| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 501/520 |
| MW | N/A |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | F/D/L |
| Category | NucleicAcidDetection DNADetection |
| Related | LabelingCells FluorescenceImaging BiochemicalAssays |
1.Preparing1XAssayBuffer
Preparea1XAssaybufferbydilutingtheconcentratedbuffer20-foldwithsterile,distilled,DNase-freewater.
2.PreparingHelixyteGreen™workingsolution
PrepareHelixyteGreen™workingsolutionbymakinga200-folddilutionoftheconcentratedDMSOsolutionin1Xassaybuffer.Forexample,toprepareenoughworkingsolutiontoassay10samplesina2mLfinalvolume,add50µLofHelixyteGreen™(ComponentA)into10mLofAssayBuffer(fromStep1). Protecttheworkingsolutionfromlightbycoveringitwithfoilorplacingitinthedark.
Note1:Werecommendpreparingthissolutioninaplasticcontainerratherthanglass,asthedyemayadsorbtoglasssurfaces.
Note2:Forbestresults,thissolutionshouldbeusedwithinafewhoursofitspreparation.
3.PrepareserialdilutionsofdsDNAstandard(0to2µg/mL):
3.1 Forhighrangestandardcurve:add30μLof100μg/mLdsDNAstocksolution(ComponentC)to1.47mLof1XAssaybuffer(FromStep1)tohave2000ng/mLdsDNAsolution,andthenperform1:2and1:10serialdilutionstoget1000,100,10,1and0ng/mL.
3.2 Forlowrangestandardcurve:add40μLof2μg/mLdsDNAstocksolution(FromStep3.1)to1.56mLof1XAssaybuffer(FromStep1)tohave50ng/mLdsDNAsolution,andthenperform1:2and1:10serialdilutionstoget25,2.5,0.25,0.025and0ng/mL
4.RundsDNAassay:
4.1 Add1mLofHelixyteGreen™workingsolution(fromStep2)toeachcuvettecontaining1mLofthedsDNAstandard,blankcontrol,andtestsamplestomakethetotaldsDNAassayvolumeof2mL/cuvette.
4.2 Incubatethereactionatroomtemperaturefor5to10minutes,protectedfromlight.
4.3 MonitorthefluorescenceincreasewithaspectroflurometeratEx/Em=490/525nm.
Note:Tominimizephotobleachingeffects,keepthetimeforfluorescencemeasurementconstantforallsamples.
4.4 Thefluorescenceinblankwells(withtheAssaybufferonly)isusedasacontrol,andissubtractedfromthevaluesforthosecuvetteswiththedsDNAreactions.TheDNAconcentrationofthesamplesisdeterminedfromthestandardcurvegeneratedinDNAStandardCurve.
| References&Citations |  PrinterFriendlyVersion |
1. PetersonEJ,KireevD,MoonAF,MidonM,JanzenWP,PingoudA,PedersenLC,SingletonSF.(2013)InhibitorsofStreptococcuspneumoniaesurfaceendonucleaseEndAdiscoveredbyhigh-throughputscreeningusingaPicoGreenfluorescenceassay.JBiomolScreen,18,247.
2. ChenY,SonnaertM,RobertsSJ,LuytenFP,SchrootenJ.(2012)ValidationofaPicoGreen-basedDNAquantificationintegratedinanRNAextractionmethodfortwo-dimensionalandthree-dimensionalcellcultures.TissueEngPartCMethods,18,444.
3. MorenoLA,CoxKL.(2010)QuantificationofdsDNAusingtheHitachiF-7000FluorescenceSpectrophotometerandPicoGreendye.JVisExp.
4. DraganAI,Casas-FinetJR,BishopES,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)CharacterizationofPicoGreeninteractionwithdsDNAandtheoriginofitsfluorescenceenhancementuponbinding.BiophysJ,99,3010.
5. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationtofastandultra-sensitivepg/mlDNAquantitation.JImmunolMethods,362,95.
6. ABIodunOO,GbotoshoGO,AjaiyeobaEO,HappiCT,HoferS,WittlinS,SowunmiA,BrunR,OduolaAM.(2010)ComparisonofSYBRGreenI-,PicoGreen-,and[3H]-hypoxanthine-basedassaysforinvitroantimalarialscreeningofplantsfromNigerianethnomedicine.ParasitolRes,106,933.
7. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationfordouble-strandedDNAquantification.AnalBiochem,396,8.
8. HoldenMJ,HaynesRJ,RabbSA,SatijaN,YangK,BlasicJR,Jr.(2009)FactorsaffectingquantificationoftotalDNAbyUVspectroscopyandPicoGreenfluorescence.JAgricFoodChem,57,7221.
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10. RenX,XuQH.(2009)Label-freeDNAsequencedetectionwithenhancedsensitivityandselectivityusingcationicconjugatedpolymersandPicoGreen.Langmuir,25,43.
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
1）我们提供反应荧光探针和发光探针，生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物；2）我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白，核酸和活细胞。3）我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶，特别是检测水解酶和氧化还原酶类；4）我们致力于开发用于信号转导研究的试剂；5）我们提供生理和神经探针，特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
作为AATBioquestInc.的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品，同时更为您售前售后全面技术支持。
AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证.pdf(17431.6k)
两个意义不一样啊，定性是确定你抗体是阴还是阳的，如果阳证明2个情况，一个是你感染了丙肝病毒，另一个是你曾经感染过这个病毒，现在已经好了。但是到底是哪个情况还要进一步做定量测试既病毒RNA检测。如果这个测试值在最低线以下就证明你现在没事，不具有传染性也不是患者只是携带者；如果高于最低线那你就是患者了，就需要治疗
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
EliKine™ 人 肝细胞生长因子 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 干扰素-α ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 干扰素-γ ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 白介素-1α ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 白介素-22 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 转化生长因子-β1 ELISA定量试剂盒
EliKine™ 小鼠 肿瘤坏死因子-α ELISA定量试剂盒
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EliKine™ 大鼠 白介素-1β ELISA定量试剂盒
EliKine™ 人 促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒
谢谢谢
1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
只要引物设计的可以在基因组上做，那么理论上是没问题的！
只需要用RT-PCR荧光定量试剂盒里面的第二个，专门用来做Real-timePCR的那些试剂就可以了！
