请使用支持JavaScript的浏览器! 人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)ELISA试剂盒 说明书 ELISA..._蚂蚁淘,【正品极速】生物医学科研用品轻松购|ebiomall -蚂蚁淘商城
当前位置: > 首页 > 技术文章 >
人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)ELISA试剂盒 说明书 ELISA...
来自 : mayitao
货号:xY-10153
英文名:cAMPkit
                               环磷酸腺苷放免试剂盒操作说明书
CAMP(HY-10153)RIAKIT
一、        药物供应试验
    1.BSA1瓶(用于配制0.2%BSA的醋酸缓冲液):溶于15 毫升50mMPH4.75
的醋酸缓冲液(配法见后)
2.乙酰化剂试剂:使用前将三乙胺和醋酐混匀即可(三乙胺和醋酐各一瓶)
3.125I-CAMP1瓶:使用时用50mM醋酸缓冲液10毫升稀释标记品(约2万CPM左右/0.1ml).
4.CAMP标准1瓶:取100 微升,用2.6 毫升50mM醋酸缓冲液稀释为2pmol/0.1ml,然后倍比稀释成8个浓度点:1、0.5、0.25、0.125、0.062、0.031、0.016、0.008pmol/0.1ml
(B1~B8)。
5.CAMP抗血清一瓶:使用时用含0.2%BSA的醋酸缓冲液13毫升溶解
6.羊抗兔IgG血清1瓶,每瓶用10ml生理盐水溶解即可,4℃保存。
7.正常兔血清1ml,用10ml生理盐水溶解即可4℃保存。
8、EDTA抗凝剂1瓶。
9、醋酸缓冲液1瓶:1:4稀释(1份该液加3份蒸馏水)。
环磷酸腺苷放免试剂盒二、操  作
                         CAMP RIA加液程序   (单位:ul)
          ————————————————————————————
             试  剂     T    NSB     B0    S1~S8     样 品
          ————————————————————————————
             醋醋缓冲液 ——   200     100    ——     ——
             标准品   ——   ——   ——    100      ——
             样       品   ——   ——   ——   ——      100
             乙酰化试剂 ——     5         5      5        5
             抗 血 清   ——   ——    100    100      100
             125I-CAMP 100    100     100    100      100
          ————————————————————————————
                                充分混匀,4℃  过夜。
          ————————————————————————————
             正常兔血清  100    100     100    100     100
            羊抗兔IgG   100    100     100    100     100
             ————————————————————————————
                                 充分混匀,4℃  过夜。
              ————————————————————————————
 摇匀,室温放置2~3h,3000rpm离心15分钟,吸去上清,在γ计数器上测定沉淀CPM数。
 
环磷酸腺苷放免试剂盒三、计算
     NSB为非特异结合管,标准曲线及样本测得值均需减去NSB值,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数纸上绘制标准曲线,并查出样品值。或由γ计数器预先编制得程序,直接给出有关参数、标准曲线及样品浓度。或从EXEL表格中的直线回归方法计算。所得结果乘以稀释倍数即可。
 
四、样品收集
 
1、需配试剂
1) EDTA抗凝剂。取9.3克EDTA二钠盐加入1mol/L  NaOH溶液25ml,溶解后加水到50ml.。
2) 50mMPH4.75醋酸缓冲液,(含4mMEDTA):取27.22克NaAc.3H20溶于1000ml蒸馏水,即为0.2M NaAc,用冰醋酸配制0.2M醋酸,然后取410毫升0.2MHAC和590毫升0.2MNaAc混匀,测PH值调到PH4.75,然后每1000毫升溶液加入5.95克EDTA二钠盐溶解即可.此溶液为200Mm pH4.75的醋酸缓冲液,EDTA为16mM。使用时将该液1:4稀释。(1份该液加3份蒸馏水)即成50mM pH4.75醋酸缓冲液,含EDTA4Mm.
环磷酸腺苷放免试剂盒2、血样本处理
1) 取静脉血1~2ml,注入含DETA抗凝剂50ul的试管中,摇匀,一小时内离心4℃,2000rpm离心10min,分离血浆,—20℃保存,严禁反复冻融。
2) 血浆处理:取0.1ml血浆加入2ml无水乙醇,振摇1分钟,静置5分钟,3000转/分离心10分钟。将上清液到入指形管或青霉素小瓶,残渣再加入75%乙醇1ml,匀浆,3000rpm离心10分钟。合并上清液,于60℃烤箱中吹干,残渣放于4℃保存。测量时用1ml醋酸缓冲液溶解,然后取0.1ml测量,此时稀释倍数为100。结果×100即为pmol/ml.
 
3、组织样品处理
取组织50毫克左右放入盛有2ml冷的50mM PH4.75醋酸缓冲液的试管内(冰浴),匀浆,加入2ml无水乙醇,混匀,静止5分钟,3500转离心15分钟,将上清液收集在青霉素小瓶内,再用75%乙醇2ml洗沉淀,匀浆分散,混匀,3500转离心15分钟。合并上清液,60℃烤箱中吹干,残渣放于4℃保存。测量时用1ml醋酸缓冲液溶解,然后取0.1ml测量。
 4、对于血、组织样本,不同血样或组织中的CAMP或CGMP含量不同,测试前最好预实验确定样品稀释度。
 
五、正常人血浆参考值:
CAMP:23.1±7.7pmol/ml
xy-E11224 人类似RIKENcDNA2610307008基因ELISA试剂盒 PeoplelikeRIKENcDNA2610307008geneELISAkit
xy-E11225 人类似RIKENcDNA2010109K09基因ELISA试剂盒 PeoplelikeRIKENcDNA2010109K09geneELISAkit
xy-E11226 人ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒 Humanrashomologgenefamilymembersb(RHOB)ELISAkit
xy-E11227 人假定蛋白LOC677340ELISA试剂盒 HumanhypotheticalproteinLOC677340ELISAkit
xy-E11228 人假定蛋白LOC433328ELISA试剂盒 HumanhypotheticalproteinLOC433328ELISAkit
xy-E11229 人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒 Humanmyeloiddifferentiationprimaryresponsegenefactor88(MYD88)ELISAkit
xy-E11230 人干扰素活化基因205(Ifi205)ELISA试剂盒 Activationofhumaninterferongene205(Ifi205)ELISAKit
xy-E11231 人组织相容性2-K1-K区(H2-K1)ELISA试剂盒 Histocompatibility2-K1-Kregion(H2-K1)ELISAkit
xy-E11232 人白细胞免疫球蛋白受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒 Humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4(LILRB4)ELISAkit
xy-E11233 人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)ELISA试剂盒 HumanC-typelectindomainfamily4memberE(CLEC4E)ELISAkit
xy-E11234 人假定蛋白LOC677168ELISA试剂盒 HumanhypotheticalproteinLOC677168ELISAkit
xy-E11235 人淋巴细胞抗原6复合物基因座A(Ly6a)ELISA试剂盒 Humanlymphocyteantigen6complexlocusA(Ly6a)ELISAkit
xy-E11236 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)ELISA试剂盒 HumaneosinophilsRNAenzymehydrolysisrelatedfamilymember1(EAR1)ELISAkit
xy-E11237 人混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)ELISA试剂盒 Humanhybridseriesofproteinkinase-likedomain(MLKL)ELISAkit
xy-E11238 人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒 Humanperoxisomeproliferator-activatedreceptorγcoactivator1α(PPARGC1)ELISAkit
xy-E11239 人类似cDNA顺序BC027382ELISA试剂盒 PeoplelikecDNAsequenceBC027382ELISAkit
xy-E11240 人类似RIKENcDNA4931408D14基因ELISA试剂盒 PeoplelikeRIKENcDNA4931408D14geneELISAkit
xy-E11241 人REST协阻抑因子3(RCOR3)ELISA试剂盒 Whoco-repressorRESTfactor3(RCOR3)ELISAkit
xy-E11242 人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)ELISA试剂盒 Onesetofproteinsubfamilymembers11(COLEC11)ELISAkit
xy-E11243 人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA试剂盒 Α1βhumanglycoprotein(α1β-GP)ELISAKit
xy-E11244 人可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)ELISA试剂盒 Humansolubletriggeringreceptorexpressedonmyeloidcells-1(sTREM-1)ELISAKit
 
温馨提示:不可用于临床治疗。
免责声明 本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
相关文章