| Target | Akt1(pS473) |
| Reactivity | Human,Mouse,Rat |
| TestedApplications | ELISA |
| Recommendeddilutions | Optimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser. |
| Storage | Shippedat4°C.Uponreceipt,storethekitaccordingtothestorageinstructioninthekit"smanual. |
| Validity | 6months. |
| UniProtPrimaryAC | P31749(UniProt,ExPASy) |
| UniProtSecondaryAC | B2RAM5,B7Z5R1,Q9BWB6 |
| UniProtEntryName | AKT1_HUMAN,AKT2_HUMAN,AKT3_HUMAN |
| GeneSymbol | AKT1,AKT2,AKT3 |
| GeneID | 207 |
| OMIM | 164730 |
| String | 9606.ENSP00000451828 |
| ELISADetection | Colorimetric |
| PlateCoating | Cell |
| Substrate | TMB |
| DetectionAntibodyConjugation | HRP |
| AvailABIlity | Shippedwithin1-2weeks. |
| Note | Thisproductisforresearchuseonly. Therangeandsensitivityissubjecttochange.Pleasecontactusforthelatestproductinformation.Foraccurateresults,sampleconcentrationsmustbedilutedtomid-rangeofthekit.Ifyourequireaspecificrange,pleasecontactusinadvanceorwriteyourrequestinyourordercomments. PleasenotethatourELISAandCLIAkitsareoptimisedfordetectionofnativesamples,ratherthanrecombinantproteins.Weareunabletoguaranteedetectionofrecombinantproteins,astheymayhavedifferentsequencesortertiarystructurestothenativeprotein.ResearchArticlesonAkt1(pS473)CellELISAKit Abbexa是一家致力于为生命科学研究、药物研发及生物技术公司提供优质抗体、蛋白及检测试剂盒等产品的高科技生物技术公司。基于剑桥大学研发技术优势,Abbexa提供包括一抗、二抗、纯化蛋白、ELISA试剂盒、各种酶类及其它多种试剂与研究工具的大量生命科学研究产品。 目前Abbexa的产品涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂,此外,为满足研发人员特殊的实验需要,Abbexa还提供抗体/多肽定制服务。严格的质控标准保证了Abbex产品的高性能,如您对产品不满意,Abbexa将直接提供退/换货服务 CLIAKits 化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA) RNAInterferenceProducts RNA干扰试剂 RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。 由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。 1. RNAi抑制转座子活性 两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关 ①发现蠕虫mut-7基因参与RNAi并且与转座子的转座抑制有关; ②在果蝇中,参与RNAi的RNA解螺旋酶Spindle-E的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。 2. RNAi抵御病毒感染 在拟南芥中研究转基因引起基因沉默时发现,sgs2/sde1基因突变的拟南芥对病毒的侵染表现出高度的敏感性。 3. RNAi参与异染色质的形成和维持 Hall等研究表明,着丝粒同源重复序列和RNAi组分一起正负调节着异染色质的形成并共同促使异染色质组装成核;Vople等在敲除裂殖酵母(S.pombe)的RNAi途径基因(如Argonaute、Dicer、RDRP)时发现异染色质转录得到的dsRNA可以在RNAi途径的参与下,加工成siRNA,siRNA募集异染色质蛋白1(HP1),然后靶向性引起相应异染色质区域的转基因沉默。 4. RNAi参与机体的发育调控及生理代谢 RNAi只抑制转录后的基因,所以RNAi在生物体发育学研究中具有优势。Chuang等用RNAi技术进一步证实了AG、CLV3、AP1、PAN等已知功能基因在拟南芥花发育过程中的功能。在RNAi过程中形成的RISC复合物可根据不同情况分别利用siRNA或stRNA行使不同的功能,但最终均导致特定基因沉默。 IsotypeControl 同型对照 同型对照(IsotypeControl),使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。 同型对照 同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体,与功能阻断抗体发挥同样的功能。 同型对照要与一抗的来源,Ig分型和标记完全一致。 如果一抗是多抗,可以用annormalserum(与一抗相同的正常血清)(mustbethesamespeciesasprimaryantibody)。Thiscontroliseasytoachieveandcanbeusedroutinelyinimmunohistochemicalstaining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同,应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子:比如检测一抗为单抗的mouseantiratCD11b,cloneOX-42purifiedIgG,那么它的isotype是mouseIgG2a,所以可以用purified(纯化的)mouseIgG2a来做OX-42的同型对照(IsotypeControl)。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。 同型对照:是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类,若使用直接免疫荧光染色法,同型对照也应标记荧光色素,如IgG1FITC、IgG2a、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外,同型对照与MoAb所标记的荧光色素、浓度、F:P比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值)应该相同为最佳,这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义,切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照,最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备(如同一品牌)的产品。 蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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2018-12-26
st1:*{behavior:url(#ieooui) } /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable{mso-style-name:普通表格;mso-tstyle-rowband-size:0;mso-tstyle-colband-size:0;mso-style-no 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人GRO-b/CXCL2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GRO-b与单抗结合,加入生物素化的抗人GRO-b,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sCD36单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sCD36与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sCD36,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人NF-kBp65单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的NF-kBp65与单抗结合,加入生物素化的抗人NF-kBp65,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人sTRAILR4单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sTRAILR4与单抗结合,加入生物素化的抗人sTRAILR4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Angiotensin-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Angiotensin-2与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Angiotensin-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人LPa单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的LPa与单抗结合,加入生物素化的抗人LPa,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素 查看更多
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2021-09-23
v:* {behavior:url(#default#VML);}o:* {behavior:url(#default#VML);}w:* {behavior:url(#default#VML);}.shape {behavior:url(#default#VML);}st1:*{behavior:url(#ieoo 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Angiotensin-2单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Angiotensin-2与单抗结合,加入生物素化的抗人Angiotensin-2,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔RANKL单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的RANKL与单抗结合,加入生物素化的抗兔RANKL,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗兔PAI-1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的PAI-1与单抗结合,加入生物素化的抗兔PAI-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生 查看更多
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2021-09-01
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ELISA的基本原理和方法123
ballance1﹒L収2018-02-23
它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。
在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂) ②酶标记的抗原或抗体(标记物)③酶作用的底物(显色剂) 测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。 其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。向左转|向右转
大多数人都不知道的酶标法_夹心法ELISA_ELISA试剂盒_试剂盒_蚂...123
liyouqiang6662021-08-11
本人用一重组蛋白(该蛋白存在于人体的血清中)制备了该蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体,并且单多克隆抗体都用竞争法证实了可以识别血清中该蛋白的天然形式。
目前,我用该蛋白的鼠源性单抗来包被ELISA板子,5%BSA37度封闭二小时后,洗涤四次后将板子分三个组加入抗原:其中一个组中加入的是我重组的蛋白,另一个组为用其它方法证实含该蛋白的人体内血清,最后一个组加入PBS。37度一小时后洗涤四次后每孔加入我制备的兔源性多抗。37度一小时洗涤六次后我再加入酶标记的抗兔的抗体37度40分钟后洗涤六次后TMB显色。 问题就在我显色后所有的孔都是阳性,其中以抗原为我的重组蛋白组与PBS组OD值最高,两组都可以达到1.8以上,而加入的抗原为人体血清组低,为0.6-1.0不等。 后面我优化条件,封闭液用过5%的脱脂奶粉,2%的BSA,包被的单抗浓度摸了梯度,加入的多抗也摸了梯度,酶标的抗体也摸了梯度。结果都没有改变,连趋势每次都是一样以重组蛋白组与PBS组OD最高。 今天我还试着把抗原换成其它蛋白也做出了强阳性? 请教各位高手,我的ELISA该如何往下面做了啊,是不是我的抗体本身有问题呢? 对了,我包被用的单抗是用GE公司的预装柱纯化的,很纯,在考染中是看不到一条杂带的。
【求助】夹心法ELISA标准曲线是否应该与试剂盒里提供的一致? ...123
memesasa2021-08-15
什么叫ELISA法 123
磊磊笑嘻嘻捹2018-02-24
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA) 。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题 ,它是一种特殊的试剂分析方法,是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。
【求助】EIA和ELISA法的区别与应用 免疫学讨论版论坛123
纳迟WO072018-03-11
两者其实叫同已 酶联免疫(eia) 翻译结:enzyme linked immunosorbent assay (eia) 缩写另种形式ELIS
ELISA检测方法有哪些 123
captain小浪花2018-03-12
您好,厚百生物商城很高兴为您解答。Elisa常用的方法有四种:
1. 直接法测定抗原 2.间接法测定抗体 3.双抗体夹心法测定抗原4. 竞争法测定抗原 厚百生物专业提供各类生化实验试剂、仪器、耗材,提供技术服务,满足您的实验室常规采购需求。厚百,让您更省心!
双抗体夹心法elisa 两步法和三步法的区别_问答详情_蚂蚁淘,【正品...123
xyl20032021-08-05
夹心法ELISA的阴性对照,空白对照有何意义 123
斑竹威武1252021-07-31
阴性值一般比较接近空白值,设置阴性对照,主要还是排除所加样品里有没有其他物质对实验干扰引起显色,导致所测值偏高本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
ELISA中双抗体夹心法与间接法的区别在哪_上海江林生物科技有限公司123
小芯9月6日2482021-08-16
双抗体夹心法:
(1) 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 (2) 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 (3) 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。 (4) 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。 (5) 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6) 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 间接法: 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
如何判断竞争法、间接法和夹心法ELISA 中的结果? 实验方法 123
Elab伊莱瑞特2021-07-30
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:
1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体.洗涤除去未结合的抗体及杂质. 2) 加受检标本,保温反应.标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物.洗涤除去其他未结合物质. 3) 加酶标抗体,保温反应.固相 免疫 复合物上的抗原与酶标抗体结合.彻底洗涤未结合的酶标抗体.此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关. 4) 加底物显色.固相上的酶催化底物成为有色产物.通过比色,测知标本中抗原的量.在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg,HBeAg,AFP,hCG等.只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法.如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物.如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物.这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测. 在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物".类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落.钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果.因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg,AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的最高值.用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应. 假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物.但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr,adw,ayr,ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题. 双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰.RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合.用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应.采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰.双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响,已被列为这类试剂的一项考核指标(参见6.2). 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心. 2.2 双抗原夹心法测抗体 反应模式与双抗体夹心法类似.用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体.与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体.此法中受检标本不需稀释,可直接用于测定,因此其敏感度相对高于间接法.乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法.本法关键在于酶标抗原的制备,应根据抗原结构的不同,寻找合适的标记方法. 竞争法测抗体 当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体.其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合.标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应.如抗原为高纯度的,可直接包被固相.如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原.洗涤除去抗原中的杂质,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应.竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc ELISA一般采用此法.另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应.抗HBe的检测一般采用此法. 2.5 竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式.其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合.标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,最后的显色也愈浅.小分子激素,药物等ELISA测定多用此法.
如何选择ELISA试剂?123
希尔德丶2302018-01-17
我觉的也可以用间接法;
如果用双抗体夹心法,第二个抗体可以用多抗,这样保证你的抗原会被结合,多抗可以直接带HRP标记或者可以用HRP标记二抗去和多抗结合。
ELISA双抗体夹心法 实验方法 123
gaochangjian72021-08-20
http://wenku.baidu.com/view/9b2aea155f0e7cd184253638.html
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