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제품특징
□ 특징
● 특화된 악세서리 단백질로 반응 특이성을 향상시킴
● 높은 반응 특이성으로 비특이적 band를억제함
● 타사 제품보다 짧은 반응 시간
● Hotstart PCR로 smear 현상을 억제함
□ 제품설명
MultiplexPCR은 하나의 PCR반응장치에 여러 primer 쌍을 동시에 사용하는 것으로 복수의 유전자 영역을 동시에 증폭하는 방법이다. multiplex PCR을 진행하면 시약과 소모품을 절약할 수 있고 동시 여러 유전자를 신속하게 검출 할 수있다는 장점과 귀중한 샘플을 절약할 수 있다.본 키트는 기존의 multiplex 효소에 비해 특이적 서열에 의한 증폭 편중 현상이 적은 PCR증폭을단시간에 실현한다. 또한 효소 양과 반응 시간을 조정함으로써 200 primer 쌍 정도의 multiplex PCR도 가능하다. multiplex PCR 이외에도 extra band나 smear 현상으로 목적 단편을 증폭하기 어려운 primer 쌍을 이용한 single PCR에도 본 제품을 사용하면 extra band나 smear를 줄이고 목적의 단편을 보다 단시간에 특이적으로 증폭할 수 있다.
□ 내용 (50 ㎕ 반응 계, 100회)
2×Multiplex PCR Buffer (Mg2+,dNTP plus)* | 1.25 ml x 2 |
Multiplex PCR Enzyme Mix | 25 ㎕ |
*반응에 필요한 buffer,dNTP Mixture가 포함되어 있다. (Mg2+농도는최종 농도 2 mM)
□ 보존
-20 ℃
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对于新手来说购买反转录试剂盒是比较理想的,买一个kit看看说明书操作就可以了。推荐两款kit TAKARA和HaiGene,这两款试剂盒都能对RNA样品中的gDNA有效去除,因此对RNA质量的要求不高。TAKARA的RR047A操作方便,反转录温度为37℃,对于大多数试验来讲是满足要求的。HaiGene的D0401操作要多一个步骤,但其反转录温度是55℃(耐高温的反转录酶),提高了反转录温度使得高GC含量、复杂模板、长mRNA的模板都能有效反转录,因此其反转录效率更高,更能够获得样本中基因的真实表达量。如果后续试验是RealTime PCR、ORF克隆、高GC含量、或者你的待研究基因结构复杂程度未知,还是选用耐高温的反转录酶更理想。对于反转录高手来说,直接购买反转录酶、再购买Rnase Inhibitor自己配制反转录体系就可以了。对于样本量大的课题组来讲,相对还是比较经济的。选择反转录酶时仅需要考虑是否需要耐高温的酶,来克服目的基因的复杂结构就可以了。PROMEGA、TAKARA、HaiGene、 TRANSGEN等品牌的反转录酶性价比还都是不错的。Life、NEB的也不错,不过性价比一般,不一一解释了。
如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。不需要特别的试剂盒、
逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。此过程中,核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反,故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一,需逆转录酶的催化。 逆转录过程的揭示是分子生物学研究中的重大发现,是对中心法则的重要修正和补充。人们通过体外模拟该过程,以样本中提取的mRNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的cDNA,构建cDNA文库,并从中筛选特异的目的基因。该方法已成为基因工程技术中最常用的获得目的基因的策略之一。

