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Cas先生 XXXXXXXXXXX 网易博客
来自 : mayitao
货号:YB-110173
样本:血清/组织/尿液
标记物:见说明书
应用:科研
检测方法:酶联免疫
检测限:见说明书
供应商:蚂蚁淘生物
数量:大量
尾加压素免疫试剂盒说明书
          UrotensinⅡ HY-10173 RIA KIT
 
      尾加压素(UrotensinⅡUⅡ)又称硬骨鱼紧张肽Ⅱ,是迄今发现人体内最强的缩血管活性肽,能刺激血管平滑肌细胞增殖。作为一种环形结构调节肽,由十一个氨基酸组成,分子量为1388Da。最初从鱼的脊椎尾部下垂体中分离出来,UⅡ受体是一种孤儿性G蛋白偶联受体GRP14 ,其主要分布在心血管组织中,在肺部及神经系统亦有分布,最近研究发现,在人体内存在UⅡ除神经组织外,血管尤其是粥样硬化的脂质沉着区富含UⅡ。在正常人肾组织中UⅡ主要存在于肾小管和集合管上皮细胞内,尤其以远曲小管最为明显,Shenouda等总结认为,在正常人肾脏和肾癌中有丰富的UⅡ表达,这项研究表明:具有血管活性和介导生长作用的肽类UⅡ参与了人类肾脏系统的病理生理过程。体外实验表明:UⅡ可使大鼠心主动脉收缩;是猕猴体内最强的血管收缩剂。有报道在人类第三号染色体短臂上首次定位了与中国人Ⅱ型糖尿病遗传易感性连锁的基因区发现UⅡ基因的一个遗传变异与Ⅱ型糖尿病相关,并且很有可能是Ⅱ型糖尿病相关基因中致病基因之一。
标本采集:采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml(含150IU以上)和10%EDTA.Na230uL,采血后立即置冰中,30分钟内4℃下2000转/分,离心15分钟取血浆置-20℃待测,可保存3-6个月。测定前,血浆标本实验时推荐过C18拄。
该药盒主要应用范围:
²       心脑血管疾病研究
²       Ⅱ型糖尿病研究
²        内分泌系统、神经系统研究
药盒组成:
1、UⅡ标记一瓶。 2、UⅡ抗体一瓶。
3、缓冲液一瓶。4、分离剂(第二抗体)一瓶。
1、  UⅡ标准品8瓶:1、2、4、8、16、32、64、128pmol/L。
尾加压素免疫试剂盒说明书测定方法:             
                   UrotensinII RIA 操作程序      单位:ul
            ————————————————————————————
              试  剂     T    NSB     S0    S1~S6    样 品
            ————————————————————————————
              缓冲液   ——   200    100     ——      ——
              标准品   ——   ——   ——    100       ——
              样   品   ——   ——   ——    ­——      100
              抗   体   ——   ——    100     100      100
            ————————————————————————————
                             混匀,4℃保温24小时
             ————————————————————————————
            125I-UⅡ   100     100      100     100      100
            ————————————————————————————
                             混匀,4℃保温24小时
           ————————————————————————————
              分离剂  ——   500     500     500      500
            ————————————————————————————
      混匀,室温静置90分钟,3500转/分离心15分钟,去上清,测沉淀CPM。
 
 
尾加压素免疫试剂盒说明书 结果计算
   以N/T、B/T计算NSB,S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
  注意事项:
     本月药盒抗体每瓶用         ml缓冲液稀释
     本月药盒标记每瓶用         ml缓冲液稀释
 本月标准品每瓶用           ml去激素血清稀释     
本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
附:血浆标本在实验时最好过柱,其步骤:
  1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A),在4℃下3500转/分离心20分钟,取上清。
  2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA,即为缓冲液B,将缓冲液B3ml对Sep-PakC18 柱进行平
     衡,接着用缓冲液A3ml冲洗。
  3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-PakC18柱中。
  4、用缓冲液A 5ml以1ml/2分钟速度淋洗Sep-PakC18 柱。
  5、再用缓冲液B3ml淋洗Sep-PakC18,速度为1ml/3分钟,并收集上述淋洗液。
  6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中,-42℃冷冻干燥,备用。
  7、取干燥后的西林瓶用250ul 0.05M PH7.4PB进行溶解,并在振荡器上振荡3分钟。实
     验时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。
   8、结果计算:最终浓度×5.0
    Sep-PakC-18:Waters.inc.  Massachusetts.USA    TFA:SIGMA.CO.USA  药盒不提供上述二种试剂(或材料)。
 
  正常参考值:2.01±0.45pmol/L(n=50)
  本月药盒参考数据:
   —————————————————————————————————————————
          T      NSB     S0             S      S2        S      S4        S5     
   —————————————————————————————————————————
   CPM
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            N/T%         B0/T%       B/B0 %  
   —————————————————————————————————————————
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温馨提示:不可用于临床治疗。
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