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Gendepot/amfiFusion High Fidelity PCR Master Mix(2X), P0342/2x50 rxns/P0342-010
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High PerformanceHigher Specificity/ Higher Yield / Higher Fidelity
High FidelityamfiFusion High Fidelity DNA Polymerase has 5'-> 3' exonuclease activity of Taq DNA Polymerase as well as the 3'-> 5' exonuclease activity of the proofreading DNA polymerase.
amfiFusion High Fidelity PCR Master Mix combines amfiXpand Taq DNA Polymerase with high fidelity, proofreading DNA polymerase. This unique enzyme blend provides superior yields in both routine and challenging PCR. amfiFusion High Fidelity DNA Polymerase has 5’-3’ exonuclease acitivity of Taq DNA Polymeraseas well as the 3’-5’ exonuclease activity of the proofreading DNA polymerase.
amfiFusion High Fidelity DNA Polymerase increase amplication fidelity up to 6 times over Taq DNA polymerase alone and allows for amplication of longer product size up to 19Kb. amfiFusion High Fidelity PCR Master Mix includes asingle-strand DNA binding protein that is especially useful at blocking primers at lower temperatures making them unavailable for use by a polymerase. This DNA binding protein effectively blocks DNA synthesis from mis-priming events at lower temperatures.
In addition, amfiFusion High Fidelity PCR Master Mix containsred and yellow loading dyes to allow loading PCR product directly on a gel after thermal cycling, minimizing pipetting steps and providing easy visualization of sample.
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美国BIOTIUM公司开发的GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接... 查看更多>
产品描述LightCycler采用通过交替注入加热的空气以及环境温度的空气进行温度循环,转变速度可高达20℃/秒;高表面积/容积比的玻璃毛细管反应管,确保管内温度于热反应室的迅速平衡。30分钟内即可完成40个循环。采用LED冷光源,移动后无需校正,免维护。宽广的动力学范围:同一运行中可以测量10E0-10E10个拷贝浓度范围。高灵敏度:可从3pg人基因组DNA(约一个人的基因组当量)中检出单拷贝基因。重复性优良:同一热反应室提供完全相 查看更多>
2018-04-29
上海泉脉生物科技有限公司在发布的荧光定量PCR供应信息,浏览与荧光定量PCR相关的产品或在搜索更多与荧光定量PCR相关的内容。 查看更多>
Thermo/Lifetech/Qubit 3.0荧光定量【有钱任性,全新正品】长期2.5万促销手机:13585665563QQ:990907063Email:info@88-y.com商品名:Qubit3.0品牌名:Thermofisher产地:马来西亚原厂型号:Qubit3.0荧光定量仪原厂货号:Q33216体积:13.6cm*25cm*5.5cm重量:743g储存条件:常温规格/包装标准包装:Qubit3.0 荧光定量仪,1 个电... 查看更多>
小型仪器等。此外、上海抚生还代理了美国药典标准品,中检所标准品,sigma,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等国外各类知名公司的产品... 查看更多>
实时荧光定量PC R技术于1996年由美国Applied Biosys-terns公司推出。与常规PCR相比,它具有特异性更强、能有效解决PCR产物污染、自动化程度高、能对起始模板进行准确定量等特点。 ​ 实时 查看更多>
北京卓诚惠生生物科技股份有限公司在发布的CFX96 Touch 荧光定量PCR 检测系统供应信息,浏览与CFX96 Touch 荧光定量PCR 检测系统相关的产品或在搜索更多与CFX96 Touch 荧光定量PCR 检测系统相关的内容。 查看更多>
Vector systems for cloning different sizes of DNA fragmentsCell-based DNA cloning has been used widely as a tool for producing quantities of pure DNA for physi 查看更多>
BioradCFX384Touch(配装机试剂盒)荧光定量PCR仪是由仪多多生物商城代理或销售的bio-rad|Biorad品牌的仪器,产品来源于美国。仪多多生物商城是中国最权威的BioradCFX384Touch(配装机试剂盒)荧光定量PCR仪销售服务商之一,在上海等地方销售BioradCFX384Touch(配装机试剂盒)荧光定量PCR仪已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业BioradCFX384Touch(配装机试剂盒)荧光定量PCR仪仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的B 查看更多>
武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在发布的荧光定量PCR-【武汉巴菲尔生物】生物技术服务专家供应信息,浏览与荧光定量PCR-【武汉巴菲尔生物】生物技术服务专家相关的产品或在搜索更多与荧光定量PCR-【武汉巴菲尔生物】生物技术服务专家相关的内容。 查看更多>
北京华夏远洋科技有限公司在发布的TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量反转录PCR试剂盒)供应信息,浏览与TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量反转录PCR试剂盒)相关的产品或在搜索更多与TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量反转录PCR试剂盒)相关的内容。 查看更多>
荧光定量透明封板膜UltraClearPressureSensitiveSealingFilm185581上海蚂蚁淘生物科技有限公司荧光定量透明封板膜 查看更多>
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博陵科为 的 miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green),可检测pg级总RNA中miRNA的单碱基差异
  miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒( SYBR Green)中包含miRNA荧光定量检测的所有试剂,包括2×miRcute miRNA premix和Reverse primer.2×miRcute miRNA premix是专门为miRNA检测而研发的新一代荧光定量检测试剂,该检测试剂采用premix预混系统,包含了优化配比的dNTP、增强 剂、稳定剂等,且其中的DNA polymerase采用的是新一代抗体修饰的热启动技术,保证高特异性和高灵敏度。同时,还加入了 ROX作为内参染料,以使实时荧光定量PCR结果准确可靠。
  产品特点
  ■ 通量高:可用于从一个合成反应的cDNA中 检测多种miRNAs.
  ■ 特异性:性能优良的抗体热启动PCR聚合酶技术及其优化的反应体系避免了非特异性扩增。
  ■ 分辨率高:能分辨单碱基差异的miRNA.
  ■ 灵敏度高:可在低至pg级的总RNA中检测到特异表达的miRNA.
  适用范围
  ■ 对miRNA反转录后的cDNA进行荧光定量 PCR检测
  ■ 适用于各种类型荧光定量PCR仪
  保存条件:4℃避光保存,避免冻结。
miRNA第一链合成试剂盒miRNA荧光定量PCR检测试剂盒2 x miRNA Loading Dye你看看 提供技术支持本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
荧光PCR快速检测试剂盒123
小言微笑7962017-10-01
荧光定量PCR技术由于可以实现对起始模板定量及定性分析,检测产物量的变化。提供染料法荧光定量PCR试剂与探针法荧光定量PCR试剂。
天益峰的挺好的,25次的几百元
通基扩增技术证明孩体内存EB病毒特异遗传物质片段数字表示相染量数字0代表绝染考虑设备基线波都设定参考卡切值即参考值(比1000我记)3.68乘104说明孩染EB病毒
新研发出一个科研用试剂盒,但不清楚需要怎样做才能够生产和销售。只知道该试剂盒不应用于临床,所以不需要CFDA审批。了解相关内容的,请详细说明。另外,政府的哪个部门可以咨询相关信息?
前一段时间在百度中搜索,发现多年前写的一个关于荧光定量PCR技术的PPT有很多人看过或引用过,考虑到自己作荧光定量PCR工作已经了五年了,
做的实验以及解决的问题远比五年前多了,因此利用过年的时间,写点荧光定量PCR实验中的一些注意事项及感想,无论对错,都是希望对相关的人
员有些参考价值。
荧光定量PCR原理等大家都已经很熟了,我就不细说了,主要是写一些有人问过的事,希望写的内容是大家都关心的。
普通PCR与荧光定量PCR技术区别?
简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验,后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而
荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量,是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验
样本中某一特定的mRNA的含量等。
前些年有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。
SybrGreen、Taqman、Molecularbeacon、LUX这些方法如何选择?
从实验成本来讲,SybrGreen是最好的,基本上就是普通PCR加上一点SybrGreenI荧光染料即可,其信号强度也很好,还可以进行融解曲线分析等
,但缺点是只能在一个反应管内进行一种PCR反应的检测,另一个问题是非特异性扩增会影响实验结果,当然也有一些技术解决这些问题,后面会讲
到。对于研究人员来讲,如果需要检测的基因很多,而每个反应管中进行一种PCR反应的检测可以满足实验要求,则SybrGreen是最好的选择。
如果需要进行多通道实验,即在一个反应管中进行2种或以上的反应,则要选择其他的方法,最常用的是Taqman、Molecularbeacon,这两种都是探
针的方式,由于增加了探针的特异性,因此其扩增曲线反映的就是特异性产物的扩增曲线,不含有非特异性扩增的成分。因此商业用途的检测试剂盒
大都采用这一技术,以减少非特异性产物造成错误结论的可能性。其缺点在于探针成本较高,有时设计的探针并不合适,有造成损失的可能性。并且
要进行较多的实验条件的优化。这两种探针技术用于商业目的时都有专利问题,据说取得Molecularbeacon的许可权的成本相对较低,但只是据说。
另一种值得一提的是LUX探针,它也可进行多通道实验,但它没有Taqman和Molecularbeacon方法的增加探针特异性的功能,因此只能是一种折中的
方案,如果不考虑多通道实验,则不如SybrGreen法
这个看你自己的设置。qPCR仪一般是96孔板,最多有5个通道。理论上,你用一个通道作为内标,2个孔分别做阴阳性对照。那么可以做94*4=376个。当然这只是理论上的最大值,实际操作的时候受很多限制,如多重PCR之间的交叉反应导致无法合孔,样本量不足等。具体到肿瘤相关的突变检测试剂盒,目前拿到CFDA注册证的,最多的一个试剂盒可以同时检测54种突变。
检测方法编辑
检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法,操作方便,易于普及应用,其中抗体检测尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的测定,在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。

抗体检测
抗体检测
血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围,可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。
确证试剂
  筛检实验阳性血清的确证最常用的是Western blot(WB),由于该法相对窗口期较长,灵敏度稍差,而且成本高昂,因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高,WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。
FDA批准的另一类筛检确证试剂是-免疫荧光-试验(IFA)。IFA比WB的成本低,而且操作也相对简单,整个过程在1-1.5小时内即可结束。此法的主要缺点是需要昂贵的荧光检测仪和有经验的专业人员来观察评判结果,而且实验结果无法长期保存。现在FDA推荐在向WB不能确定的供血员发布最终结果时以IFA的阴性或阳性为准,但不作为血液合格的标准。
筛检试验
筛检试验主要用于对供血员进行筛查,因此要求操作简便,成本低廉,而且灵敏、特异。2012年,世界上主要的筛检方法仍然是ELISA,还有少数的颗粒凝集试剂和快速ELISA试剂。ELISA有很高的灵敏度和特异性,操作简单,仅需要实验室配备酶标仪和洗板机即可应用,特别适合于试验室大规模筛检使用。
颗粒凝集实验是另一种操作简单方便,成本低廉的检测方法,该方法结果可通过肉眼判定,灵敏度很高,特别适合发展中国家或大量筛选供血员时使用,缺点是必须使用新鲜样品,特异性较差。
80年代后期发展起来的斑点印迹检测(Dot-blot assay)是一种快速ELISA(Rapid ELISA)方法,这种方法操作极为简便,过程短暂,整个过程多数在5-10分钟内甚至3分钟内即可结束,但该法比ELISA和颗粒凝集试剂昂贵得多。
人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液检测试剂盒(胶体金法)就属于侧向免疫层析法(金免疫)类别,基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。可用于自愿咨询检测、不愿采血、晕针患者的初筛。该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需进行进一步筛查确认。[3]
【HIV阴性】说明从人体内检测不到HIV抗体,阴性符号以(-)表示。不能说没有感染HIV, 要看是什么时候检测的,在窗口期内,感染者的体内还没有产生HIV抗体,或还没有产生足量的HIV抗体,这时HIV检测是阴性结果,如果在窗口期之后检测的,可以排除感染HIV的可能。
【HIV阳性】说明从人体内检测到了HIV抗体,阳性符号以(+)表示。
【检测结果不定因素】
感染还处于窗口期:从HIV进入体内到检测这段时间还不够长,因此血清还没有形成典型的抗体反应
艾滋病进展到终末期,抗体水平下降
其他非病毒蛋白抗体的交叉反应:自身免疫性疾病、某些恶性疾病、怀孕、输血或器官移植等情况下,身体可以产生一些抗体,其反应与HIVP24核心蛋白抗体引起的反应很相似

抗原检测
病原检测主要指用病毒分离培养、电镜形态观察、病毒抗原检测和基因测定等方法从宿主标本中直接检测病毒或病毒基因。由于前两种方法难度大,且需要特殊设备和专业技术人员。因此仅抗原检测和RT-PCR(反转录-PCR)可用于临床诊断。HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性,但HIV-1抗体确认阴性者的辅助诊断。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂,试剂必须经过SDA批准注册、在有效期内,其阳性结果必须依据试剂说明书经中和试验确认。HIV-1P24抗原检测的敏感性为30-90%,该结果仅作为HIV感染的辅助诊断依据,不能据此确诊;HIV-1 P24抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除HIV感染,临床中一般不作为常规诊断项目。

核酸检测
HIV核酸检测可用于HIV感染的辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效判定、预测疾病进展等。常用的HIV病毒载量检测方法包括逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)以及实时荧光定量PCR技术。值得注意的是,每一种HIVRNA定量系统都有其最低检测限,即可以测出的最低拷贝数或国际单位,RNA定量检测时未测出不等于样品中不含有病毒RNA,因此HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的实验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。
HIV核酸定性检测也可用于HIV感染的辅助诊断,在分析HIV基因亚型和变异等基础研究中应用。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。报告定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。此外,利用核酸检测方法的高度敏感性,使用集合核酸扩增检测技术和方法,对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测,可及时发现窗口期感染者。该方法较单份样品的核酸检测具有更高的成本效益。aware天猫
不清楚这个易瑞什么来路,目前的基因检测主要有2类,一类是通过SNP位点(基本上是以SNP芯片为手段,也有针对单基因或少数几个基因位点的使用的是PCR加测序或分型的方式),还有一类是对全基因组进行测序,一般目前采用的是Hiseq X-ten测序。
价格上第一种如果是几百万个SNP位点的一般是1000元左右,如果是单基因或少数几个基因的也就几十块钱。第二种全基因组测序的一般测序深度30X以上,90G左右数据,测序费用大概在8000左右,分析snp和Indel的变异费用在1000左右。
但是,目前完全不建议做。因为SNP的变异与疾病和表型的研究完全不够充分。单基因的遗传疾病根本不用测序自己就看出来了,多基因的复杂疾病基因遗传因素所占比例有限,只是一个相关概率问题,而且即便知道了也没什么手段,早点拿到的数据也是一堆ATCG和SNP变异和所谓风险值。
还有测序和数据分析费用在飞速下降,目前上万的全基因组测序同样的数据可能1年后只用几百块,真正有效的解读也还要等到几年后,没必要花这个冤枉钱。
但是以下人群有这个切实需要:肿瘤的突变分型(目前并没有特别靠谱的高通量测序产品,主要还是基于荧光定量PCR的检测试剂盒),新生儿的遗传病筛查(看个人接受程度)
不清楚这个易瑞什么来路,目前的基因检测主要有2类,一类是通过SNP位点(基本上是以SNP芯片为手段,也有针对单基因或少数几个基因位点的使用的是PCR加测序或分型的方式),还有一类是对全基因组进行测序,一般目前采用的是Hiseq X-ten测序。
价格上第一种如果是几百万个SNP位点的一般是1000元左右,如果是单基因或少数几个基因的也就几十块钱。第二种全基因组测序的一般测序深度30X以上,90G左右数据,测序费用大概在8000左右,分析snp和Indel的变异费用在1000左右。
但是,目前完全不建议做。因为SNP的变异与疾病和表型的研究完全不够充分。单基因的遗传疾病根本不用测序自己就看出来了,多基因的复杂疾病基因遗传因素所占比例有限,只是一个相关概率问题,而且即便知道了也没什么手段,早点拿到的数据也是一堆ATCG和SNP变异和所谓风险值。
还有测序和数据分析费用在飞速下降,目前上万的全基因组测序同样的数据可能1年后只用几百块,真正有效的解读也还要等到几年后,没必要花这个冤枉钱。
但是以下人群有这个切实需要:肿瘤的突变分型(目前并没有特别靠谱的高通量测序产品,主要还是基于荧光定量PCR的检测试剂盒),新生儿的遗传病筛查(看个人接受程度)

荧光定量PCR原理等大家都已经很熟了,我就不细说了,主要是写一些有人问过的事,希望写的内容是大家都关心的。

普通PCR与荧光定量PCR技术区别?

简单的讲PCR技术最早是用于扩增一段特异的PCR片段,用于克隆、测序等实验,后来也将其用于样本中特异的PCR片段有无或非很粗的相对定量,而荧光定量PCR技术则是为了测定样本中特异的PCR片段相对及绝对量,是一种测定特异的PCR片段含量的方式。如测定病人样本中病原体的含量、实验样本中某一特定的mRNA的含量等。

前些年有人讲过普通PCR后,通过电泳也可以进行定量,其实是将PCR产物的定量与PCR样本中模板定量相混了。近两年没有人再讲这类的话了。

SybrGreen、Taqman、Molecularbeacon、LUX这些方法如何选择?

从实验成本来讲,SybrGreen是最好的,基本上就是普通PCR加上一点SybrGreenI荧光染料即可,其信号强度也很好,还可以进行融解曲线分析等,但缺点是只能在一个反应管内进行一种PCR反应的检测,另一个问题是非特异性扩增会影响实验结果,当然也有一些技术解决这些问题,后面会讲到。对于研究人员来讲,如果需要检测的基因很多,而每个反应管中进行一种PCR反应的检测可以满足实验要求,则SybrGreen是最好的选择。

如果需要进行多通道实验,即在一个反应管中进行2种或以上的反应,则要选择其他的方法,最常用的是Taqman、Molecularbeacon,这两种都是探针的方式,由于增加了探针的特异性,因此其扩增曲线反映的就是特异性产物的扩增曲线,不含有非特异性扩增的成分。因此商业用途的检测试剂盒大都采用这一技术,以减少非特异性产物造成错误结论的可能性。其缺点在于探针成本较高,有时设计的探针并不合适,有造成损失的可能性。并且要进行较多的实验条件的优化。这两种探针技术用于商业目的时都有专利问题,据说取得Molecularbeacon的许可权的成本相对较低,但只是据说。

另一种值得一提的是LUX探针,它也可进行多通道实验,但它没有Taqman和Molecularbeacon方法的增加探针特异性的功能,因此只能是一种折中的方案,如果不考虑多通道实验,则不如SybrGreen法.


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