方法: 1、粗酶液的制备 用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010g、0.020g和0.030g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,配成浓度分别为0.01%、0.02%和0.03%的粗酶液。 2、实验设计 本实验以10mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。 3、酸价的测定 酸价是指中和1mol游离脂肪酸所需NaOH的毫克数,它用于衡量油脂的水解程度。实验中用酸碱滴定法测定水解液的酸价,参照文献[3,4]中所使用的方法,向所得的水解液滴加1mL95%的乙醇溶液,摇匀,终止反应,并加入2滴酚酞指示剂,迅速用0.05mol/L的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色,在30s内不消失为终点,记录消耗的NaOH溶液毫升数(V)。用同样的方法测定空白值,每个试验重复两次,以平均值作为测定结果。 酸价按下式计算:X=C(V-V0)×40/M式中:X—油脂酸价(mgNaOH/g油)C—NaOH标准溶液的浓度(mol/L)M—试样的质量(g)40—NaOH的mmol质量(mg/mmol) 4粗脂肪酶活力的测定 在最佳水解条件下,分别测得粗脂肪酶和标准脂肪酶水解液的酸价X1、X2,根据公式U1/U=X1/X2求得粗脂肪酶的活力,其中U1为粗脂肪酶活力,U为标准脂肪酶活力。 5标准脂肪酶液的配制 根据实验最佳条件,配制标准脂肪酶液。一篇相关文献粗脂肪酶活力的测定方法的研究.pdf 答:实验设计,本实验以10mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最佳条件。用色拉油作底物不太妥,一般是用橄榄油,化学纯的。