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Gibson Assembly was developed by Dr. Daniel Gibson and his colleagues atthe J. Craig Venter Institute and licensed to NEB by Synthetic Genomics, Inc. Itallows for successful assembly of multiple DNA fragments, regardless of fragmentlength or end compatibility. It has been rapidly adopted by the syntheticbiology community due to its ease-of-use, flexibility and suitability for large DNAconstructs.Gibson Assembly efficiently joins multiple overlapping DNA fragments in asingle-tube isothermal reaction (1,2). The Gibson Assembly Master Mix includesthree different enzymatic activities that perform in a single buffer:- The exonuclease creates single-stranded 3´ overhangs that facilitate theannealing of fragments that share complementarity at one end (overlap region).
- The proprietary DNA polymerase fills in gaps within each annealed fragment.
- The DNA ligase seals nicks in the assembled DNA.
Overview of the Gibson Assembly CloningMethod
Specification:
10 μl of 2X Gibson Assembly Master Mix was incubated with 6 fragments(5 fragments of 400 bp and one of 2,780 bp, with 40 bp overlap, 0.05 pmoleach) in a final volume of 20 μl at 50°C for 60 minutes. NEB 5-alpha CompetentE. coli (NEB #C2987) were transformed with 2 μl of the master mix/fragmentmixture using the transformation protocol on page 12. Greater than 100white colonies were observed when 1/10 of the outgrowth was spread on anampicillin plate with IPTG/Xgal and incubated overnight.Overview of Gibson Assembly Cloning Kit Protocol:- Design primers to amplify fragments (and/or vector) with appropriateoverlaps
- PCR amplify fragments using a high-fidelity DNA polymerase.
- Prepare linearized vector by PCR amplification using a high-fidelity DNA polymerase or by restriction digestion.
- Confirm and determine concentration of fragments and linearized vector using agarose gel electrophoresis, a NanoDrop™ instrument or other method.
- Add fragments and linearized vector to Gibson Assembly Master Mixand incubate at 50°C for 15 minutes to 1 hour, depending on number offragments being assembled.
- Transform into NEB 5-alpha Competent E. coli (provided) or use directly inother applications.
- This product is related to the following categories:
- DNA Assembly, Cloning and Mutagenesis Kits Products
- This product can be used in the following applications:
- Gibson Assembly®
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ebiomall.com
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-07-30
上海如吉生物科技发展有限公司在发布的核糖核酸酶A(牛胰）RNAase A供应信息，浏览与核糖核酸酶A(牛胰）RNAase A相关的产品或在搜索更多与核糖核酸酶A(牛胰）RNAase A相关的内容。 查看更多
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2018-07-17
本页关键字：amresco去除核酸酶纸巾 amresco报价 amresco去除核酸酶纸巾，amresco报价。提供amresco去除核酸酶纸巾报价、咨询及技术服务，欢迎来电订购amresco去除核酸酶纸巾。中国试剂网经营实验试剂、实验耗材、实验仪器及实验技术服务。公司简介 Amresco 是全球著名的生化试剂生产商，其产品种类齐全，质量稳定，性价比好。深受广大用户的喜爱。Amresco公司来自美国，成立于 1976 年，为高质量生化试 查看更多
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2021-07-26
上海研生实业有限公司所提供的去核酸酶试剂质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-08-29
核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶，可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3'端，切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3'磷酸及末端带嘧啶3'磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas et al.1982)所抑制。核糖核酸酶A用途生化研究，测定核酸的结构RNase 保护检测去除非... 查看更多
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2018-12-18
核酸酶 查看更多
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2018-12-18
核酸酶 查看更多
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2019-04-19
biotechrabbit品牌产品介绍|代理商整理 查看更多
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2021-08-05
上海优予生物科技有限公司在发布的9001-99-4核糖核酸酶A(美仑)；RNase A;核糖核酸酶I供应信息，浏览与9001-99-4核糖核酸酶A(美仑)；RNase A;核糖核酸酶I相关的产品或在搜索更多与9001-99-4核糖核酸酶A(美仑)；RNase A;核糖核酸酶I相关的内容。 查看更多
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2021-09-21
人靶向核糖核酸酶试剂盒，进口试剂盒http://www.aatbio.com.cn/人靶向核糖核酸酶试剂盒用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。一般医院、制药企业使用。核酸提取纯化类、蛋白检测类、RNA。abcamhttp://www.aatbio.com.cn/goodsid/fenleiyi/3200090_abcam/1.htmlabihttp://www.aatbio.com.cn/goodsid/fenle 查看更多
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2018-07-18
人核糖核酸酶 ELISA人核糖核酸酶 ELISA属人ELISA试剂盒，是ELISA试剂盒中常用检测产品，的检测原理、产品报价及操作事项请咨询上海通善生物工程师，企业QQ 1465907913。属 人ELISA试剂盒规格 96T/48T包装 进口分装储存 2~8℃产品 美国供应商 上海通善生物特别说明 利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液(指血，静脉血)，尿，粪便，脑脊液，胸腹水，前列腺液，精液，**分泌物等，这些样本收集的时 查看更多
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2018-12-12
小鼠抗磷脂抗体(apa)elisa试剂盒使用注意事项：1．[jl40314] 小鼠抗磷脂抗体(apa)elisa试剂盒检测前，检查各种仪器，打开酶标仪，稳定20分钟左右。2．检测样本要澄清，不能含杂物，否则会直接影响结果。3．实验开始前要将试剂盒取出，室温放置30-40分钟，使各种试剂都恢复到室温，以使检测结果更为稳定。4．尽量做双标准实验，这样可以保证数据的准确性。5．底物具有毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，要避免接触。6．[jl4031... 查看更多
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