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Boston Biochem/Recombinant Human His6-Ubiquitin Mutant K29R Protein, CF/UM-HK29R-01M
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Boston Biochem/Recombinant Human His6-Ubiquitin Mutant K29R Protein, CF/UM-HK29R-01M
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Recombinant Human His6-Ubiquitin Mutant K29R Protein, CF Summary

Purity
>95%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by Colloidal Coomassie® Blue stain
Activity
The lysine residue utilized for Ubiquitin chain formation is functionally important. Ubiquitin lysine to arginine mutants are ideal for investigating biological processes involving a particular Ubiquitin chain linkage. Recombinant Human His6-Ubiquitin Mutant K29R prevents the formation of K29-linked Ubiquitin chains. Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. We recommend an initial Recombinant Human His6-Ubiquitin Mutant K29R concentration of 0.2-1 mM.
Source
E. coli-derived human Ubiquitin protein
Accession #
P62988

Product Datasheets

Product Datasheet
COA

Carrier Free

What does CF mean?

CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.

What formulation is right for me?

In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.

UM-HK29R

FormulationLyophilized from a solution in HEPES.
ShippingThe product is shipped at ambient temperature. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below.
Stability & Storage:Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
  • 12 months from date of receipt, -20 to -70 °C as supplied.
  • 3 months, -20 to -70 °C under sterile conditions after reconstitution.
Reconstitution Calculator

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=
÷

Background: Ubiquitin

Ubiquitin is a 76 amino acid (aa) protein that is ubiquitously expressed in all eukaryotic organisms. Ubiquitin is highly conserved with 96% aa sequence identity shared between human and yeast Ubiquitin, and 100% aa sequence identity shared between human and mouse Ubiquitin (1). In mammals, four Ubiquitin genes encode for two Ubiquitin-ribosomal fusion proteins and two poly-Ubiquitin proteins. Cleavage of the Ubiquitin precursors by deubiquitinating enzymes gives rise to identical Ubiquitin monomers each with a predicted molecular weight of 8.6 kDa. Conjugation of Ubiquitin to target proteins involves the formation of an isopeptide bond between the C-terminal glycine residue of Ubiquitin and a lysine residue in the target protein. This process of conjugation, referred to as ubiquitination or ubiquitylation, is a multi-step process that requires three enzymes: a Ubiquitin-activating (E1) enzyme, a Ubiquitin-conjugating (E2) enzyme, and a Ubiquitin ligase (E3). Ubiquitination is classically recognized as a mechanism to target proteins for degradation and as a result, Ubiquitin was originally named ATP-dependent Proteolysis Factor 1 (APF-1) (2,3). In addition to protein degradation, ubiquitination has been shown to mediate a variety of biological processes such as signal transduction, endocytosis, and post-endocytic sorting (4-7).

Mutation of lysine 29 to arginine renders Ubiquitin unable to form poly-Ubiquitin chains via lysine 29 linkages with other Ubiquitinmolecules. Ubiquitin K29R can form a Ubiquitin-activating (E1) enzyme-catalyzed active thioester at the C-terminus allowing the molecule to be transferred to the lysines of substrate proteins. Ideal for the reduction in poly-Ubiquitin chain length/conjugation rates and determining if poly-Ubiquitin chains are K29 linked.

Entrez Gene IDs
7314 (Human); 298693 (Rat)
Alternate Names
RPS27A; UBA52; UBB ubiquitin B; UBB; UBC; Ubiquitin

FAQs

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Recombinant Enzymes

Recombinant Human His6-USP7 Protein, CF

E-519
4Citations
3Reviews
EnzAct

Recombinant Human His6UBE2S Protein, CF

E2-690
2Citations
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Recombinant Human Isopeptidase T/USP5 Protein, CF

E-322
3Citations
EnzAct

Recombinant Human STAM-1 Protein, CF

E-550
2Citations
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Recombinant Human Ubiquitin Activating Enzyme (UBE1), CF

E-305
83Citations
2Reviews
EnzAct

Recombinant Human His6-UBE2N/UBE2V2 Complex Protein, CF

E2-666
1Citations
BA,BA

Recombinant Human His6-UAF1 Protein, CF

E-566
1Citations
BA

Recombinant Human UCH-L3 Protein, CF

E-325
3Citations
EnzAct

Recombinant Human UBE2K/E2-25K Protein, CF

E2-603
EnzAct

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这一部分介绍了一种原位 PCR,特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 查看更多>
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荧光PCR检测原理 123
本木兮08042021-07-29
荧光定量pcr是检测hpv病毒的一种方法,检查是否感染了hpv病毒。tct是筛查宫颈癌的。
不清楚这个易瑞什么来路,目前的基因检测主要有2类,一类是通过SNP位点(基本上是以SNP芯片为手段,也有针对单基因或少数几个基因位点的使用的是PCR加测序或分型的方式),还有一类是对全基因组进行测序,一般目前采用的是Hiseq X-ten测序。
价格上第一种如果是几百万个SNP位点的一般是1000元左右,如果是单基因或少数几个基因的也就几十块钱。第二种全基因组测序的一般测序深度30X以上,90G左右数据,测序费用大概在8000左右,分析snp和Indel的变异费用在1000左右。
但是,目前完全不建议做。因为SNP的变异与疾病和表型的研究完全不够充分。单基因的遗传疾病根本不用测序自己就看出来了,多基因的复杂疾病基因遗传因素所占比例有限,只是一个相关概率问题,而且即便知道了也没什么手段,早点拿到的数据也是一堆ATCG和SNP变异和所谓风险值。
还有测序和数据分析费用在飞速下降,目前上万的全基因组测序同样的数据可能1年后只用几百块,真正有效的解读也还要等到几年后,没必要花这个冤枉钱。
但是以下人群有这个切实需要:肿瘤的突变分型(目前并没有特别靠谱的高通量测序产品,主要还是基于荧光定量PCR的检测试剂盒),新生儿的遗传病筛查(看个人接受程度)
不清楚这个易瑞什么来路,目前的基因检测主要有2类,一类是通过SNP位点(基本上是以SNP芯片为手段,也有针对单基因或少数几个基因位点的使用的是PCR加测序或分型的方式),还有一类是对全基因组进行测序,一般目前采用的是Hiseq X-ten测序。
价格上第一种如果是几百万个SNP位点的一般是1000元左右,如果是单基因或少数几个基因的也就几十块钱。第二种全基因组测序的一般测序深度30X以上,90G左右数据,测序费用大概在8000左右,分析snp和Indel的变异费用在1000左右。
但是,目前完全不建议做。因为SNP的变异与疾病和表型的研究完全不够充分。单基因的遗传疾病根本不用测序自己就看出来了,多基因的复杂疾病基因遗传因素所占比例有限,只是一个相关概率问题,而且即便知道了也没什么手段,早点拿到的数据也是一堆ATCG和SNP变异和所谓风险值。
还有测序和数据分析费用在飞速下降,目前上万的全基因组测序同样的数据可能1年后只用几百块,真正有效的解读也还要等到几年后,没必要花这个冤枉钱。
但是以下人群有这个切实需要:肿瘤的突变分型(目前并没有特别靠谱的高通量测序产品,主要还是基于荧光定量PCR的检测试剂盒),新生儿的遗传病筛查(看个人接受程度)
日本的。
首先,不否认它比大多数国产的试剂盒做得好,提取的纯度、方便度和量,都还很不错。
其次,它是日本的。so我觉得实验室用用天根的,就非常好了。拒绝日货,从实验室做起。
意思是检测结果表明受检者每毫升血液中有2640000个乙肝病毒DNA。所用的检测试剂盒的检测下限是每毫升500个乙肝病毒DNA,如果受检者血液中的有乙肝病毒DNA,但是每毫升少于500个,可能就检测不出来。
定量结果显示:1.血液中有乙肝病毒DNA分子,受检者被乙肝病毒感染了;2.血液中的乙肝病毒浓度较高,积极治疗吧
本人正在做提取RNA的实验,订购了罗氏的逆转录试剂盒,但是在官网没有搜到实验步骤,不知道是不是自己没有搜索正确。请问有实验大神,有知道罗氏逆转录试剂盒的实验步骤吗?感谢!
很想看看他们公司成熟的技术到底是什么样子的,不知道哪里可以看到呢?
对于新手来说购买反转录试剂盒是比较理想的,买一个kit看看说明书操作就可以了。推荐两款kit TAKARA和HaiGene,这两款试剂盒都能对RNA样品中的gDNA有效去除,因此对RNA质量的要求不高。TAKARA的RR047A操作方便,反转录温度为37℃,对于大多数试验来讲是满足要求的。HaiGene的D0401操作要多一个步骤,但其反转录温度是55℃(耐高温的反转录酶),提高了反转录温度使得高GC含量、复杂模板、长mRNA的模板都能有效反转录,因此其反转录效率更高,更能够获得样本中基因的真实表达量。如果后续试验是RealTime PCR、ORF克隆、高GC含量、或者你的待研究基因结构复杂程度未知,还是选用耐高温的反转录酶更理想。对于反转录高手来说,直接购买反转录酶、再购买Rnase Inhibitor自己配制反转录体系就可以了。对于样本量大的课题组来讲,相对还是比较经济的。选择反转录酶时仅需要考虑是否需要耐高温的酶,来克服目的基因的复杂结构就可以了。PROMEGA、TAKARA、HaiGene、 TRANSGEN等品牌的反转录酶性价比还都是不错的。Life、NEB的也不错,银子足的也可考虑,不一一解释了。
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逆转录一般用罗氏的,目前天根的全式金的也挺好用,还方便。
如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。不需要特别的试剂盒、
13楼
加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾,然后再用带oligodt的引物反转录,他的反转录引物是通用的,一次反转录可以获得所有miRNA的cdna,效率高。茎环法是采用特异性反转录引物序列+颈环结构作为反转录引物进行反转录的,一次反转录只能获得一种mirna的cdna,可能有几种一起反转录的,这个我不太清楚一起反转录的效果。然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。我用过茎环法反转录+染料法定量的,下游引物为通用引物,结果不太好,就现在用的这家的他采用的是双向引物都是特异性的,效果还可以。不知道我说的清楚不,希望能对你有帮助。
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