
ZMCSTR™isanon-volatile,non-flammablecollectionbufferthatstABIlizesintactcellsforextendedstorageat2-28°C.ZMCSTR™maintainscellularintegritybyinhibitingbiochemicalprocessesandstabilizingcellularmembranes,proteins,andnucleicacids.Collectedsamplescanalsobefrozenandthawedwithoutlosingreductionincellcountandthenucleicacidamplificationanddetection.Reagentisprovidedinlabeledscrew–captubesdesignedforsampletransportofclinicalsamples.Eachpackagecontains10x20mLtubes.
ZeptoMetrixSampleTransportReagent™(ZMCSTR™)*isageneralpurposereagentandnon-propagatingbufferdesignedtostabilizenucleicacidswithinintactcellsforlongtermstoragepriortomoleculardiagnostictesting.
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zeptometrixzeptometrix成立于1999年,是一家为药物研究行业提供诊断产品和服务的的私人控股公司。zeptometrix公司(ZMC)是一个传染病诊断行业先进者和创新者,为全球的客户提供值得信赖的产品和服务。zeptometrix是一个完全集成的生物技术公司的产品支持的研发的所有阶段;发展,验证,制和商业化的诊断测试。zeptometrix不断开拓创新,致力为生命科学行业带来更多优质产品与服务。
Zeptometrix Corporation(ZMC)是行业领dao者和创新者,为传染病诊断开发和质量控制提供优质,可靠和值得信赖的产品和服务。从检测概念到推出,我们的科学和运营团队为我们的客户提供了具有凝聚力,创造性和成本效益的解决方案。制造微生物产品zeptometrix是制造核酸扩增测试微生物控制的全球dingJI供应商之一。我们的基于NATtrol™*的产品远远超过行业质量标准,包括IVDCE控制,细菌控制,病毒控制,寄生虫控制,多标记质量控制等。我们的NAT控制产品可帮助实验室和医院简化测试过程,培训技术人员并校准设备。在zeptometrix,我们为合作伙伴提供大量细菌,病毒,寄生虫,真菌和噬菌体菌株,可根据贵公司的研究需求进行定制。我们的微生物菌株有多种不同的形式,包括质量控制组和分子控制。测试服务除了我们广泛的临床标本和微生物产品库存外,zeptometrix还为我们的合作伙伴提供分析测试服务。我们的测试服务可协助IVD提交的所有实验室测试领域,为我们的合作伙伴提供高效,低成本的解决方案,以便在他们自己的实验室或医生办公室进行测试。有关我们的微生物产品,测试服务或任何定制产品开发的问题,请立即LIAN系我们。让我们与您合作,定制您的测试解决方案。定制产品开发zeptometrix提供各种定制诊断产品开发,包括病毒学,细菌学,分子和免疫学服务。我们在我们的两个生物安全2级和3级实验室中生产和储存了大量微生物。我们的两家工厂都拥有符合ISO13485标准的质量管理体系,使我们能够有效地调整我们的产品和服务,以满足我们合作伙伴的研究和测试需求。Zeptometrix是一家私人控股公司,成立于1999年,为诊断和药物研究产品行业提供服务。在zeptometrix,我们始终了解研究成功通常需要团队方法。这就是为什么我们的公司理念“成为我们客户的合作伙伴”始终站在最前沿,因为我们与“合作伙伴”一起,共同改变全球传染病诊断行业。今天,我们自豪地为我们的全球合作伙伴提供各种突破性的,相关的和值得信赖的产品和服务。
Firegen血液RNA提取试剂盒(EDTA血)FirePure™BloodRNAExtractionKitFG0413-L Firegen血液RNA提取试剂盒(EDTA血)产品介绍: 该试剂盒为血液总RNA的提取提供了一个简单快速的解决方案。试剂盒基于超顺磁性的磁性粒子纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚lv仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,提取过程简单、耗时短。得到的RNA可直接用于RT-PCR、荧光定量、二代测序、病毒RNA检测等实验。高通量测序等下游实验。该试剂盒也可高效的与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用,以进行快速、大样本量的提取。 产品特性: ※适配高通量自动化核酸提取仪,人工操作时间短 ※高收率,无降解 ※样本间差异低,结果重复性强 ※纯度高,无蛋白质、高分子量DNA污染 ※兼容自动化设备提取流程: 96深孔板、预装试剂--结合--洗涤1--DNase处理--洗涤1、2、3--洗脱
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ELISA双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体,与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量。
生物帮有相关介绍。编码RNA http://doc.bio1000.com/show-3399.html
2、封闭液肯定不好
3、显色时用封口膜盖好
1、重复性不好;
2、收自身抗体、嗜异性抗体等干扰,易出现假阳性;
3、不论仪器和手工操作,干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。1、直接法(direct ELISA)将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。缺陷:实验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对进步。2.间接法(indirect ELISA)此测定办法与直接法相似,不一样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它最多的免疫反响性。缺陷:交互反响发作的机率较高。3.双抗体夹心法(sandwich ELISA)被检测的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要当心选择,才可防止交互反响或竞争一样的抗原联系部位。优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体联系部位。4.竞争法(competitive ELISA)样本里的抗原(自在抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一同竞争一样的抗体,当样品里的自在抗原越多,就能够联系越多的抗体,而固定抗原就只能联系到较少的抗体,反之亦然。经清洁过程,洗去自在抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只要固定抗原的对照组成果相比拟,依据呈色区别就可计算出样品里的抗原含量。优势:可适用比拟不纯的样本,并且数据再现性很高。缺陷:全体的敏感性和专一性都较差。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
目前,我用该蛋白的鼠源性单抗来包被ELISA板子,5%BSA37度封闭二小时后,洗涤四次后将板子分三个组加入抗原:其中一个组中加入的是我重组的蛋白,另一个组为用其它方法证实含该蛋白的人体内血清,最后一个组加入PBS。37度一小时后洗涤四次后每孔加入我制备的兔源性多抗。37度一小时洗涤六次后我再加入酶标记的抗兔的抗体37度40分钟后洗涤六次后TMB显色。
问题就在我显色后所有的孔都是阳性,其中以抗原为我的重组蛋白组与PBS组OD值最高,两组都可以达到1.8以上,而加入的抗原为人体血清组低,为0.6-1.0不等。
后面我优化条件,封闭液用过5%的脱脂奶粉,2%的BSA,包被的单抗浓度摸了梯度,加入的多抗也摸了梯度,酶标的抗体也摸了梯度。结果都没有改变,连趋势每次都是一样以重组蛋白组与PBS组OD最高。
今天我还试着把抗原换成其它蛋白也做出了强阳性?
请教各位高手,我的ELISA该如何往下面做了啊,是不是我的抗体本身有问题呢?
对了,我包被用的单抗是用GE公司的预装柱纯化的,很纯,在考染中是看不到一条杂带的。
(1) 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
(2) 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
(3) 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
(4) 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
(5) 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
(6) 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
(一)双抗体夹心法
(二)间接法
(三)竞争法
(四)双位点一步法
(五)捕获法测IgM抗体
(六)应用亲和素和生物素的ELISA

