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GenWay/IGM Antibodies to Herpes Simplex Virus Type 2 (HSV-2) ELISA Quantitation Kit/GWB-BCB2CB/ELISA_Kits

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GenWay/IGM Antibodies to Herpes Simplex Virus Type 2 (HSV-2) ELISA Quantitation Kit/GWB-BCB2CB/ELISA_Kits

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GenWay

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GWB-BCB2CB

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Description:

Species:Human

SampleType:Serum

ForthequantitativedeterminationofIGMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)inserum.DNAVirusInfections,Infection,Blood,FemaleUrogenitalDiseases,GenitalDiseasesMale

ProductName:IGMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)

SampleType:Serum

#ofSamples:1X96Assays

IntendedUse:TheGenWayBiotechHSV-2IgMELISAisintendedforthedetectionofIgMantibodiestoherpessimplexvirusHSV-2.

Introduction:HerpesSimplexVirusisacommonpathogenanditsprimaryinfectionisusuallyasymptomatic.TherearetwoimmunologicallydistincttypesofHSV:Type1andType2.HSV-1isgenerallyassociatedwithoralinfectionandlesionsabovethewaist,andHSV-2isassociatedwithgenitalinfectionsandlesionsbelowthewaist.Clinicalcasesprimarilyare(1)eczemaherpeticumwitheczematousskinchangeswithnumerouslesions,(2)gingivo-stomatitis,and(3)herpessepsis,almostonlyfoundinprematurenewborninfants.TheGenWayBiotechHSV-2IgMELISAisanaccurateSEROlogicmethodtodetectHSV-2IgMspecific-antibodyinserumsamples.

Principleofthetest:PurifiedHSV-2antigeniscoatedonthesurfaceofmicrowells.Dilutedserumisaddedtothewells,andtheHSV-2IgM-specificantibody,ifpresent,bindstotheantigen.Allunboundmaterialsarewashedaway.HRP-conjugateisadded,whichbindstotheantibody-antigencomplex.ExcessHRP-conjugateiswashedoffandasolutionofTMBReagentisadded.Theenzymeconjugatecatalyticreactionisstoppedataspecifictime.TheintensityofthecolorgeneratedisproportionaltotheamountofHSV-2IgM-specificantibodyinthesample.Theresultsarereadbyamicrowellreadercomparedinaparallelmannerwithcalibratorandcontrols.

StorageandStABIlity:1.Storethekitat2-8C.2.Keepmicrowellssealedinadrybagwithdesiccants.3.Thereagentsarestableuntilexpirationofthekit.4.Donotexposetestreagentstoheat,sunorstronglightduringstorageorusage.

LimitationoftheTest:1.ReliableandreproducIBLeresultswillbeobtainedwhentheassayprocedureiscarriedoutwithacompleteunderstandingofthepackageinsertinstructionsandwithadherencetogoodlaboratorypractice.
2.Thewashprocedureiscritical.InsufficientwashingwillresultinpoorprecisionandfalselyelevatedabsorbancereADIngs.
3.Serumsamplesdemonstratinggrosslipemia,grosshemolysis,orturbidityshouldnotbeusedwiththistest.

Precision:AstudywasperformedtodocumenttypicalassayprecisionwiththeGenWayBiotechHSV-2IgMEIAproduct.Themean,SD,and%CVwerecalculatedforIntra-andInter-AssayinO.D.value(A450).

ProductName:IGMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)

SubcellularLocation:Isoform1:Secreted.Note=Duringdifferentiation,B-lymphocytesswitchfromexpressionofmembrane-boundIgMtosecretionofIgM.

SubcellularLocation:Isoform2:Cellmembrane;Single-passtypeImembraneprotein.

Polymorphism:All4combinationsoftheS/GandV/Gpolymorphismsatpositions191and216havebeenobservedinhumanmuchains.

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人血栓烷A2(TXA2)ELISA试剂盒说明书实验方法

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TXA2单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的TXA2与单抗结合，加入生物素化的抗人TXA2，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物查看更多>

兔C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒说明书

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔CRP单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的CRP与单抗结合，加入生物素化的抗兔CRP，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素查看更多>

一步步教你用BrdU检测细胞增殖

2018-12-26

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人胸苷酸合成酶(TS)elisa试剂盒使用说明书.doc

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TS单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的TS与单抗结合，加入生物素化的抗人TS，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结查看更多>

夹心法ELISA检测可溶性白介素2受体实验方法实验方法 ...

2021-08-01

可溶性白细胞介素2受体SIL-2R的浓度的高低与许多疾病有密切联系，如成人T淋巴细胞白血病艾滋病、B细胞慢淋、毛细胞白血病，以及肾移植后发生急性排斥反应时或异基因骨髓移植发生移植物抗宿主时，患者血清中SIL-2R水平明显升高。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990）查看更多>

大鼠内脂素(Visfatin)ELISA试剂盒说明书分析方法 ...

2018-12-26

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小鼠血清白蛋白抗体性能参数,报价/价格,图片

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人MDC/CCL22单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的MDC与单抗结合，加入生物素化的抗人MDC，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生查看更多>

兔基质金属蛋白酶7(MMP7)ELISA试剂盒说明书实验方法

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔MMP-7单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的MMP-7与单抗结合，加入生物素化的抗兔MMP-7，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生查看更多>

Tsukasa0w0的微博_微博

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔IL-1b单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IL-1b与单抗结合，加入生物素化的抗兔IL-1b，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生查看更多>

请问一般基因敲除小鼠哪家公司做的好,想问一下时间,周期和价格？ ...

2018-12-26

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人瘦素(leptin)ELISA试剂盒使用说明书_技术文章_南京森贝伽生物...

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Leptin单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的Leptin与单抗结合，加入生物素化的抗人Leptin，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与查看更多>

电泳缓冲液稀释后变浑浊是什么情况? 蛋白质和糖学

2018-12-26

采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔cTnI单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的cTnI与单抗结合，加入生物素化的抗兔cTnI，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物查看更多>

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...洗涤分别代表什么实验过程?其主要作用是什么?123

2018-03-14

(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，再经孵育洗涤后，加底物显色进行测定，底物降解的量即为欲测抗原的量。(2)单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色。(改良双抗体夹心法)本法首先是将特异性抗体a包被于固相载体，经洗涤加入含有欲测抗原之待检样品。经孵育洗涤后再加一次未标记的特异性抗体b，而这次加入的抗体b于第一次包被于固相载体上的特异性抗体a对被测抗原来说都是特异性的，但不是用同种动物免疫制备的，否则可出现非特异性反应。经孵育洗涤后，再加酶标记抗b抗体，再经孵育洗涤后加底物显色进行测定。这种方法与双抗体夹心法不同之处是多加了一层抗体。因此，放大的倍数更高，故比双抗体夹心法更加灵敏。同时避免标记特异性抗体，而另一优点是只要标记一种抗抗体，即可达到多种应用。

【讨论】在ELISA试剂盒方面有多年经验,欢迎大家共同讨论在ELISA...123

missoulmate2021-08-10

最近在用夹心法测目的抗体的含量，有很多不解的地方，望各位解答了。
1.标准曲线的标准品是否一定要梯度稀释，为什么？我试过非梯度稀释的，也可以达到线性R2=0.99.

2.我用了CurveExpert做标曲，自动搜索后发现有10种提供的方程，各种形式的，其中一个十分适合我的实验结果（LogisticModel），而其他的感觉又不适合，因为结果常常为负值。这又是为啥捏？

3.实验的酶标仪最大OD值可以测到4，如果我的测量结果在1.3，是否像其他人所说的＞1了就不准确了。

4.利用夹心法进行定量分析是否一定要使用线性方程？

不好意思啊，一下问了这么多问题，最近做了一个月的ELISA，完全摸不清头脑啊。谢谢各位了

请教,ELISA中的棋盘滴定法,谢谢,急用_问答详情_夹心法ELISA_...123

liuhua2021-07-29

这是我做双抗体夹心ELISA时设计的方案，你可以参考一下。棋盘滴定法选择抗体的最适工作浓度a)用包被缓冲液稀释单克隆抗体，浓度分别为10ug/ml、5.0ug/ml、2.5ug/ml、1.0ug/ml,包被酶标板，每一浓度包被三个纵行，每孔100ul，每孔均作复孔。4℃过夜，PBST洗涤3次；b)5%脱脂奶粉封闭酶标板，37℃孵育1h，洗涤3次；c)在横行包被孔中依次加入空白对照，阴性对照血清，弱阳性抗原液及强阳性抗原液，各100ul,37℃孵育1h，洗涤3次；d)在每一包被浓度的一个纵行中分别加入按1:2000、1：5000、1：10000稀释的多抗，37℃孵育1h，洗涤3次；e)在每一包被浓度的一个纵行中分别加入HRP标记IgG抗体，稀释度先按说明书上的，37℃孵育1h，洗涤3次；f)加TMB底物，37℃避光显色10-15min，用2mol/LH2SO4终止反应，酶标仪450nm读取吸光度（OD）值；g)测得的强阳性抗原液OD值在1.0左右，阴性对照OD值小于0.1的组合为较理想的组合。可根据初步确定的浓度缩小间距,再做进一步棋盘滴定,寻找最佳包被条件。抗体做稀释时最好用同一个原始浓度做倍比稀释，这样可以尽量减少由于加样枪造成的误差及人为误差。

双抗夹心ELISA灵敏度生物科学学术科研互动社区123

十妞XNOM2021-08-19

1.加大生物素标记的多抗的用量；
2.加大辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素；

改良双抗夹心法测抗原含量的标准曲线的问题有奖问答完结子版 ...123

ptq02052021-08-03

双抗夹心法ELISA标准曲线的问题
大家好,我在做双抗夹心法的elisa实验,已经花了20来天了，然而标准曲线的线性一直做不好，而且不稳定。下面我把具体的实验过程说下，希望大家能给我提个建议，谢谢！
首先我从以下数据中确定了标准品的起始稀释浓度:4.64,46.4,464,4640IU/ml对应的OD为0.55,1.178,1.086,1.168.因此我取46.4IU/ml(300ng/ml)作为标品的起始稀释浓度。然后作了关于单抗，多抗，二抗的合适稀释度的实验，我的数据如下：
123456789
空白0.2290.1920.2120.1540.1390.1730.2360.1770.257
46.4iu/ml1.2421.5271.2691.9641.6281.9592.0051.8802.163
9.28iu/ml0.9680.9501.0131.1360.8731.2461.6971.5861.769
阴性0.1920.1760.2500.1310.1610.1540.1990.2190.244
选取了7号组合单抗，多抗，二抗分别为1ug/ml,1ug/ml,0.5ug/ml。
标品按照以下梯度稀释：46.423.211.65.82.91.450.725iu/ml.以下是我近来做的三组数据,都是相对空白的相对值：

123
46.4iu/ml0.6130.5860.851
23.20.5240.6490.765
11.60.3820.510.663
5.80.3160.3850.567
2.90.2880.3190.37
1.450.2890.1340.303
0.7250.1210.1460.113
空白0.0820.0870.101
阴性0.0820.1050.101
似乎梯度都不明显。我现在疑惑的是我的标品浓度的设置有问题还是之前抗体的浓度选择不合适，请大家多指点，万分感谢！！！

求助双抗夹心法elisa交叉反应问题123

judiezhu2021-07-20

双抗夹心法ELISA测定抗原时，会发生交叉反应吗？

双抗原夹心ELISA方法检测艾滋病病毒抗体标准操作规程.doc123

lishan81252021-08-18

双抗原夹心法步骤：
请大家帮帮忙，第一步加完抗原后必须封闭吗

【求助】EIA和ELISA法的区别与应用免疫学讨论版论坛123

纳迟WO072018-03-11

两者其实叫同已酶联免疫(eia) 翻译结:enzyme linked immunosorbent assay (eia) 缩写另种形式ELIS

简述分别用ELISA的哪种方法检测乙肝两对半? 123

Liusomebody_2021-08-07

表面抗原和E抗原采用的是双抗体夹心法，
表面抗体是双抗原夹心法
E抗体和核心抗体是竞争抑制法或间接法

ELISA的种类及原理123

然然丿hqRQ2021-08-01

夹心法夹心法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为:将具有专一性之抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体加入待测检体，检体中若含有待测之抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一之一次抗体，与待测抗原进行键结洗去多余未键结一次抗体，加入带有酵素之二次抗体，与一次抗体键结洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果间接法间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原。加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结。洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。竞争法竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：将具有专一性之抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结加入带有酵素之抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酵素之抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。洗去检体与带有酵素之抗原，加入酵素受质使酵素呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酵素的抗原越少，显色也就越浅。当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。

ELISA方法详细过程及步骤123

shhyelisa2021-07-22

方法一：用于检测未知抗原的双抗体夹心法：
　　1.　包被：用0.05M PH9，碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml，在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。
　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml，37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
　　方法二：用于检测未知抗体的间接法：
　　用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30～60分钟，洗涤，最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

【求助】双抗夹心法ELISA测抗原,曲线拟合时是否一定采用四参数?_...123

xiaowu20082021-08-23

双抗夹心法ELISA测抗原，曲线拟合时是否一定采用四参数?

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Name	IGMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)ELISAQuantitationKit
RelatedProductNames	IgMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)ELISAKit;N/AIgMAntibodiestoHerpesSimplexVirusType2(HSV-2)HSV-2
MolecularWeight	49307
SwissProtNumber	P01871
IntendedUse	ResearchUseOnly