Artikelnummer | KIT 036RUO |
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Artikelgruppe | |
Artikelbezeichnung | NGAL (LCN2) ELISA Kit |
Spezies-Reaktivität | Human |
Spezifität | NGAL, LCN2 (Neutrophilen Gelatinase-ass. Lipocalin) |
Testprinzip | Sandwich-ELISA |
Inhalt | biotinylierter Detektionsantikörper (gebrauchsfertig), Fang-Ak-beschichtete Mikrotiterplatte (12 Streifen-Module à 8 wells) & Rahmen, Interne Kontrollen (High & Low), Mengenstandards (ready to use), Proben-Verdünnungspuffer (5x), Stopplösung (ready to use), Streptavidin-HRPO (ready to use), TMB-Substrat, Waschpuffer (25x) |
Capture/Detektions-Antikörper | anti-NGAL mAk/anti-NGAL mAk Biotin |
Isotyp | mAk/mAk |
Probenmaterial | Gewebeextrakt, Plasma, Serum, Urin, Zellkulturüberstand |
Probenvolumen | 100 µl, Verdünnung 1:500 (Urin) |
Nachweisgrenze | < 4 pg/ml |
Detektionsbereich | 10 – 1000 pg/ml |
Substrat | TMB (3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin) |
Zeit/Protokoll | < 4 h |
Zweckbestimmung | nur für Forschungszwecke |
Wellenlänge | 450/620 nm |
Suchcode | KIT036 |
Packungsgröße | 96 Tests |
Hersteller / Marke | BioPorto Diagnostics |
Alias | 25 kDa alpha-2-microglobulin-related subunit of MMP-9, HNL, LCN2, Lipocalin 2, Lipocalin-2, Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin, Neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL, Oncogene 24p3, Siderocalin LCN2 |
Uniprot_ID | P80188 |
- KIT 036RUO – Datenblatt
- NGAL Produktübersicht 06-2014
- NGAL Monomers and Homodimers
- NGAL References
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1、直接竞争,标记抗原,与检测样品中的抗原竞争抗体。
2、间接竞争,标记抗体,固相抗原与液相抗原(样品)竞争标记抗体。
3、定义
间接竞争法的模型:包被抗原,用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab,固相吸附的HRP-Ab与样本中的Ag浓度成反比。
直接竞争法的模型:包被抗体,用HRP-抗原与样本一起加入。样本中的Ag与HRP-Ag竞争Solid-Ab,固相吸附的HRP-Ag与样本中的Ag浓度成反比。
4、竞争法的理论基础:是限量抗体。只有在限量抗体基础上,两种抗原才会形成竞争关系。
5、、间接竞争法具备较高灵敏度原因。
直接竞争法里,标记抗原与待测抗原均是液相,与抗体的结合机会是一样的,例如有1份标记抗原与1份待测抗原竞争1份抗体,那么有50%的标记抗原能与抗体结合,所以标记抗原的相对结合率为50%。间接法里,固相抗原与抗体的接触面积较小,固相抗原与待测抗原的结合抗体机会是不平等的,接近顺序饱和法,即只有与待测抗原结合剩余的抗体才会与固相抗原结合,同样有1份固相抗原与1份待测抗原竞争1份抗体时,基本上抗体会被待测抗原中和掉,与固相抗原结合的抗体非常少。固相抗原的相对结合率为0%。因此,间接法的抑制曲线斜率会大于竞争法。
因为抑制率越大则斜率越大,从而灵敏度越大。(假设零管变异5%,以两倍SD为灵敏度限,则为90%相对结合率,则间接法可以在较低的待测抗原浓度达到这一相对结合率,因此灵敏度要高。)
在进行系统放大时,间接法一般可以使用酶标二抗。因为二抗可以针对抗体的多个部位,所以存在放大效应,从而能提高间接法的灵敏度。直接法一般难以进行放大,常用的有生物 素化抗原与酶标亲和素,但模式上似乎不存在放大效应。
6、间接法的高灵敏度难以实现的原因:
双抗体 夹心的免放(IRMA)模式刚出现时,也被模型证明灵敏度优于竞争法的放免(RIA),原因也是较大的斜率,但是IRMA的高灵敏度一直到单抗发展后才得以实现。
GM实验:试剂说明书上要求20分钟显色,10分钟的时候看一下,差不多就可以加终止液,但是我的标曲显色特别快,2分钟最低浓度蓝色就就深了,此时样本颜色还很浅很浅,我只能一块儿加终止液。所以,标曲显色过快,可能是什么原因?
(ps:第一列是标曲,后面是样本)