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Numerous techniques have been developed to prepare immunoliposomes based on the nucleophilic reactivity of free amine groups of proteins or peptides. One of the most popular and commonly used methods is to covalently couple free carboxylic groups to primary amines through activation of the carboxyl groups with EDC (1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide). EDC, which is a so-called zero-length crosslinking agent, reacts with the carboxyl to form an amine reactive intermediate (O-acylisourea). The produced O-acylisourea can be easily displaced by nucleophilic attack from the primary amino groups in the reaction mixture. However, this intermediate is unstable and hydrolyzed in aqueous solutions. In order to prevent the intermediate hydrolysis, sulfo-NHS (N-hydroxysulfosuccinimide) is added to EDC to produce a significantly more stable and more soluble active intermediate (NHS ester).
Consequently, the immunoliposomes are prepared by a two-step coupling procedure: first, activating the free carboxyl group of the linker lipid incorporated in the liposomes with EDC and sulfo-NHS, and then covalently conjugating the antibodies to the lipids through displacement of sulfo-NHS groups by antibody amines, as depicted below. EDC/sulfo-NHS coupling reactions are highly selective and highly efficient, and the biological activity of the protein or peptide is preserved.
ImmunoFluor™-Carboxylic Acid is a PEGylated product. For other amine reactive (PEGylated and non-PEGyalated products) and also ImmunoFluor™ products suitable for other types conjugation methods see here.
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2021-08-05
南京诺唯赞生物科技有限公司在发布的【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit供应信息，浏览与【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit相关的产品或在搜索更多与【正品直销，售后保障】（T7RNAi逆转录试剂盒）T7 RNAi Transcription Kit相关的内容。 查看更多
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2021-08-19
货号：A0010 查看更多
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2021-07-20
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2021-07-28
AMV逆转录酶从鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）中分离出来的，它拥有双重活性：1.5 > 3依赖引物的聚合酶活性，可以以RNA或DNA作为模板；2.具有3 > 5Rase H 活性，可以降解RNA/DNA杂合体中的RNA，它需要Mg2+或Mn2+激活。它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。AMV 逆转录酶在37℃-55℃的温度范围内有活性，最适温度为41℃-45℃，在以Tobacco Ve... 查看更多
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2021-09-10
默瑞（上海）生物科技有限公司，Leica显微系统，Merk Millipore实验室纯水超纯水仪，Roche实时定量PCR仪，Partec流式细胞仪，RPA，TwistDx 代理商，Echelon代理商，Jackson代理商,KAPA，enzymatics经销商等,莫纳生物集团企业。 查看更多
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2021-08-22
RT 007AMV逆转录酶是由杭州博日科技有限公司代理或销售的BioFlux品牌的试剂，产品来源于杭州。杭州博日科技有限公司是中国最权威的RT 007AMV逆转录酶试剂销售服务商之一，在杭州等地方销售RT 007AMV逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业RT 007AMV逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的RT 007AMV逆转录酶产品 查看更多
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2020-07-15
M-MLV逆转录酶；；M1701是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的solarbio品牌的试剂，产品来源于solarbio。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的M-MLV逆转录酶；；M1701试剂销售服务商之一，在北京等地方销售M-MLV逆转录酶；；M1701试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业M-MLV逆转录酶；；M1701仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的M-MLV逆转录酶；；M1701产品 查看更多
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2021-07-22
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2021-09-02
amv逆转录酶,逆转录酶病毒,逆转录酶抑制剂,核苷类逆转录酶抑制剂,m-mlv逆转录酶,端粒酶逆转录酶,hiv逆转录酶,逆转录酶价格,人端粒酶逆转录酶,逆转录酶活性 查看更多
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2021-08-23
反转录PCR（Reverse Transcription，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。... 查看更多
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2021-09-05
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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...哪些公司的miRNA提取试剂盒和逆转录试剂盒比较好 核酸基因技术讨论...123
liuhua2021-08-07
13楼
加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾，然后再用带oligodt的引物反转录，他的反转录引物是通用的，一次反转录可以获得所有miRNA的cdna，效率高。茎环法是采用特异性反转录引物序列+颈环结构作为反转录引物进行反转录的，一次反转录只能获得一种mirna的cdna，可能有几种一起反转录的，这个我不太清楚一起反转录的效果。然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。我用过茎环法反转录+染料法定量的，下游引物为通用引物，结果不太好，就现在用的这家的他采用的是双向引物都是特异性的，效果还可以。不知道我说的清楚不，希望能对你有帮助。
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mirna逆转录什么试剂盒好用123
柠七PD072017-10-06
miRNA荧光定量PCR检测试剂盒采用本试剂盒采用SYBR® Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。杭州昊鑫生物的
逆转录试剂盒逆转录出来的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
列刖2017-10-06
氯仿/，混匀,常温下13000g离心5分钟，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1：一链，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替，同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6．将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存。 8．加入30ul buffer EB;异戊醇： 1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5，再离心1min是单链cDNA。 3．加入spin column中.2)和2，混匀，加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5．取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟：第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二，想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9．13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后，待电泳检测，混匀,顺序加入下列试剂(promega)，且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物，13000rpm离心1min，确定双链的大小范围：一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时，静置10min，－20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀，静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10．加入1/。 4．加入0，2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5．13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7．13000rpm离心2min，二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6，13000rpm离心1min
提取RNA,然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒? 123
思念你IF542021-08-14
一个，运用反转录，以一条DNA单链为模板，以一个引物为转录的开始，通过DNA聚合酶进行链接(反转录的最终长度是不确定的，可能无限长)
癫痫患儿外周血CD19^+B,CD20^+B淋巴细胞和自然杀伤细胞的检测及...123
萿酱2017-10-01
逆转录一般用罗氏的，目前天根的全式金的也挺好用，还方便。
如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。不需要特别的试剂盒、
如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。不需要特别的试剂盒、
逆转录试剂盒123
苗苗8862021-07-22
我是RT-PCR新手，请问逆转录试剂盒里面有什么试剂组成的？在逆转录过程中要注意什么事项?谢谢！
逆转录试剂盒(Qiagen 205111)_逆转录试剂盒_供应信息123
我已习惯2021-07-29
买了广州复能的Genecopoeia的PCR逆转绿试剂盒，50次包装的，几个试剂盒，每个试剂盒也就能做30-40次，最caodan的是居然里面有空管，反应了几次，一副牛逼拉轰的样子，因为国内就你广州复能一家Genecopoeia代理呢？订了几次你们的试剂盒，次次都这样，缺斤短两的。不知各位大侠有没有遇到这样的情况。千万别说你用之前没离心这么SB的理由，做实验这么久时间，基本的常识还是有的。
【求助】mRNA逆转录后得到的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
风吹的纱2017-10-06
是单链cDNA，想合成双链cDNA需要另外操作：一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul 10mM dNTP(自己配制)xul dd H2O1ul RNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5．取2ul二链产物，同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder，确定双链的大小范围。注：一链，二链的电泳图是smear，且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注：第3，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程：1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇，混匀。2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB，混匀。3．加入spin column中，13000rpm离心1min。4．加入0.75ml buffer PE，13000rpm离心1min。5．13000rpm，再离心1min。6．将spin column放入一新的离心管中，加入50ul buffer EB，静置10min。7．13000rpm离心2min。8．加入30ul buffer EB，静置10min。9．13000rpm离心2min。10．加入1/10体积3M的NaAc，2.5倍体积无水乙醇，混匀，－20℃沉淀过夜。
【求助】小鼠逆转录可以用Thermo 的试剂盒吗 核酸基因技术 丁香 ...123
xiayu7909212021-08-01
近期要做小鼠的RNA纯化、逆转录，临做了才想起来小鼠可以用我们常用的试剂盒吗，ThermoScientificRevertAidHMinusFirstStrandCDNASynthesisKit,试剂盒中的引物Oligo（dT)Primer可以用于小鼠吗？
第一链反转录试剂盒 一般大家都买哪家的啊?123
軟鲆覌2017-10-06
博凌科为的THERMOscript1stStrandcDNASynthesisKit（第一链耐热反转录试剂盒）反转录温度耐受性比较强，效果不错本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNaseH活性缺失的M-MuLV反转录酶THERMOscriptHˉRTase。
【新手求助】 我该怎样走下去商友圈123
tobal20052011-09-08
我是菜鸟！！！请问各位站友：我在做RT的时候逆转录试剂盒放在室温下6个小时，忘记放回-20度了，请问还能用吗？主要担心酶会失活，试剂盒是TAKARA的PrimeScriptRTReagentKit。刚买的第一次用就这样了，着急啊，请各位大侠帮忙解答下，谢了
【求助】请问做microRNA的逆转录和PCR,能用普通的试剂盒吗? ...123
琳大小姐3042021-08-16
一般都是用针对miRNA的试剂盒，普通的逆转录方法我这里也做过，但是结果不是很稳定，你懂得！
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