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稳定转染细胞株的构建 实验方法
来自 : mayitao
上世纪70年代,关于培养基中维生素与细胞生长速率之间的关系逐渐得到了认识。1955年,通过加入1%透析过的马血清,美国生物学家Eagle证实了小鼠L细胞(成纤维细胞系)增殖需要胆碱、叶酸、尼克酰胺、泛酸、吡哆醛、核酸素以及硫胺素。
1969年,Haggerty和Sato采用化学限定培养基,证实了L细胞还需要生物素。至于肌醇和次黄嘌呤,则没有证据显示L细胞需要。
1977年,Young等人发现,培养SV3T3细胞,如果对照组仅加入0.20%的小牛血清,实验组加入生物素或不饱和脂肪酸,则会显著刺激细胞生长。和对照组比较,生物素可将存活细胞的密度提高5到10倍,在达到200pg/ml时,则其效应饱和。不饱和脂肪酸则使细胞生长提高5倍。
胎牛血清中无疑都含有以上这些营养物质,较为全面,但加上现在的基础培养基如MEM等,细胞培养的效果会更为明显。因此,了解维生素等这些小分子细胞增殖的影响,细胞需要的zui佳营养浓度等,这些无疑对更好的培养细胞是有帮助的。
参考文献
MessmerTO,YoungDV.TheeffectsofbiotinandfattyacidsonSV3T3cellgrowthinthepresenceofnormalcalfserum.JCellPhysiol.1977Feb;90(2):265-7.
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