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Biomatik/Human 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD) ELISA kit, Cat#EKU02025/96 Tests/EKU02025-96 Tests
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Biomatik/Human 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD) ELISA kit, Cat#EKU02025/96 Tests/EKU02025-96 Tests
品牌 / 
Biomatik
货号 / 
EKU02025-96Tests
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4000-520-616

Format

96-Well Plate

Species Reactivity

Homo sapiens (Human)

Sample Type

Serum, Plasma, Tissue homogenates and other biological fluids

Detection Range

0.78 -50 ng/mL

Sensitivity

0.32 ng/mL

Estimated Turnaround Time

7-11 business days

Target Name

4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase

Target Synonyms

PPD, 4-HPPD, 4HPPD, GLOD3, Glyoxalase Domain Containing 3, 4-hydroxyphenylpyruvic acid oxidase

Precision

Intra-assay Precision (Precision within an assay): 3 samples with low, middle and high level 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase were tested 20 times on one plate, respectively. Inter-assay Precision (Precision between assays): 3 samples with low, middle and high level 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase were tested on 3 different plates, 8 replicates in each plate.CV (%) = SD/meanX100;Intra-Assay: CV<10%;inter-assay:><>

Detection Method

Colorimetric

Assay Time

3 hours

Application

ELISA

Assay Type

Double-antibody Sandwich

Shipping Condition

Ice packs

Storage

Short term: 4°C; Long term: see manual.

Precaution of Use

The Stop Solution is acidic. Do not allow to contact skin or eyes.

Expiry Date

8 months

UniProt ID

P32754

Specificity

This assay has high sensitivity and excellent specificity for detection of 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase

Cross Activity

No significant cross-reactivity or interference between 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase and analogues was observed.

Assay Procedure

1.Prepare all reagents, samples and standards; 2.Add 100 µL standard or sample to each well. Incubate 2 hours at 37°C; 3.Aspirate and add 100 µL prepared Detection Reagent A. Incubate 1 hour at 37°C; 4.Aspirate and wash 3 times; 5.Add 100 µL prepared Detection Reagent B. Incubate 30 minutes at 37°C; 6.Aspirate and wash 5 times; 7.Add 90 µL Substrate Solution. Incubate 10-20 minutes at 37°C; 8.Add 50 µL Stop Solution. Read at 450 nm immediately.

Stability

The stability of kit is determined by the loss rate of activity. The loss rate of this kit is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition. To minimize extra influence on the performance, operation procedures and lab conditions, especially room temperature, air humidity, incubator temperature should be strictly controlled. It is also strongly suggested that the whole assay is performed by the same operator from the beginning to the end.

Restrictions

For Research Use Only. Not for use in vitro diagnostic procedures, drug use, or for administration to humans or animals.

Quality Systems

The kit is manufactured at ISO 9001 and ISO 13485 certified facilities.

Quality Assurance

Biomatik ELISA kits are not typically pre-assembled as finished products due to limited shelf life. Before shipping, each kit is assembled and tested to ensure that it meets specifications before shipping. Minor changes may occur to the Detection Range, Sensitivity, and Precision. All kits are tested to confirm that they fall within their defined Inter- and Intra- assay coefficient of variation. Please always refer to the hard copy manual included in The kitbefore experiment.

Research Area

Enzyme & Kinase

Biomatik—供应生物试剂、免疫、基因、多肽/蛋白、抗体 Biomatik公司成立于2002年,致力于为全球科研工作者供应高质量的分子生物学、免疫学、药物研发等领域产品及服务。供应的产品囊括生物试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒,定制基因、多肽及抗体等产品。此外,我们还提供完善的生物制品定制服务,包括基因、多肽/蛋白及抗体等。为研究人员提供zui优的产品和服务是我们赖以成功的保证,因此我们确保我们的产品与服务具有百分百的满意度保证。   Biomatik公司主要产品: 一、生物试剂系列产品:该系列产品含有360多款实验室常用的生化、酶类及PCR试剂,多款产品有不同的纯化级别(Biotechnology、 High Purity、 Ultra Pure、 Certifiable 、ACS 、USP等),这些产品备有存货,可尽快发货到实验室。   二、免疫检测产品系列:(ELISA /CLIA试剂盒):该产品系列包括7200多款ELISA /CLIA试剂盒,5300多款重组蛋白产品。   三、定制化合成基因:Biomatik在化学合成基因上有着丰富的经验,特别在长复杂基因合成上,可保证在zui短的时间内完成100%精确度的基因合成。   四、定制化多肽合成:Biomatik是高质量多肽合成领域中的佼佼者,所提供的合成产品纯度可从粗提至99%以上纯度(依据客户需要),合成量可从毫克到千克级。   五、定制化重组蛋白产品:Biomatik提供E.coli源重组蛋白产品,优质低价。未得到所要求蛋白全额退款。   六、定制抗体产品:Biomatik在定制抗体上执行着严酷的质量标准,所提供的单/多克隆产品定制服务可在两月内完成。  


Biomatik公司于2002年在加拿大成立,是生物试剂一站式购物中心,提供7000多种ELISA试剂盒,5300多种重组蛋白,350多种生物试剂。 特色产品包括定制基因和多肽、以及PCR产品和酶。特色生化试剂包括三羟甲基氨基甲烷(Tris)、琼脂糖、白蛋白、核糖核酸酶A(RNase A0)\蛋白酶 A 和溶菌酶、半乳糖苷等。﹙网址:http://www.biomatik.com ) 日前,毕特博生物公司已成功取得Biomatik的授权和代理,Biomatik的各大产品均可在我司查询订购。 加拿大Biomatik成立于2002年,公司创建伊始就以为全世界的生命科学和药物研发工作者提供高质量的科研用品和服务为奋斗目标。 产品涵盖生化试剂、重组蛋白、ELISA试剂盒、基因定制和多肽合成及蛋白及抗体的定制生产等。 公司之所以能成功,因为我们始终把您的科研需要摆在第一位,为您独一无二的研究项目提供完美的产品和服务。 我们的长远目标是成为您科研道路上中可靠的合作伙伴。 Biomatik为您提供工业领先的创新产品和高效的客户服务。 公司在为您提供高质量的产品,满足您科研需要的同时,也为您节省研究经费,努力创造双赢的局面。 这为我们在业内带来持续不断的竞争力,成长和品牌认可,也是我们所推崇的高质量产品服务带来的回报。

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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CytochromeP450单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CytochromeP450与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CytochromeP450,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠Ghrelin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Ghrelin与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠Ghrelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sFas单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sFas与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sFas,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与 查看更多>
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sICAM-1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sICAM-1与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sICAM-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta 查看更多>
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采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠IL-18单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的IL-18与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠IL-18,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 查看更多>
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2018-12-26
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠eNOS单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的eNOS与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠eNOS,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CytochromeC单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CytochromeC与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CytochromeC,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠趋化因子受体-4(CXCR4)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CXCR4与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CXCR4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶 查看更多>
采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠sIL-6R单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的sIL-6R与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠sIL-6R,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavid 查看更多>
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这是我最近用Elisa做出来的标准品的浓度(X)和OD值(Y),想请教一下各位老师该如何绘制标准曲线,我的试剂说明书上面没有写如何做,只说是做拟合双对数直线回归方程。论坛查了很久也没有找到具体的方法。希望能得到各位老师的指点,谢谢!(附上录入结果的文件)

X     Y
02.532
501.272
1000.688
2500.31
5000.176
10000.116

chymase.dat(0.06k)
Elisa标准曲线绘制方法123
yuxh_19782021-07-23
大家好!
我现在正在应用ELISA试剂盒检测血清TSH
在预实验中,得到如下的结果:
B(450nm)1.575,0.710,0.431,0.225,0.160,0.062
标准品浓度为(ng/ml)0,0.5,1.0,2.5,5,10
根据试剂盒的说明书,以B/B0%为纵坐标,以标准品的浓度为横坐标,在对数坐标纸上绘制标准曲线,在标准曲线上查找对应的浓度范围。
请问最后模拟出的应是一条直线(二元一次方程)还是一条曲线?
请大家指教。
急!!!
大多数国产试剂盒生产厂家会提供对数坐标纸,可直接手工绘制曲线;如果酶标仪带有分析软件,可由软件直接拟合曲线,并自动计算出样本的浓度值;老式的酶标仪只能打印出OD值,需要实验员自己绘制曲线并计算,下面介绍2种绘制竞争法曲线的方法,希望对大家有帮助:一、在对数坐标纸上手工绘制曲线(Log-logit双对数标准曲线)1.实验做双孔,实验结果如下表所示。标准点浓度OD1OD2OD均结合率S002.2262.1922.209S10.11.7251.6791.70277.0%S20.41.3131.3381.325560.0%S31.60.9070.8340.870539.4%S46.40.5170.5170.51723.4%S525.60.2300.2440.23710.7%2)各标准点吸光值取均值。在表中OD均一列。3)将S1~S5的OD均值与S0的OD均相除,为标准点的百分结合率。4)在log-logit坐标纸上绘图。5)坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位,第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。也就是说,如果第一个1代表1ng/ml,则第二个1代表10ng/ml,第三个1代表100ng/ml。因为本次实验标准曲线范围是从0.1ng/ml到25.6ng/ml,则可以用第一个1代表0.1ng/ml,第二个1代表1ng/ml,第三个1代表10ng/ml。6)坐标纸纵轴为百分比。即各标准吸光值的百分结合率。7)曲线第一个数值点是(0.1,77.0%)。则在横轴左起点的1处向上至70~80之间,由70向上7个小格处。8)曲线第二个数值点是(0.4,60.0%)。则在横轴左起第一个4,向上至60的位置。9)曲线第三个数值点是(1.6,39.4%)。则在横轴左起第二个1至2之间,由第二个1向右6个小格。再向上至30~40之间,由30向上9个半小格处。10)曲线第四个数值点是(6.4,23.4%)。则在横轴左起第二个6至7之间,这里6与7之间分为5小格,则每个小格是0.2。所以由第二个6向右2个小格。再向上至20~30之间,由20向上约3个半小格处。11)曲线第四个数值点是(25.6,10.7%)。则在横轴左起第三个2至3之间,这里2与3之间分为10小格,则每个小格是1。所以由第三个2向右5个半小格。再向上至10~20之间,由10向上约半小格处。12)画一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上,同时剩余的点均匀分布在直线的两边。13)样品也同样由吸光值计算百分结合率,再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点,此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度。无须换算。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。

竞争法ELISA测出标准曲线已有梯度,但样本OD值偏偏低很多,这导致样本浓度是既往文献报道的的100~1000倍会可能是什么原因?

附:

standerdsample1sample2

blank0.0690.1810.189

totalbinding1.9020.320.28

standerd10.1770.260.203

standerd21.0010.1290.136

standerd31.660.1770.183

standerd41.7060.1680.172

standerd51.6360.1880.127

poscontrol2.250.1410.226


各位大神帮看看是什么原因所致?

为什么HBeAbHBcAb的ELISA要用竞争法呢?加样快慢差异很大,不能用其他方法吗?谢谢
RT。本人在做一个竞争法测定某单表位抗原ELISAkit开发项目。

抗体没有问题,包被在微孔板上的抗原也没有问题,且用纯度较高的抗体与梯度稀释的高纯度的抗原在37℃孵育竞争时,抗体能结合到微孔板上,显色后能得到非常好的标准曲线。

但是一旦用该抗体来检测血清中的该抗原时,抗体就不再和包被的微孔板上的抗原结合,无显色。血清中的成分非常复杂,但是不至于完全阻碍了抗原和抗体的结合啊?百思不得其解,希望版上的有经验者能不吝赐教。
我做一个小分子竞争法ELISA实验,抗体是购买来的。
我采用抗体包板,用小分子标记hrp与样本小分子进行竞争实验,做出来的结果的IC50一直在10ng/ml的标准品浓度左右浮动,是否说该抗体只能达到这样的灵敏度要求了,还是说还可以有些其他可以做最后的拯救呢?毕竟卖一个抗体价格也不便宜啊,实验还做不出来的话,老板要发火了…………
:(我第一次用ELISA竞争法来测试样品中抗原含量,发现做出的标准曲线上限,也就是试剂盒中浓度为0的标准品所限定的范围比样品的还低,想不通是哪里出了问题(确保都是按照试剂盒说明书操作)?请哪位高人为我指点迷津。多谢了!!

GM实验:试剂说明书上要求20分钟显色,10分钟的时候看一下,差不多就可以加终止液,但是我的标曲显色特别快,2分钟最低浓度蓝色就就深了,此时样本颜色还很浅很浅,我只能一块儿加终止液。所以,标曲显色过快,可能是什么原因?

(ps:第一列是标曲,后面是样本)


最近在建立一个间接竞争法的ELISA定量方法,标准品梯度,复孔都很好,不知道结果如何处理:(
我用的是biotek的EL800酶标仪,有用过这种方法的老师,恳求指点。
以下为实验的标准品OD:

3ug/ml0.182
10.3515
0.30.4515
0.10.628
0.030.777
0.0120.9185
0.0040.9965
BLK1.1755

期待。。。
直接竞争ELISA和间接竞争ELISA区别
  1、直接竞争,标记抗原,与检测样品中的抗原竞争抗体。
  2、间接竞争,标记抗体,固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。
  3、定义
  间接竞争法的模型:包被抗原,用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab,固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。
  直接竞争法的模型:包被抗体,用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab,固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。
  4、竞争法的理论基础:是限量抗体。只有在限量抗体基础上,两种抗原才会形成竞争关系。
  5、、间接竞争法具备较高灵敏度原因。
  直接竞争法里,标记抗原与待测抗原均是液相,与抗体的结合机会是一样的,例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体,那么有50%的标记抗原能与抗体结合,所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里,固相抗原与抗体的接触面积较小,固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的,接近顺序饱和法,即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合,同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时,基本上抗体会被待测抗原中和掉,与固相抗原结合的抗体非常少。固相抗原的相对结合率为0%。因此,间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。
  因为抑制率越大则斜率越大,从而灵敏度越大。(假设零管变异5%,以两倍SD为灵敏度限,则为90%相对结合率,则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率,因此灵敏度要高。)
  在进行系统放大时,间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位,所以存在放大效应,从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大,常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素,但模式上似乎不存在放大效应。
  6、间接法的高灵敏度难以实现的原因:
  双抗体 夹心的免放(IRMA)模式刚出现时,也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免(RIA),原因也是较大的斜率,但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。
针对于HBeAb的中和抑制法

采用抗-HBe抗体包被反应板,加入校准品及被测样本,同时加入定量HBeAg中和抗原,经过振荡孵育,洗板后再加入铕标记的抗-HBe,若标本中抗-HBe浓度高,HBeAg将被大量中和,使最后形成的抗-HBe-HBeAg-铕标记抗-HBe复合物减少。增强液(β-NTA)将标记在抗体上的Eu3+解离到溶液中,Eu3+和增强液中的有效成分形成高荧光强度的螯合物,荧光强度和样本中的抗-HBe浓度成反比。