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中国Abbexa官网,Abbexa Ltd价格更新 抗体品牌,AKT; AKT1 kinase; C-AKT; kinase Akt1; PKB; PKB-alpha; Protein kinase B; RAC; RAC-alpha serine/threonine kinase; RAC-PK-alpha蚂蚁淘商城
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Abbexa/Akt1 (pS473) Cell ELISA Kit/2 × 96 tests/abx595972-2 × 96 tests
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Akt1(pS473)CellELISAKitisacell-basedELISAKit.Cellstobeassayedshouldbeseededontoaclearflatbottom96wellplate,usingpoly-L-lysinefornon-adherentcells.Cellsshouldbegrownto75-90%confluenceandtreatedpriortocarryingouttheELISA.
TargetAkt1(pS473)
ReactivityHuman,Mouse,Rat
TestedApplicationsELISA
RecommendeddilutionsOptimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser.
StorageShippedat4°C.Uponreceipt,storethekitaccordingtothestorageinstructioninthekit"smanual.
Validity6months.
UniProtPrimaryACP31749(UniProt,ExPASy)
UniProtSecondaryACB2RAM5,B7Z5R1,Q9BWB6
UniProtEntryNameAKT1_HUMAN,AKT2_HUMAN,AKT3_HUMAN
GeneSymbolAKT1,AKT2,AKT3
GeneID207
OMIM164730
String9606.ENSP00000451828
ELISADetectionColorimetric
PlateCoatingCell
SubstrateTMB
DetectionAntibodyConjugationHRP
AvailABIlityShippedwithin1-2weeks.
NoteThisproductisforresearchuseonly.

Therangeandsensitivityissubjecttochange.Pleasecontactusforthelatestproductinformation.Foraccurateresults,sampleconcentrationsmustbedilutedtomid-rangeofthekit.Ifyourequireaspecificrange,pleasecontactusinadvanceorwriteyourrequestinyourordercomments.

PleasenotethatourELISAandCLIAkitsareoptimisedfordetectionofnativesamples,ratherthanrecombinantproteins.Weareunabletoguaranteedetectionofrecombinantproteins,astheymayhavedifferentsequencesortertiarystructurestothenativeprotein.ResearchArticlesonAkt1(pS473)CellELISAKit

Abbexa是一家致力于为生命科学研究、药物研发及生物技术公司提供优质抗体、蛋白及检测试剂盒等产品的高科技生物技术公司。基于剑桥大学研发技术优势,Abbexa提供包括一抗二抗、纯化蛋白、ELISA试剂盒、各种酶类及其它多种试剂与研究工具的大量生命科学研究产品。

目前Abbexa的产品涵盖单克隆抗体多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂,此外,为满足研发人员特殊的实验需要,Abbexa还提供抗体/多肽定制服务。严格的质控标准保证了Abbex产品的高性能,如您对产品不满意,Abbexa将直接提供退/换货服务


CLIAKits 化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)

RNAInterferenceProducts RNA干扰试剂

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。

由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。

1.           RNAi抑制转座子活性

两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关

①发现蠕虫mut-7基因参与RNAi并且与转座子的转座抑制有关;

②在果蝇中,参与RNAi的RNA解螺旋酶Spindle-E的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。

2.           RNAi抵御病毒感染

在拟南芥中研究转基因引起基因沉默时发现,sgs2/sde1基因突变的拟南芥对病毒的侵染表现出高度的敏感性。

3.           RNAi参与异染色质的形成和维持

Hall等研究表明,着丝粒同源重复序列和RNAi组分一起正负调节着异染色质的形成并共同促使异染色质组装成核;Vople等在敲除裂殖酵母(S.pombe)的RNAi途径基因(如Argonaute、Dicer、RDRP)时发现异染色质转录得到的dsRNA可以在RNAi途径的参与下,加工成siRNA,siRNA募集异染色质蛋白1(HP1),然后靶向性引起相应异染色质区域的转基因沉默。

4.           RNAi参与机体的发育调控及生理代谢

RNAi只抑制转录后的基因,所以RNAi在生物体发育学研究中具有优势。Chuang等用RNAi技术进一步证实了AG、CLV3、AP1、PAN等已知功能基因在拟南芥花发育过程中的功能。在RNAi过程中形成的RISC复合物可根据不同情况分别利用siRNA或stRNA行使不同的功能,但最终均导致特定基因沉默。


IsotypeControl

同型对照

同型对照(IsotypeControl),使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。

同型对照

同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体,与功能阻断抗体发挥同样的功能。

同型对照要与一抗的来源,Ig分型和标记完全一致。

如果一抗是多抗,可以用annormalserum(与一抗相同的正常血清)(mustbethesamespeciesasprimaryantibody)。Thiscontroliseasytoachieveandcanbeusedroutinelyinimmunohistochemicalstaining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同,应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子:比如检测一抗为单抗的mouseantiratCD11b,cloneOX-42purifiedIgG,那么它的isotype是mouseIgG2a,所以可以用purified(纯化的)mouseIgG2a来做OX-42的同型对照(IsotypeControl)。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。

同型对照:是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类,若使用直接免疫荧光染色法,同型对照也应标记荧光色素,如IgG1FITC、IgG2a、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外,同型对照与MoAb所标记的荧光色素、浓度、F:P比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值)应该相同为最佳,这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义,切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照,最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备(如同一品牌)的产品。


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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TPO(Thrombopoietin)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TPO与单抗结合,加入生物素化的抗人TPO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strep 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人b-Defensin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的b-Defensin与单抗结合,加入生物素化的抗人b-Defensin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Stre 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sCD36单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sCD36与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sCD36,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多>
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Angiotensin-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Angiotensin-2与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Angiotensin-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物 查看更多>
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人nAChR单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的nAChR与单抗结合,加入生物素化的抗人nAChR,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人E3单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的E3与单抗结合,加入生物素化的抗人E3,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结 查看更多>
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ELISA有些什么方法?各有啥优缺点?
终止液是2mol/L的H2SO4,将酶破坏,蛋白变性,从而改变颜色:由蓝变黄。
有的原理上说是(1)单抗包被-抗原-酶标二抗-底物显色。但是我看论文上都是(2)单抗包被-抗原-二抗-酶标二抗-底物显色。请问到底是什么?本人对双抗夹心ELISA不太懂。
我做的是血清中IKZF3测定,由于没有现成的试剂盒,自己从国内的CUSBIO定制的,分批订货。。前两次的标准曲线形状和公司提供的基本近似。但这一次却差太远。我做出来的近似线性,而公司提供的还是和原来的......
ELISA检测方法有哪些 123
captain小浪花2018-03-12
您好,厚百生物商城很高兴为您解答。Elisa常用的方法有四种:
1. 直接法测定抗原 2.间接法测定抗体 3.双抗体夹心法测定抗原4. 竞争法测定抗原 厚百生物专业提供各类生化实验试剂、仪器、耗材,提供技术服务,满足您的实验室常规采购需求。厚百,让您更省心!
冲洗不净,残留的酶结合物会分解底物显色,引起本底太高而出现错误
双抗体夹心法:
(1) 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
(2) 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
(3) 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
(4) 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
(5) 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
(6) 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
两者其实叫同已 酶联免疫(eia) 翻译结:enzyme linked immunosorbent assay (eia) 缩写另种形式ELIS
表面抗原和E抗原采用的是双抗体夹心法,
表面抗体是双抗原夹心法
E抗体和核心抗体是竞争抑制法或间接法
方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
  1. 包被:用0.05M PH9,碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
  方法二:用于检测未知抗体的间接法:
  用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30~60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
说实在 我没听说过三步法,不知道你在说什么建议楼主查询文献吧
ELISA抗体夹心法测afp的目的和原理?