾滋病药物将继续雄霸艾滋病医药市场，到 2020 年在年度报表中公布的在售艾滋病药物市场份额达逼近 100 亿美元。1. 四丸合一药物 Stribild 吉利德的 Stribild 在 2012 年 8 月 27 日获得美国 FDA 批准上市，由替诺福韦酯（T 查看更多
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2021-08-26
E.片段之间有待连接封口 请帮忙给出正确答案和分析,谢谢! 点击查看答案4 大肠杆菌RNA聚合酶全酶由___因子和核心酶___所组成。 请帮忙给出正确答案和分... 查看更多
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2021-09-02
反转录病毒原液检测实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。辅助病毒是一种有时存在于无复制能力病毒原液中的有复制能力的病毒，辅助病毒的存在在动物的感染及谱系分析中会成为问题。 查看更多
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AMV,MMLV,SSⅢ三种逆转录酶哪有什么不同123
E澈烾2018-03-30
反转录酶（Reverse transcripatse）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
认知神经科学课后习题答案123
zihuadiding2021-08-14
反转录酶的注意事项123
灰太狼咳卫2352021-08-01
反转录酶
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面：
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中，在缓冲液和还原剂（如DTT）存在的条件下加入，因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA，B，C对RNA的降解，并不能防止皮肤上的RNase，因此尽管使用了这些抑制剂，也要小心不要从手指上引入RNase，实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时，要求RNA必须有PolyA，所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT，所以对RNA样品的质量要求较高，最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应，建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT，尤其适合模板丰度很低的情况（比如某个gene表达量很低）。选择随机引物时，第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板，然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系，一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng，如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng，可能会导致小片段产物（<500bp）的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT，引物设计质量影响RT的结果，而且不同引物退火温度本来就不相同，所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择，一般不推荐。向左转|向右转
TAKARA反转录酶4度能放多久 分子生物 存档旧帖 论坛...123
毛线专属系列652018-02-27
TAKARA反转录酶4度能放多久
没有序列识别的功能，他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接，也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶（Reversetranscripatase）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
没有序列识别的功能，他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接，也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶（Reversetranscripatase）是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
【求助】大片段DNA(6.4K)与载体连接所需的载体,反转录酶,PCR聚合...123
weile_02021-08-05
各位大侠：小弟最近做个长片段的CDNA与T载体的连接，片段大小6.4K，载体选用的是pUC19和pGEMT-easy,反转录酶用的是RevertAidTirstStrandcDNASynthesisKit(#K1621)，CDNA第二链的扩增用的是LATaq。我是用纯病毒的RNA做模板，操作步骤严格按照说明做的，也曾经有一次获得过电泳图清晰显示的是全长6.4KB左右的片段，与载体连接，结果筛选到的几个克隆，插入的片段仅有2KB左右，奈何？可最近几次再用此反转录试剂盒却不能得到所需片段。在此，小弟想问问大家，你们是否遇到同样的问题，是如何解决的？所用的试剂（载体和酶的选择）和方法是什么，可以告诉后来者，共同进步吧。
反转录酶具有以下那些功能_左手题库123
毛光成2021-08-19
一名两句也说不清楚,请到图书馆或新华书店去查遗传方面的书.我是生物系的.
组织/细胞RNA快速提取试剂盒*,不需要DNA酶消化,直接可用于反转...123
莎莎o4W瓰2021-07-24
【求助】反转录酶必须要引物吗_问答详情_反转录酶_核酸酶类_...123
jinhoucong2021-08-18
我提取的RNA反转录，用的是0ligdT为引物，但是我能用反转录为模板扩出18S的rRNA来。我查了下反转录需要引物，我用的引物是0ligdT，本来只能反转录mRNA的啊，拿扩18S rRNA中间片断的引物不应该能从我的反转录产物中扩出18S中间片断来啊？
【求助】大家一般用什么RTPCR试剂盒或反转录酶? PCR技术讨论...123
vulgaris2021-07-23
INTERNATIONAL SERVICE OIL :: Καλώς ήρθατε123
MLIUGLDA83G2018-03-28
那你做表达量的时候就不准了啊 不加DNA酶将原有的DNA消化掉，那么你做RT-PCR这个就没意义了 逆转录得到的cDNA和原有的DNA是一样的序列
【求助】反转录后如果没有把酶灭活会怎么样 核酸基因技术讨论版...123
shuixiao19852021-08-21
好多酶的试剂说明书上都要求反应结束后灭活，如fermentas的MLV就是写着，反应结束后70度10分钟灭活，如果反转完了没有这个灭活，直接放冰箱中储存备用，会怎么样？影响后面PCR的扩增吗？
AMV 反转录酶 AMV Reverse Transcriptase|基因有限公司123
joycewang2021-07-28
我是新手，现在想要扩增一个目的片段为2300的RNA病毒的一部分，该用哪个公司的AMV反转录酶比较好呢？PCR扩增时我准备用TaKaRa的高保真Taq酶。谢谢！
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