
Overview:
AMPK is a heterotrimer protein kinase consisting of a α catalytic subunit, and non-catalytic β and γ subunits. AMPK is an important energy-sensing enzyme that monitors cellular energy status (1). In response to cellular metabolic stresses, AMPK is activated and phosphorylates and inactivates acetyl-CoA carboxylase (ACC) and beta-hydroxy beta-methylglutaryl-CoA reductase (HMGCR), key enzymes involved in regulating biosynthesis of fatty acid and cholesterol (2).
Gene Aliases:
Subunit A1: PRKAA1, MGC33776, MGC57364Subunit B1: PRKAB1, AMPK, HAMPKb, MGC17785Subunit G1: PRKAG1, AMPKG, MGC8666
Genbank Number:
NM_006251NM_006253NM_002733
References:
1. Minokoshi, Y. et al:AMP-kinase regulates food intake by responding to hormonal and nutrient signals in the hypothalamus. Nature 428: 569-574, 2004.2. Hardie, D G. et al: The AMP-activated protein kinase--fuel gauge of the mammalian cells Eur J Biochem. 1997 Jun 1;246(2):259-73.
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2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL
3、65℃保温5min,然后冰浴5min;
4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份
RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL
10×M-MLVReactionBuffer2μL
DTT(200mM)1μL
逆转录酶(M-MLV)1μL
5、轻轻混匀后,然后2000rpm离心20s;
6、先在37℃保温1hr,然后70℃保温15min;
7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。向左转|向右转
没有序列识别的功能,他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录与反转录严格意义上来说没有什么区别,但是逆转录是RNA类病毒自主行为,在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程;反转录是进行基因工程过程中,人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA,并以之为模板人工合成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程,但地点不同,相对性的来说,逆转录在体内,反转录在体外。

